动物组织中卡巴氧和喹乙醇代谢物残留量的检测方法与流程

技术特征：

1.一种动物组织中卡巴氧和喹乙醇代谢物残留量的检测方法，其特征在于：在样品中加入内标工作液，用偏磷酸-甲醇溶液提取样品，提取液中加入乙酸乙酯萃取，分离上层乙酸乙酯层，旋蒸至干，用甲醇-甲酸溶液定容溶解残渣，过0.22μm滤膜，用液相色谱-串联质谱仪进行定性和/或定量检测。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述内标工作液为喹噁啉-2-羧酸-d4的甲醇溶液，浓度为100 ng/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述偏磷酸-甲醇溶液中偏磷酸的浓度为50 g/L，甲醇的体积浓度为20%。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述甲醇-甲酸溶液为无水甲醇与0.5%（v/v）甲酸溶液按照体积比1：1的比例混匀制得。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：用偏磷酸-甲醇溶液提取样品2次，合并提取液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：提取液用乙酸乙酯萃取2次，合并上层乙酸乙酯层。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述液相色谱条件为：

a) 色谱柱：Thermo C18，150 mm×2.1 mm (内径)，粒度5 μm；

b) 柱温：30℃；

c) 进样量：50 μL；

d) 流动相组成及梯度洗脱条件如下：

。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述质谱条件为：

a) 离子源：电喷雾离子源；

b) 扫描模式：正离子模式(ESI+)；

c) 检测方式：多反应监测 (MRM)；

d) 电喷雾电压 (ESI) ：4000 V；

e) 碰撞气：高纯氮气；

f) 碰撞气压力：1.5 mTorr；

g) 离子源温度：450℃。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述定性检测为：用空白样品基质溶液配制成不同浓度系列的混合标准工作溶液，将样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的混合基质标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过以下范围的，则判定样品中存在对应的待测物：相对离子丰度>50%的，相对误差不超过±20%；20%<相对离子丰度≤50%的，相对误差不超过±25%；10%<相对离子丰度≤20%的，相对误差不超过±30%；相对离子丰度≤10%的，相对误差不超过±50%；

所述定量检测为：以分析物和内标物的峰面积比为纵坐标，以分析物和内标物的浓度比为横坐标，作标准工作曲线，并作标准线性回归方程，用标准工作曲线按内标法定量，样品溶液中待测物的响应值均应在标准线性回归方程的线性范围内。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于其具体步骤为：准确称取5 g样品于50 mL离心管中，加入100µL内标工作溶液，加入15 mL偏磷酸-甲醇溶液，均质2 min，10000 r/min离心10 min，将上清液转移到另一个50 mL聚丙烯离心管中；在残渣中再加入10.0 mL偏磷酸-甲醇溶液，重复上述操作，合并上清液，加15 mL乙酸乙酯，涡旋混匀2min，6000 r/min离心5 min，取上层乙酸乙酯层于鸡心瓶中，再加15 mL乙酸乙酯，重复上述操作，合并乙酸乙酯层，于45℃旋转蒸发至干，用1 mL甲醇-0.5%甲酸溶液定容溶解残渣，过0.22 μm滤膜，用液相色谱-串联质谱仪进行定性和/或定量检测。