一种采用高效液相色谱法测定盐酸考尼伐坦含量的方法与流程

技术特征：

1.一种采用高效液相色谱法测定盐酸考尼伐坦含量的方法，其特征在于，包括以下色谱条件：流动相A为乙腈，流动相B为磷酸缓冲液；其中，所述磷酸缓冲液中磷酸二氢钠的浓度为0.02mol/L、十二烷基硫酸钠的质量浓度为0.5％、pH值2.8-3.2。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相A与流动相B的体积比为55-59:45-41，优选为55:45、59:41或57:43。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述磷酸缓冲液的制备方法包括将适量磷酸二氢钠和十二烷基硫酸钠加水溶解，用磷酸调节至所需pH值；优选地，所述磷酸缓冲液的pH值为3.0。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所用色谱柱为硅烷键合硅胶柱，优选为十八烷基硅烷键合硅胶柱；进一步优选为

C18，规格5μm 250×4.6mm(Cat.no.:99603)；或，

Phenomenex C18，规格5μm 250×4.6mm；或，

Agilent C18，规格5μm 250×4.6mm。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，洗脱方式为等度洗脱；

和/或，流动相流速0.9-1.1mL/min，优选1.0mL/min。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，柱温22-28℃，优选25℃。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，检测器为紫外检测器；优选为Agilent G1315B DAD检测器或Agilent G1315B VWD检测器。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，检测波长为200-280nm，优选为240nm。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，还包括供试品溶液的制备、对照品溶液的制备；

所述供试品溶液的制备包括：取样品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成约含盐酸考尼伐坦0.2mg/mL的溶液，作为供试品溶液；

所述对照品溶液的制备包括：取盐酸考尼伐坦对照品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成约含盐酸考尼伐坦0.2mg/mL的溶液，作为对照品溶液。

10.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)设置以下色谱条件：

色谱柱： C18，规格5μm 250×4.6mm；或，Phenomenex C18，规格5μm 250×4.6mm；或，Agilent C18，规格5μm 250×4.6mm；

流动相：流动相A为乙腈，流动相B为磷酸缓冲液，二者体积比为57:43；所述磷酸缓冲液的pH值为3.0；

洗脱方式为等度洗脱；

流动相流速：1.0mL/min，柱温：25℃，进样体积：10μL；

检测器为Agilent G1315B DAD检测器或Agilent G1315B VWD检测器；

检测波长为240nm；

2)供试品溶液的制备：取样品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成约含盐酸考尼伐坦0.2mg/mL的溶液，作为供试品溶液；

对照品溶液的制备：取盐酸考尼伐坦对照品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成约含盐酸考尼伐坦0.2mg/mL的溶液，作为对照品溶液；

3)检测：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品中盐酸考尼伐坦的含量。