测定法
【专利摘要】本发明公开了用于检测样品中的活性酶的测定装置(1)。所述测定装置(1)包含以下组件：(a)其上可放置样品的放置区(10)；(b)基质(20)，其与所述放置区(10)可操作连接，使得样品当出现(例如放置)在所述放置区(10)时可沿所述基质(20)迁移；(c)在所述基质(20)上的至少一个独特捕获位置(30)，其中各独特捕获位置(30)远离放置区(10)，以及其中样品可跨越所述独特捕获位置(30)迁移；(d)存在于各独特捕获位置(30)或者界定各独特捕获位置(30)的捕获工具(40)，其中所述捕获工具(40)能够与所述酶结合，使得所述酶的所述样品的至少一部分保留在至少一个独特捕获位置(30)；和(e)提供与所述捕获工具(40)结合的活性酶存在情况的选择性指示的选择性指示工具(50)或者其至少一个组分。
【专利说明】测定法
发明领域
[0001]本发明涉及酶测定法的领域。
[0002]具体而言，本发明涉及酶活性条(strip)测定法。
[0003]更具体而言，本发明涉及使用所述测定法的测定装置和方法以及所述方法的用途。所述测定装置和测定法可检测活性酶。所述活性酶可以是诸如植酸酶或酸性磷酸酶等磷酸酶，或者是糖苷水解酶，例如木聚糖酶、β -葡聚糖酶或淀粉酶。在一个更优选的方面，所述活性酶为植酸酶。
[0004]本发明对用于多种工业应用有用，例如检测生物燃料生产、去污剂组合物中的活性酶以及检测食品和动物饲料中的活性酶。
_5] 发明背景
测定分析物特别是酶的存在与否，在实验室以及在如食品和动物饲料、生物燃料生产及洗衣皂和洗衣粉等多个领域中时常为必需的。通常将诸如免疫测定法等测定法用于此目的。
[0006]酶联免疫吸附测定法(ELISA)可用于检测样品中抗体或抗原的存在情况。在所述方法中，抗体与固定在表面的抗原结合，反之亦然。此抗体与可产生可检测信号的酶连接，所述可检测信号通常为颜色变化。
[0007]另一种常见类型的测定法或免疫测定法为侧流测定法。在所述测定法中，检测沿固体支持物流动的样品中分析物的存在情况。分析物或者诸如抗体等与所述分析物结合的试剂，然后与支持物中已用抗原或抗体处理过的线或区结合。
[0008]ELISA和侧流测定法二者亦可以是夹心测定法。这意味着样品首先与捕获抗体接触，所述捕获抗体与待测抗原结合。然后所述抗原与另外的抗体结合，在侧流测定法的情况下所述抗体可能位于固定的测试线。由此所述抗原夹在至少两种抗体之间。所述第二抗体与可检测信号相关。
[0009]许多上述类型的测定法或免疫测定法确定特定酶的存在情况。
[0010]然而，在一些样品中，酶虽然存在但是已通过例如热或化学灭活而失活。在所述情况下，现有测定法仍然检出酶的存在。
[0011]例如，US4425438描述使用柱而不是侧流系统的测定法。样品流过覆盖有分析物吸收剂的珠粒区。其中分析物结合发生的区得到分析物量的测定。另一种柱测定法在US5073484中描述，其中液体分析物的定量测定利用沿流动路径的间隔区进行。
[0012]例如在US5451504中描述的侧流装置，通常具有不同的区用于样品的沉积、分析物的捕获或固定以及捕获分析物或分析物复合物的检测。这类装置并未定量所述分析物或者当分析物为酶时未确定活性。
[0013]在US6183972中公开的侧流测定法使用多个捕获位置或捕获带来捕获标记的抗分析物抗体并提供可检测信号。所述带提供独特的信号模式，其当以数学法组合以产生单调的剂量-反应曲线时，指示样品中分析物的浓度。
[0014]US5229073描述一种侧流测定法，其使用多个捕获位置以半定量样品中分析物的量。
[0015]大分子(例如>3000道尔顿)可利用US6358548的侧流装置检测。根据所述实施方案，捕获位点处线条数的色度(colour intensity of number of lines)给出分析物的量的指示。
[0016]US7425302公开了其中反应物为干燥的的侧流法。加入液体样品使干反应物复溶。此方法基于颜色变化的强度定量分析物。特定酶G6ro的活性通过发生颜色变化所耗费的时长来确定，该时长为G6ro与其底物反应的迅速程度的衡量。然而，US7425302的方法特别地限于G6H)并且酶并未保留在不同的捕获位置。
[0017]W02005/014847描述标准侧流夹心免疫测定法检测诸如植酸酶、木聚糖酶和淀粉酶等酶的用途。通过所得颜色变化的强度可至少部分地确定所述酶的量。W02007/001895描述胶体金夹心测定法，其特别地用于检测大肠杆菌该cWi)植酸酶。此胶体金夹心测定法包含免疫识别植酸酶的第一单克隆抗体和缀合至检测工具的第二抗体。
[0018]因此，先前使用的某些测定法可能仅提供样品中酶的定量测定，但并不能确定所述酶的活性或者不能特异地鉴别活性酶。其它测定法需要对捕获条带进行复杂的数学分析以确定分析物浓度。
[0019]因此需要仅检测酶的活性形式的测定法。如果该测定法可提供至少某些半定量信息，其亦将是有利的。
[0020]本发明试图克服先有技术装置和方法的某些问题。
[0021]现在将阐述本发明。为便于参考的目的，我们在一个或多个标题下阐述本发明的要素。要注意的是，各标题下的教导亦适用于其它标题下的教导。例如，各阐述的关于本发明装置的优选要素和方面同样是关于本发明方法或者本发明用途的优选要素或方面。同样，各阐述的关于本发明的方法或用途的优选要素和方面同样是关于本发明的装置的优选要素或方面。
[0022]概沭方面
在大的方面，本发明涉及检测样品中活性酶的酶测定法和装置，以及涉及用于确定样品中活性酶的存在情况的方法。
[0023]具体而言，本发明涉及用于进行所述测定法、特别是侧流测定法的装置和试剂盒，以及用于进行侧流测定法和免疫测定法的装置。
[0024]一般实施方案
在一个实施方案中，本发明提供用于检测样品中活性酶的测定装置。
[0025]所述装置包含:(a)其上可放置样品的放置区；(b)基质，其与所述放置区可操作连接，手段样品当存在(例如放置)于所述放置区时可沿所述基质迁移；(c)在所述基质上的至少一个独特的捕获位置，其中各独特的捕获位置远离放置区，以及其中样品可跨越所述独特捕获位置迁移；(d)存在于各独特捕获位置或者界定各独特捕获位置的捕获工具，其中所述捕获工具能够与所述酶结合，使得所述酶的所述样品的至少一部分保留在至少一个独特捕获位置；和(e)提供与所述捕获工具结合的活性酶存在情况的选择性指示的选择性指示工具或者其至少一个组分。
[0026]在另一个实施方案中，本发明提供确定样品中活性酶存在情况的方法，其中将所述样品置于本发明的测定装置的放置区以及所述装置的选择性指示工具指示活性酶是否存在。
[0027]在另一个实施方案中，本发明提供确定样品中活性酶水平的方法，其中将所述样品置于本发明的测定装置的放置区以及所述装置的选择性指示工具半定量地指示存在的活性酶的量。
[0028]在另一个实施方案中，本发明提供包含本发明的测定装置或者能够形成本发明的测定装置的试剂盒。
[0029]在另一个实施方案中，本发明提供确定样品中活性酶存在情况的方法，其中所述方法包括以下步骤:
a)使至少一部分样品与捕获工具接触，籍此酶被所述捕获工具捕获；
b)给捕获的酶提供合适底物，其中所述底物与所述捕获的酶反应生成酶产物；
c)提供能够与所述酶产物反应的活性物质，其中所述活性物质与所述酶产物反应生成不溶性产物；和
d)检测在步骤c)中获得的不溶性产物，其中所述检测与所述样品中活性酶的存在情况和/或量相关。
[0030]某@优势
本发明的一个优势为，所述装置和使用所述装置的方法使操作者能够鉴定样品中的活性酶。
[0031]本发明另一个优势为，所述装置和使用所述装置的方法使操作者能够以简单的方式鉴定样品中的活性酶，以及在一些情况中至少以半定量的方式鉴定。
[0032]本文所用术语“半定量的”意指相对量、近似量或已知范围内的量。
[0033]优选术语“半定量的”意指活性酶水平的估计量，即活性酶的“低的”、“可接受的”或“高的”水平。然而，其不排除对单位的精确定量测定。例如这可通过捕获区中更多的独特捕获位置或者通过测定或观察颜色形成的强度或者通过测定或观测颜色变化来获得。
[0034]本发明另外的优势在本文中提及。
[0035]一般方面
在一方面，所述测定装置包含其中可放置样品的放置区。优选所述样品为液体样品。优选所述样品为食品或饲料样品或者包含食品或饲料组分的样品。将基质与所述放置区可操作连接，使得样品可沿基质自放置区迁移。优选所述基质为诸如硝酸纤维素等材料。
[0036]本申请的测定装置的基质包含远离放置区的至少一个独特捕获位置。样品可跨越所述捕获位置迁移。优选使用至少两个捕获位置。优选使用至少三个捕获位置。优选使用三个捕获位置。
[0037]本发明的测定装置中的各捕获位置，均存在捕获工具。所述捕获工具能够与待通过所述测定装置检测的酶结合。至少一个酶样品保留在至少一个捕获位置。所述捕获工具优选为抗体以及最优选所述捕获工具为与酶结合的抗体。可针对酶本身或者针对其组分(例如其片段和/或其表位)产生所述抗体。
[0038]将选择性指示工具用于本发明的测定装置以提供与捕获工具结合的活性酶存在情况的选择性指示。优选所述选择性指示工具包含沉淀反应和/或提供在产物形成后发生的可见或紫外波长的可测定变化。颜色变化可通过底物与酶的反应引起。与底物的反应表明所述酶为活性的以及不只是以无活性或变性形式存在。[0039]优选可见颜色变化意指可通过肉眼或者通过机械读数器和/或通过电子读数器观测到的颜色变化。
[0040]所述选择性指示工具的全部或至少某些组分存在于测定装置中。对于一些实施方案，全部选择性指示工具均存在于测定装置之中和/或之上。在其它实施方案中，所述测定装置包含所述选择性指示工具的至少一个组分并且所述装置提供有选择性指示工具的其它组分(例如作为试剂盒)。因此，在使用中，使用者拥有选择性指示工具的全部必要组分以利用所述装置测定活性酶。
[0041]本发明为有利的，因其提供可用于检测活性酶的新型而简单的测定法。这在生物乙醇、去污剂以及食品和饲料工业中尤其有用，其中可利用目前可得的测定法将酶检测为存在，但例如由于热处理或化学处理所致的失活而为不可得的。此外，本发明的测定法和方法可用于确定是否需要饲料或食品添加剂的额外的活性酶。所述方法亦可用于诸如食品或饲料产品等产品的质量控制。
[0042]本发明的另一方面为，其提供半定量地确定样品中活性酶的量的方法。优选此半定量方法与指示结合酶存在情况的捕获区的数量有关。
[0043]本发明又一方面为，其提供确定食品或饲料中活性酶水平的方法，以及确定是否需要额外的酶或者饲料或食品添加剂的方法。所述方法亦可用于诸如食品或饲料产品等产品的质量控制。
[0044]本发明可以试剂盒的形式出现。所述试剂盒将使操作者能够优选在实验室外进行所述测定法。所述试剂盒可提供进行所述测定法所需的全部试剂。所述试剂的全部或某些可以呈干燥形式。
[0045]优选通过本发明的测定法或测定装置检测的活性酶为磷酸酶或糖苷水解酶，优选酸性磷酸酶、植酸酶、木聚糖酶、淀粉酶或β -葡聚糖酶。
[0046]在一个更优选的方面，通过本发明的测定法或测定装置检测的活性酶为磷酸酶，优选酸性磷酸酶，更优选植酸酶。
[0047]术语“植酸酶”意指这样的蛋白质或多肽，其能够催化包括植酸盐/植酸在内的磷酸的酯的水解，并释放无机磷酸盐。除植酸盐之外，某些植酸酶能够水解至少某些中度磷酸化的肌醇磷酸盐。
[0048]诸如小麦和大麦等某些谷类的非淀粉多糖(NSP)部分增加肠内粘度，其妨碍营养物的扩散。此抗营养作用可通过添加木聚糖酶和/或β_葡聚糖酶来减少，所述酶分别分解半纤维素聚合物木聚糖和葡聚糖。
[0049]向饲料中添加在其它补充剂中的α-淀粉酶以改善饲料的淀粉利用。
[0050]向动物饲料中添加植酸酶，例如来源于布丘氏菌属iButtimxollei sp.)的6_植酸酶BP17，以增加磷酸盐可用性，从而增加产品的营养价值。例如在加热和高压下的饲料加工，可使植酸酶变性并降低其活性。本发明提供一种半定量测试法，其可具体地得到存在于饲料中的植酸酶活性的加工后水平的指示。
[0051]在一个非常优选的方面，通过本发明检测的活性酶为植酸酶，更具体为6-植酸酶。
[0052]在一个非常优选的方面，待测活性酶为BP17。BP17为布丘氏菌属植酸酶的酶变体。BP17的序列(不包括信号肽)如下:
【权利要求】
1.一种用于检测样品中的活性酶的测定装置(1)，所述装置包含:(a)其上可放置样品的放置区(10)；(b)基质(20)，其与所述放置区(10)可操作连接，使得样品当出现(例如放置)在所述放置区(10)时可沿所述基质(20)迁移；(c)在所述基质(20)上的至少一个独特捕获位置(30)，其中各独特捕获位置(30)远离放置区(10)，以及其中样品可跨越所述独特捕获位置(30)迁移；(d)存在于各独特捕获位置(30)或者界定各独特捕获位置(30)的捕获工具(40)，其中所述捕获工具(40)能够与所述酶结合，使得所述酶的所述样品的至少一部分保留在至少一个独特捕获位置(30);和(e)提供与所述捕获工具结合的活性酶存在情况的选择性指示的选择性指示工具(50)或者其至少一个组分。
2.依照权利要求1的测定装置(1)，其中所述放置区(10)为吸收垫。
3.依照权利要求1或权利要求2的测定装置(1)，其中所述放置区(10)在所述基质(20)的一端。
4.权利要求1-3中任一项的测定装置(1)，其中所述装置包含多个独特捕获位置(30)。
5.权利要求1-4中任一项的测定装置(1)，其中所述装置包含多于两个独特捕获位置`(30)。
6.权利要求1-5中任一项的测定装置(1)，其中所述装置包含三个独特捕获位置(30)。
7.权利要求5或权利要求6的测定装置(1)，其中各独特捕获位置处的捕获工具(40)的量为不同的或相同的。
8.权利要求7的测定装置(1)，其中各独特捕获位置(30)处的捕获工具(40)的量随着所述位置远离所述放置区(10)的程度而增加或减少。
9.权利要求1-8中任一项的测定装置，其中所述装置包含封闭试剂。
10.权利要求9的测定装置(1)，其中所述封闭试剂与所述装置直接结合。
11.权利要求9或权利要求10的测定装置(1)，其中所述封闭试剂为表面活性剂或包含表面活性剂。
12.权利要求9-11中任一项的测定装置(1)，其中所述封闭试剂为表面活性剂。
13.权利要求11或权利要求12的测定装置(1)，其中所述封闭试剂为吐温。
14.权利要求1-13中任一项的测定装置(1)，其中所述基质(20)为吸收性材料。
15.权利要求1-14中任一项的测定装置(1)，其中所述基质(20)为硝酸纤维素或包含硝酸纤维素。
16.权利要求1-15中任一项的测定装置(1)，其中所述选择性指示工具(50)包含沉淀反应。
17.权利要求1-16中任一项的测定装置(1)，其中所述选择性指示工具(50)包含或提供可见的颜色变化。
18.权利要求17的测定装置(1)，其中所述颜色变化通过酶底物的反应形成与活性物质反应的部分而引发。
19.权利要求18的测定装置(1)，其中所述底物与所述基质(20)结合。
20.权利要求18或权利要求19的测定装置(1)，其中所述底物为使用/具有磷酸根供体的磷酸酶底物。
21.权利要求20的测定装置(1)，其中所述磷酸酶底物为2-磷酸基-L-抗坏血酸三钠(AsAP)。
22.权利要求18-21中任一项的测定装置(1)，其中所述活性物质为四唑S化合物。
23.权利要求22的测定装置(1)，其中所述活性物质为氮蓝四唑拉化合物。
24.权利要求23的测定装置(1)，其中所述活性物质为氯化氮蓝四唑.(NBT)。
25.权利要求22的测定装置(1)，其中所述活性物质为卤代硝基四唑爲化合物。
26.权利要求25的测定装置(1)，其中所述活性物质为碘硝基四唑爵化合物。
27.权利要求26的测定装置(1)，其中所述活性物质为氯化碘硝基四唑1?(INT)。
28.权利要求18-27中任一项的测定装置(1)，其中所述磷酸酶底物在反应增强剂存在下与所述活性物质反应。
29.权利要求28的测定装置(1)，其中所述反应增强剂与第二基质结合。
30.权利要求28或权利要求29的测定装置(1)，其中所述反应增强剂为吩嗪化合物。
31.权利要求28-30中任一项的测定装置(1)，其中所述反应增强剂为硫酸甲酯化合物。
32.权利要求28-31中任一项的测定装置(1)，其中所述反应增强剂为吩嗪硫酸甲酯(PMS)。
33.权利要求1-32中任一项的测定装置(1)，其中所述捕获工具(40)为相同的。
34.权利要求1-33中任一项的测定装置(1)，其中所述捕获工具(40)为抗体。
35.权利要求34的测定装置(1)，其中所述抗体为针对所述酶或其组分(例如其片段和/或其表位)产生的抗体。
36.权利要求34或权利要求35的测定装置(1)，其中所述抗体为多克隆或单克隆抗体。
37.权利要求1-36中任一项的测定装置(1)，其中所述样品为含水样品。
38.权利要求1-37中任一项的测定装置(1)，其中所述样品来源于饲料或饲料添加剂。
39.权利要求1-38中任一项的测定装置(1)，其中所述样品为来自饲料或饲料添加剂的提取物。
40.权利要求1-39中任一项的测定装置(1)，其中所述样品为来自饲料颗粒的提取物。
41.权利要求1-40中任一项的测定装置(1)，其中所述酶为酸性磷酸酶。
42.权利要求1-41中任一项的测定装置(1)，其中所述酶为植酸酶。
43.权利要求42的测定装置(1)，其中所述植酸酶为6-植酸酶，例如植酸酶BP17。
44.权利要求1-41中任一项的测定装置(1)，其中所述酶为木聚糖酶。
45.权利要求1-44中任一项的测定装置(1)，其中所述迁移为纵向的。
46.权利要求1-45中任一项的测定装置(1)，其中所述捕获位置(30)垂直于样品的迁移流。
47.权利要求1-46中任一项的测定装置，其中所述装置为条或棒。
48.权利要求1-47中任一项的测定装置，其中所述装置包含封盖。
49.权利要求48的测定装置，其中所述封盖由所述装置中界定两个部分的折叠形成。
50.权利要求49的测定装置，其中所述装置组件(a)-(e)的某些或全部存在于一个部分，并且其中所述装置组件(a)-(e)的某些或全部存在于另一部分。
51.权利要求49或权利要求50的测定装置，其中所述选择性指示工具(e)或其至少一个组分存在于一个部分，并且其中所述装置组件(a)-(d)的某些或全部存在于同一部分或另一部分。
52.权利要求49-51中任一项的测定装置，其中所述选择性指示工具(e)或其至少一个组分存在于一个部分，并且其中所述装置组件(a)-(d)存在于同一部分或另一部分。
53.权利要求48-52中任一项的测定装置，其中所述选择性指示工具(e)或其至少一个组分存在于封盖之中或之上。
54.一种用于至少半定量地评估饲料或饲料添加剂中的活性植酸酶水平的测定装置⑴。
55.一种用于至少半定量地评估饲料或饲料添加剂中的活性木聚糖酶水平的测定装置⑴。
56.—种确定样品中的活性酶存在情况的方法，其中将所述样品置于权利要求1-55中任一项的测定装置(1) 的放置区(10)上以及所述装置的选择性指示工具(50)指示活性酶是否存在。
57.一种确定样品中的活性酶水平的方法，其中将所述样品置于权利要求1-55中任一项的测定装置(1)的放置区(10)上以及所述装置的选择性指示工具(50)半定量地指示存在的活性酶的量。
58.权利要求56或57的方法，其中所述样品获自食品或饲料。
59.权利要求56-58中任一项的方法，其中所述待测的活性酶为植酸酶。
60.权利要求56-58中任一项的方法，其中所述待测的活性酶为木聚糖酶。
61.权利要求56-60中任一项的方法，其中所述方法用于确定是否需要向食品或饲料中添加额外的酶。
62.权利要求56-61中任一项的方法，其中所述方法用于确定是否需要向食品或饲料中添加额外的植酸酶。
63.权利要求56-62中任一项的方法，其中所述方法用作质量控制的形式。
64.一种试剂盒，所述试剂盒包含或能够形成权利要求1-55中任一项的测定装置(1)。
65.权利要求64的试剂盒，所述试剂盒包含通过添加液体或含水样品复溶的干燥试剂。
66.权利要求64或65的试剂盒，所述试剂盒另外包含待通过操作者添加的至少一种液体试剂。
67.权利要求66的试剂盒，其中所述液体试剂为四唑《溶液。
68.一种确定样品中的活性酶存在情况的方法，其中所述方法包括以下步骤:a)使至少一部分样品与捕获工具接触，籍此酶被所述捕获工具捕获；b)给捕获的酶提供合适底物，其中所述底物与所述捕获的酶反应生成酶产物；c)提供能够与所述酶产物反应的活性物质，其中所述活性物质与所述酶产物反应生成不溶性产物；和d)检测在步骤c)中获得的不溶性产物，其中所述检测与所述样品中活性酶的存在情况和/或量相关。
69.依照权利要求68的方法，其中所述酶为如在权利要求1-67的任一项中所定义的酶。
70.依照权利要求68或权利要求69的方法，其中所述样品为如在权利要求1-67的任一项中所定义的样品。
71.依照权利要求68-70中任一项的方法，其中所述捕获工具为如在权利要求1-67的任一项中所定义的捕获工具。
72.依照权利要求68-71中任一项的方法，其中所述活性物质为如在权利要求1-67的任一项中所定义的活性物质。
73.依照权利要求68-72中任一项的方法，其中所述方法使用如在权利要求1-67的任一项中所定义的装置。
74.测定装置(1)或使用所述测定装置(1)的方法或其用途，其中所述测定装置用于检测样品中的活性植酸酶，所述装置包含:(a)其上可放置样品的放置区(10)；(b)基质(20)，其与所述放置区(10)可操作连接，使得样品当出现(例如放置)在所述放置区(10)时可沿所述基质(20)迁移；(c)在所述基质(20)上的至少一个独特捕获位置(30)，其中各独特捕获位置(30)远离放置区(10)，以及其中样品可跨越所述独特捕获位置(30)迁移；(d)存在于各独特捕获位置(30)或者界定各独特捕获位置(30)的捕获工具(40)，其中所述捕获工具(40)能够与所述植酸酶结合，使得所述植酸酶的所述样品的至少一部分保留在至少一个独特捕获位置(30);和(e)提供与所述捕获工具结合的活性植酸酶存在情况的选择性指示的选择性指示工具(50)或者其至少一个组分。
75.测定装置(1)或使用所述测定装置(1)的方法或其用途，其中所述测定装置用于检测样品中的活性植酸酶，所述装置包含:(a)其上可放置样品的放置区(10)；(b)基质(20)，其与所述放置区(10)可操作连接，使得样品当出现(例如放置)在所述放置区(10)时可沿所述基质(20)迁移；(c)在所述基质(20)上的至少一个独特捕获位置(30)，其中各独特捕获位置(30)远离放置区(10)，以及其中样品可跨越所述独特捕获位置(30)迁移；(d)存在于各独特捕获位置(30)或者界定各独特捕获位置(30)的捕获工具(40)，其中所述捕获工具(40)能够与所述植酸酶结合，使得所述植酸酶的所述样品的至少一部分保留在至少一个独特捕获位置(30)，其中所述捕获工具包含抗体；和(e)提供与所述捕获工具结合的活性植酸酶存在情况的选择性指示的选择性指示工具(50)或者其至少一个组分。
76.测定装置(1)或使用所述测定装置(1)的方法或其用途，其中所述测定装置用于检测样品中的活性植酸酶，所述装置包含:(a)其上可放置样品的放置区(10)；(b)基质(20)，其与所述放置区(10)可操作连接，使得样品当出现(例如放置)在所述放置区(10)时可沿所述基质(20)迁移；(c)在所述基质(20)上的至少一个独特捕获位置(30)，其中各独特捕获位置(30)远离放置区(10)，以及其中样品可跨越所述独特捕获位置(30)迁移；(d)存在于各独特捕获位置(30)或者界定各独特捕获位置(30)的捕获工具(40)，其中所述捕获工具(40)能够与所述植酸酶结合，使得所述植酸酶的所述样品的至少一部分保留在至少一个独特捕获位置(30)，其中所述捕获工具包含可结合BP17的抗体；和(e)提供与所述捕获工具结合的活性植酸酶存在情况的选择性指示的选择性指示工具(50)或者其至少一个组分。
77.测定装置或使用所述测定装置的方法或其用途，其中所述测定装置用于检测样品中的活性木聚糖酶，所述装置包含: (a)其上可放置样品的放置区；(b)基质，其与所述放置区可操作连接，使得样品当出现(例如放置)在所述放置区时可沿所述基质迁移；(c)在所述基质上的至少一个独特捕获位置，其中各独特捕获位置远离放置区，以及其中样品可跨越所述独特捕获位置迁移；(d)存在于各独特捕获位置或者界定各独特捕获位置的捕获工具，其中所述捕获工具能够与所述木聚糖酶结合，使得所述木聚糖酶的所述样品的至少一部分保留在至少一个独特捕获位置；和(e)提供与所述捕获工具结合的活性木聚糖酶存在情况的选择性指示的选择性指示工具或者其至少一个组分。
78.测定装置或使用所述测定装置的方法或其用途，其中所述测定装置用于检测样品中的活性木聚糖酶，所述装置包含:(a)其上可放置样品的放置区；(b)基质，其与所述放置区可操作连接，使得样品当出现(例如放置)在所述放置区时可沿所述基质迁移；(c)在所述基质上的至少一个独特捕获位置，其中各独特捕获位置远离放置区，以及其中样品可跨越所述独特捕获位置迁移；(d)存在于各独特捕获位置或者界定各独特捕获位置的捕获工具，其中所述捕获工具能够与所述木聚糖酶结合，使得所述木聚糖酶的所述样品的至少一部分保留在至少一个独特捕获位置，其中所述捕获工具包含抗体；和(e)提供与所述捕获工具结合的活性木聚糖酶存在情况的选择性指示的选择性指示工具或者其至少一个组分。
79.依照前述权利要求中任一项的测定装置或使用所述测定装置的方法或其用途，其中当所述测定装置在使用中时，所述选择性指示工具在所述测定装置之上和/或之中构成。
80.一种试剂盒，所述试剂盒包含或能够形成前述权利要求中任一项的测定装置(1)，其中向所述试剂盒中加入所述选择性指示工具(50)。
81.—种试剂盒，所述试剂盒包含或能够形成前述权利要求中任一项的测定装置(1)，其中向所述试剂盒中加入所述选择性指示工具(50)的至少一个组分。
82.前述权利要求中任一项的试剂盒，所述试剂盒提供有评分卡或参照卡。
83.基本上如本文所述并参考附图的测定装置(1)。
84.基本上如本文所述并参考附图的方法。
85.基本上如本文所述并参考附图的用途。
86.基本上如本文所述并参考附图的试剂盒。
【文档编号】G01N33/558GK103649754SQ201280033783
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2012年6月22日 优先权日:2011年7月7日
【发明者】M.F.伊萨克森, A.H.凯莱特-史密斯, N.麦克莱南, C.吉尔伯特, M.H.凯内布 申请人:杜邦营养生物科学有限公司