本发明涉及环丙沙星检测的技术领域，具体为一种检测环丙沙星专用检测方法及设备。
背景技术：
环丙沙星为合成的第三代喹诺酮类抗菌药物，具广谱抗菌活性，杀菌效果好，几乎对所有细菌的抗菌活性均较诺氟沙星及依诺沙星强2~4倍，对肠杆菌、绿脓杆菌、流感嗜血杆菌、淋球菌、链球菌、军团菌、金黄色葡萄球菌具有抗菌作用。
目前检测环丙沙星的主要方法为微生物法、荧光法、高效液相色谱法、液质联用法、毛细管电泳法和酶联免疫吸附法，常用的环丙沙星检测方法是色谱检测法和免疫学检测法。
虽然这两种方法灵敏、准确，但是需要昂贵的仪器，并且样品处理繁琐，其他方式在检测过程中由于所加溶液本身的性质，容易改变环丙沙星的PH，导致检测现象不够明显，而且检测时间过长。
技术实现要素：
（一）解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种检测环丙沙星专用检测方法及设备，具备过程简单、检测结果明显和检测时间短等优点，解决了检测过程繁琐、检测结果不够明显和检测时间长的问题。
（二）技术方案
为实现上述过程简单和检测结果明显的目的，本发明提供如下技术方案：一种检测环丙沙星专用检测方法，包括以下步骤：
S1、制备A1混合液：锥形瓶100ml，1个，玻璃棒1根，在缓慢搅拌的条件下，向4ml-9ml的对苯甲醛溶液中加入10ml-15ml的无水乙醇溶液，并且缓慢搅拌，加入速度缓慢，然后静置5min-10min，得到混合液A1；
S2、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液：向装有混合液A1的锥形瓶中缓慢加入2ml-7ml的氨基苯硫酚溶液，并同时利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为2min-7min，然后静置5mim-10min，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液；
S3、制备A2：向S2中制备的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液中缓慢滴入5ml-10ml的缓冲液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为3min-8min，得到混合液A2，之后向混合液A2中缓慢滴入20ml-25ml的硝酸银溶液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为2min-7min，得到混合液A2；
S4、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末：向S3中制备的A2混合液移至检测设备上的水浴加温装置内，将水浴加温装置的温度控制在55℃-60℃之间，然后向100ml的锥形瓶内缓慢滴入6ml-11ml的双氧水溶液，并进行缓慢搅拌，之后取出锥形瓶，并将锥形瓶置入干燥箱内进行干燥，干燥箱内保持干净，干燥时间为20min-25min，之后戴上消毒手套取出锥形瓶，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末；
S5、制备检测溶液：反应皿200ml，1个，检测温度为常温，且检测环境保持干净，秤取0.03g-0.08g对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末，并将其放入200ml的反应皿中，之后向200ml的反应皿中加入5ml-10ml的纯净水，并利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为2min-7min，制得混合液A3，之后向混合液A3中加入氯化钙之后向混合液A3中加入3ml-8ml的抗氧剂TPP，并静置5min-10min；
S6、检测：将3ml-8ml的荧光探针溶液中加入3ml-8ml的甲醇，并用玻璃棒均匀搅拌，搅拌时间为3min-5min，然后滴在检测的载玻片上，在20℃-25℃的温度下静置5min-10min，使用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长，用F表示，然后加入5ml-10ml的环丙沙星溶液，在20℃-25℃的温度下静置5min-10min，用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长F1，之后计算荧光强度F2，F2=F-F1，之后根据F2的数值用波光检测仪检测出相应数值对应的环丙沙星的含量。
本发明还提供了一种检测环丙沙星专用检测设备，包括承载台和检测单元，其中承载台用于承载载玻片以及配置用化学物品，检测单元为光波检测仪，用于检测载玻片上一定范围内光波长度的检测。
优选的，所述玻璃棒的搅拌方向为顺时针搅拌。
优选的，所述缓冲液为CO2缓冲液。
优选的，所述双氧水溶液的搅拌时间为1min-6min，加温时间为2h。
（三）有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种检测环丙沙星专用检测方法及设备，具备以下有益效果：
1、该检测环丙沙星专用检测方法，在制备检测溶液的过程中由于精确控制所加溶液的用量，以及在制备过程中，对溶液搅拌均匀并且搅拌速度平缓，为此所得的检测溶液能够使检测结果明显，并且缓冲液能够防止多种溶液在混合过程改变原有溶液的PH，从而能够进一步使该检测溶液的结果更加明显，双氧水和硝酸银溶液，一方面能够提高反应速度，另一方面硝酸银溶液能够使检测溶液会与环丙沙星溶液融合地更加彻底，从而使检测结构更加明显。
2、该检测环丙沙星专用检测设备，通过检测设备上的光波检测仪能够快速根据波光的强度检测出环丙沙星的含量，从而提高了检测的效率，并且检测精准度同样能够得到提高。
具体实施方式
下面将结合本发明的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一：
一种检测环丙沙星专用检测方法，包括以下步骤：
S1、制备A1混合液：锥形瓶100ml，1个，玻璃棒1根，在缓慢搅拌的条件下，向4ml对苯甲醛溶液中加入10ml无水乙醇溶液，并且缓慢搅拌，加入速度缓慢，然后静置5min，得到混合液A1；
S2、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液：向装有混合液A1的锥形瓶中缓慢加入2ml氨基苯硫酚溶液，并同时利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为2min，然后静置5mim，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液；
S3、制备A2：向S2中制备的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液中缓慢滴入5ml缓冲液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为3min，得到混合液A2，之后向混合液A2中缓慢滴入20ml硝酸银溶液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为2min，得到混合液A2；
S4、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末：向S3中制备的A2混合液移至检测设备上的水浴加温装置内，将水浴加温装置的温度控制在55℃之间，然后向100ml的锥形瓶内缓慢滴入6ml双氧水溶液，之后取出锥形瓶，并将锥形瓶置入干燥箱内进行干燥，干燥箱内保持干净，干燥时间为20min，之后戴上消毒手套取出锥形瓶，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末；
S5、制备检测溶液：反应皿200ml，1个，检测温度为常温，且检测环境保持干净，秤取0.03g对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末，并将其放入200ml的反应皿中，之后向200ml的反应皿中加入5ml纯净水，并利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为2min，制得混合液A3，之后向混合液A3中加入氯化钙之后向混合液A3中加入3ml抗氧剂TPP，并静置5min；
S6、检测：将3ml荧光探针溶液中加入3ml甲醇，并用玻璃棒均匀搅拌，搅拌时间为3min，然后滴在检测的载玻片上，在20℃的温度下静置5min，使用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长，用F表示，然后加入5ml环丙沙星溶液，在20℃的温度下静置5min，用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长F1，之后计算荧光强度F2，F2=F-F1，之后根据F2的数值用波光检测仪检测出相应数值对应的环丙沙星的含量。
实施例二：
一种检测环丙沙星专用检测方法，包括以下步骤：
S1、制备A1混合液：锥形瓶100ml，1个，玻璃棒1根，在缓慢搅拌的条件下，向5ml对苯甲醛溶液中加入11ml无水乙醇溶液，并且缓慢搅拌，加入速度缓慢，然后静置6min，得到混合液A1；
S2、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液：向装有混合液A1的锥形瓶中缓慢加入3ml氨基苯硫酚溶液，并同时利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为3min，然后静置6min，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液；
S3、制备A2：向S2中制备的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液中缓慢滴入6ml缓冲液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为4min，得到混合液A2，之后向混合液A2中缓慢滴入21ml硝酸银溶液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为3min，得到混合液A2；
S4、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末：向S3中制备的A2混合液移至检测设备上的水浴加温装置内，将水浴加温装置的温度控制在56℃之间，然后向100ml的锥形瓶内缓慢滴入7ml双氧水溶液，并进行缓慢搅拌，之后取出锥形瓶，并将锥形瓶置入干燥箱内进行干燥，干燥箱内保持干净，干燥时间为21min，之后戴上消毒手套取出锥形瓶，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末；
S5、制备检测溶液：反应皿200ml，1个，检测温度为常温，且检测环境保持干净，秤取0.04g对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末，并将其放入200ml的反应皿中，之后向200ml的反应皿中加入6ml纯净水，并利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为3min，制得混合液A3，之后向混合液A3中加入氯化钙之后向混合液A3中加入4ml抗氧剂TPP，并静置6min；
S6、检测：将4ml荧光探针溶液中加入4ml甲醇，并用玻璃棒均匀搅拌，搅拌时间为4min，然后滴在检测的载玻片上，在21℃的温度下静置6min，使用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长，用F表示，然后加入11ml环丙沙星溶液，在21℃的温度下静置6min，用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长F1，之后计算荧光强度F2，F2=F-F1，之后根据F2的数值用波光检测仪检测出相应数值对应的环丙沙星的含量。
实施例三：
一种检测环丙沙星专用检测方法，包括以下步骤：
S1、制备A1混合液：锥形瓶100ml，1个，玻璃棒1根，在缓慢搅拌的条件下，向6ml对苯甲醛溶液中加入12ml无水乙醇溶液，并且缓慢搅拌，加入速度缓慢，然后静置7min，得到混合液A1；
S2、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液：向装有混合液A1的锥形瓶中缓慢加入4ml氨基苯硫酚溶液，并同时利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为4min，然后静置7min，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液；
S3、制备A2：向S2中制备的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液中缓慢滴入7ml缓冲液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为5min，得到混合液A2，之后向混合液A2中缓慢滴入22ml硝酸银溶液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为4min，得到混合液A2；
S4、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末：向S3中制备的A2混合液移至检测设备上的水浴加温装置内，将水浴加温装置的温度控制在57℃之间，然后向100ml的锥形瓶内缓慢滴入8ml双氧水溶液，并进行缓慢搅拌，之后取出锥形瓶，并将锥形瓶置入干燥箱内进行干燥，干燥箱内保持干净，干燥时间为22min，之后戴上消毒手套取出锥形瓶，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末；
S5、制备检测溶液：反应皿200ml，1个，检测温度为常温，且检测环境保持干净，秤取0.05g对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末，并将其放入200ml的反应皿中，之后向200ml的反应皿中加入7ml纯净水，并利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为4min，制得混合液A3，之后向混合液A3中加入氯化钙之后向混合液A3中加入5ml抗氧剂TPP，并静置7min；
S6、检测：将5ml荧光探针溶液中加入5ml甲醇，并用玻璃棒均匀搅拌，搅拌时间为5min，然后滴在检测的载玻片上，在22℃的温度下静置7min，使用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长，用F表示，然后加入7ml环丙沙星溶液，在22℃的温度下静置7min，用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长F1，之后计算荧光强度F2，F2=F-F1，之后根据F2的数值用波光检测仪检测出相应数值对应的环丙沙星的含量。
实施例四：
一种检测环丙沙星专用检测方法，包括以下步骤：
S1、制备A1混合液：锥形瓶100ml，1个，玻璃棒1根，在缓慢搅拌的条件下，向9ml对苯甲醛溶液中加入15ml无水乙醇溶液，并且缓慢搅拌，加入速度缓慢，然后静置10min，得到混合液A1；
S2、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液：向装有混合液A1的锥形瓶中缓慢加入7ml氨基苯硫酚溶液，并同时利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为7min，然后静置10min，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液；
S3、制备A2：向S2中制备的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱水溶液中缓慢滴入10ml缓冲液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为8min，得到混合液A2，之后向混合液A2中缓慢滴入25ml硝酸银溶液，并同时利用玻璃棒进行缓慢搅拌，搅拌时间为7min，得到混合液A2；
S4、制备对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末：向S3中制备的A2混合液移至检测设备上的水浴加温装置内，将水浴加温装置的温度控制在60℃之间，然后向100ml的锥形瓶内缓慢滴入11ml双氧水溶液，并进行缓慢搅拌，之后取出锥形瓶，并将锥形瓶置入干燥箱内进行干燥，干燥箱内保持干净，干燥时间为25min，之后戴上消毒手套取出锥形瓶，得到对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末；
S5、制备检测溶液：反应皿200ml，1个，检测温度为常温，且检测环境保持干净，秤取0.08g对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱粉末，并将其放入200ml的反应皿中，之后向200ml的反应皿中加入10ml纯净水，并利用玻璃棒缓慢搅拌，搅拌时间为7min，制得混合液A3，之后向混合液A3中加入氯化钙之后向混合液A3中加入8ml抗氧剂TPP，并静置10min；
S6、检测：将8ml荧光探针溶液中加入8ml甲醇，并用玻璃棒均匀搅拌，搅拌时间为5min，然后滴在检测的载玻片上，在25℃的温度下静置10min，使用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长，用F表示，然后加入10ml环丙沙星溶液，在25℃的温度下静置10min，用检测设备的光波检测仪测量其荧光波长F1，之后计算荧光强度F2，F2=F-F1，之后根据F2的数值用波光检测仪检测出相应数值对应的环丙沙星的含量。
本发明的有益效果是：该检测环丙沙星专用检测方法及设备，在制备检测溶液的过程中由于精确控制所加溶液的用量，以及在制备过程中，对溶液搅拌均匀并且搅拌速度平缓，为此所得的检测溶液能够使检测结果明显，并且缓冲液能够防止多种溶液在混合过程改变原有溶液的PH，从而能够进一步使该检测溶液的结果更加明显，双氧水和硝酸银溶液，一方面能够提高反应速度，另一方面硝酸银溶液能够使检测溶液会与环丙沙星溶液融合地更加彻底，从而使检测结构更加明显，检测设备上的光波检测仪能够快速根据波光的强度检测出环丙沙星的含量。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。