本发明属于药物分析领域，具体地说，本发明涉及一种儿童维D钙咀嚼片制剂中维生素D3含量的检测方法。
背景技术：
儿童维D钙咀嚼片是一种用于儿童钙补充剂，儿童维D钙咀嚼片可补充儿童所需的钙，口服用于人体补钙剂，其中会含有维生素D3，但是当前得检测方法操作负责、检测结果准确性低。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种儿童维D钙咀嚼片制剂中维生素D3含量的检测方法。
为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：一种儿童维D钙咀嚼片制剂中维生素D3含量的检测方法，该方法是采用高效液相色谱法进行的，包括下述步骤：
（1）配制儿童维D钙咀嚼片样品溶液，所述儿童维D钙咀嚼片样品溶液包括供试品溶液和对照品溶液；
（2）将步骤(1)所得样品溶液注入高效液相色谱仪，用流动相进行等度洗脱，并记录色谱图；
其中，所述供试品溶液的制备包括下述步骤：取本品25片（规格每片含碳酸钙0.75克，相当于钙0.3克；维生素D3100国际单位（2.5微克）），精密称定，计算平均片重，研细，精密称取细粉适量（约相当于维生素D3 25μg），置100ml棕色量瓶中，加溶液[用二甲基亚砜-水（10∶2）混合溶液制成每1ml中含2,6-二叔丁基对甲酚（BHT）0.2mg的溶液] 50ml，冰水浴超声处理15分钟，并时时振摇，保持超声水浴温度不超过30℃，精密加入0.02%BHT的正己烷溶液25ml，振摇15分钟后，30℃以下离心5分钟（4000rpm），分取上层溶液，避光静置1小时后得澄清溶液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液500μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；
所述所述高效液相色谱法的色谱柱固定相填充剂氨基硅烷键合硅胶；
流动相的配制为：正己烷-异丙醇（99∶1）。
优选的，所述高效液相色谱法的洗脱顺序如下：
0-15分钟时流动相100%体积。
优选的，所述流动相的流速为1.5ml/min。
优选的，所述高效液相色谱法的色谱柱柱温为25-35℃，检测波长为265nm。
优选的，在高效液相色谱法检测步骤（2）中，首先将对照溶液注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为记录仪满量程的50% ；再将供试品溶液和杂质加样溶液分别注入液相色谱仪，采用流动相进行等度洗脱，并记录色谱图，注入液相色谱仪中样品溶液的量均为500μl。
优选的，所述高效液相色谱法的色谱柱柱温为30℃。
本发明的检测方法在同一液相条件下测定维生素D3，所述检测方法操作简便、分离度高、测定方法专属性强、检测结果准确可信。
实施方式
实施例1
（1）配制儿童维D钙咀嚼片样品溶液，所述儿童维D钙咀嚼片样品溶液包括供试品溶液和对照品溶液；
（2）将步骤(1)所得样品溶液注入高效液相色谱仪，用流动相进行等度洗脱，并记录色谱图；
其中，所述供试品溶液的制备包括下述步骤：取本品25片（规格每片含碳酸钙0.75克，相当于钙0.3克；维生素D3100国际单位（2.5微克）），精密称定，计算平均片重，研细，精密称取细粉适量（约相当于维生素D3 25μg），置100ml棕色量瓶中，加溶液[用二甲基亚砜-水（10∶2）混合溶液制成每1ml中含2,6-二叔丁基对甲酚（BHT）0.2mg的溶液] 50ml，冰水浴超声处理15分钟，并时时振摇，保持超声水浴温度不超过30℃，精密加入0.02%BHT的正己烷溶液25ml，振摇15分钟后，30℃以下离心5分钟（4000rpm），分取上层溶液，避光静置1小时后得澄清溶液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液500μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；
所述所述高效液相色谱法的色谱柱固定相填充剂氨基硅烷键合硅胶；
流动相的配制为：正己烷-异丙醇（99∶1）。