一种用hplc分离测定利奥西呱原料药的有关物质的方法
【专利摘要】本发明提供一种采用HPLC分离测定利奥西呱原料药有关物质的方法，所述方法采用十八烷基硅烷键合相或辛烷硅烷键合相作为填料的色谱柱，再用阴离子对试剂溶液作为缓冲液进行洗脱，并以紫外检测器对利奥西呱原料药中的有关物质进行检测。本发明所述分析方法具有专属性好，灵敏度高，准确度好，有较好的稳定性指示能力。
【专利说明】一种用HPLC分离测定利奥西呱原料药的有关物质的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药化工领域，更具体地，涉及一种采用高效液相色谱法分离测定利 奥西呱原料药的有关物质的方法。
【背景技术】
[0002] 利奥西呱，化学名为N-[4,6-二氨基-2-[l-[(2-氟苯基）甲基]-IH-吡唑并 [3, 4-b]吡啶-3-基]-5-嘧啶基]-N-甲基氨基甲酸甲酯（简称为RCGT)，其结构式如下：
[0003]
【权利要求】
1. 一种采用HPLC分离测定利奥西呱原料药中有关物质的方法，其特征是：采用以十八 烷基硅烷键合相或辛烷硅烷键合相作为填料的色谱柱；流动相由作为A相的阴离子对试剂 水溶液或其与有机溶液的混合液和作为B相的有机溶液组成，进行洗脱；采用紫外检测器 对利奥西呱原料药的有关物质进行检测。
2. 根据权利要求1所述的方法，其中所述方法是采用梯度洗脱的方式进行的，其中梯 度洗脱至少包含两个阶段梯度变化，其中第一阶段梯度变换是在〇?60min的时间内，A 相在流动相中的含量是66 %?80%，体积比；第二阶段梯度变化是第一阶段梯度变化的 时间基础上在接下来的10?60min内进行，A相在流动相中的含量由66 %?80 %变化至 31. 5%?38. 5%，体积比。
3. 根据权利要求2所述的方法，其中所述的A相是由阴离子对试剂水溶液与有机溶液 组成的，其中阴离子对试剂水溶液与有机溶液的体积比是约〇%?50%。
4. 根据权利要求1或2或3所述的方法，其中所述的有机溶液是甲醇、乙腈或其混合 物。
5. 根据权利要求4所述的方法，其中紫外检测器的检测波长在210?280nm之间；流 动相流速是〇. 5?I. 5ml/min ;色谱柱温度是20?60°C。
6. 根据权利要求5所述的方法，其中所述的阴离子对试剂是选自辛烷磺酸钠、戊烷磺 酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠和十二烷基磺酸钠中的一种或几种。
7. 根据权利要求6所述的方法，其中所述的阴离子对试剂水溶液中阴离子对试剂的浓 度是约〇. 5?5g/L ;其中所述的阴离子对试剂水溶液还加入了是约0. 5?5ml的分析纯磷 酸溶液，所述分析纯磷酸是指浓度为85%的磷酸，w/v。
8. 根据权利要求7所述的方法，其中所述的阴离子对试剂水溶液是含有浓度是约2g/L 的辛烷磺酸钠的水溶液，其中加入分析纯磷酸的量是2ml，所述磷酸的浓度是85%，w/v。
9. 一种采用HPLC分离测定利奥西呱原料药中有关物质的方法，其特征是： 色谱柱：Agilent RX C8,4.6X250mm，5ym; 检测器：UV检测器，检测波长260nm ; 流速：〇· 9 ?I. lml/min ; 柱温：20?60°C ; 梯度洗脱： 时间(min) AlH%，体积比 B相％，钵|}!比 0 73 27 20 73 27 51 35 65 52 73 27 59 73 27 A相：加入2ml磷酸溶液的浓度为约2g/L的辛烷磺酸钠水溶液：乙腈=90:10,体积比， 其中磷酸溶液的浓度是约85%，w/v ; B相：乙腈。
10. 根据权利要求9所述的方法，其中供试品溶液中利奥西呱的浓度是0. 6?5. Omg/ ml，其中，配制样品的稀释液是水和二甲基亚砜的混合溶液，其中进样体积是1?100μ 1。
【文档编号】G01N30/89GK104374861SQ201410632467
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2014年11月10日 优先权日:2014年11月10日
【发明者】文景兵, 饶万兵, 刘国柱 申请人:广东东阳光药业有限公司