乳制品中糖皮质激素的检测方法与流程

技术特征：

1.一种乳制品中糖皮质激素的检测方法，其特征在于，包括：

(1)利用反向固相萃取柱对待测乳制品进行纯化处理；

(2)对纯化后样品进行高效液相色谱-串联质谱法检测；以及

(3)基于检测结果，确定待测乳制品中糖皮质激素的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)之前，进一步包括：利用乙酸乙酯对所述待测乳制品进行提取处理。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述提取处理是通过如下方式进行的：

A、将所述待测乳制品与乙酸乙酯进行第一接触，并将第一接触后产物进行超声和第一离心处理；

B、将第一离心处理产物上清进行吹干处理，并将吹干处理后产物与甲醇、超纯水、正己烷进行第二接触，并将第二接触后产物进行第二离心处理，第二离心处理产物的下层为提取处理后产物。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述待测乳制品为生乳、发酵乳、灭菌乳、调制乳、巴氏灭菌乳、含乳饮料，所述待测乳制品与所述乙酸乙酯的用量比为5g：15ml。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述待测乳制品为乳粉，所述待测乳制品预先溶于水中，所述待测乳制品、所述水与所述乙酸乙酯的用量比为1g：5ml：15ml。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述待测乳制品为稀奶油、奶油、无水奶油和奶酪，所述待测乳制品预先溶于水和正乙烷中，所述待测乳制品、所述水、所述正乙烷与所述乙酸乙酯的用量比为2g：5ml：5ml：15ml。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述待测乳制品为冷冻饮品，所述待测乳制品与所述乙酸乙酯的用量比为2g：15ml。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反向固相萃取柱预先进行活化处理。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述活化处理是将所述反向固相萃取柱与甲醇和超纯水进行接触进行的。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述质谱法采用下列条件：

电离方式：电喷雾电离，正离子，

毛细管电压：3.0KV，

锥孔电压：40V，

离子源温度：120℃，

锥孔反吹气流量：50L/h，

脱溶剂气温度：350℃，

脱溶剂气流量：500L/h，

电子倍增电压：650V，

扫描方式：多离子反应监测。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱采用下列条件：

流动相流动速度：0.4mL/min，

色谱柱柱温：35℃，

试液温度：4℃，

进样体积(V)：10μL，

流动相：A相，0.1％甲酸溶液；B相，乙腈溶液，

梯度洗脱：

12.一种乳制品中糖皮质激素的检测方法，其特征在于，包括：

1)称取待测乳制品5.0g，加入15mL乙酸乙酯，涡旋1min，然后超声20min，在10000r/min下离心10min，取7.5mL上清液置于试管中，在40℃±2℃下用氮气吹干；

2)用0.5mL甲醇溶解，用5mL超纯水稀释后涡旋混匀，再加入5mL正己烷，涡旋混匀，在3000r/min下离心2min，弃去上层正己烷，下层溶液过反向固相萃取柱，所述反向固相萃取柱预先用3mL甲醇，3mL超纯水活化，等快干时用5mL水除杂，然后用真空泵抽干或用洗耳球吹干，加入6mL甲醇洗脱，然后用氮气在40℃±2下吹干，用1mL的15％乙腈水溶解，涡旋，经0.22μm微孔滤膜过滤后用于高效液相色谱-串联质谱法分析，

其中，所述质谱法采用下列条件：

电离方式：电喷雾电离，正离子，

毛细管电压：3.0KV，

锥孔电压：40V，

离子源温度：120℃，

锥孔反吹气流量：50L/h，

脱溶剂气温度：350℃，

脱溶剂气流量：500L/h，

电子倍增电压：650V，

扫描方式：多离子反应监测，

液相色谱条件流动相流动速度：0.4mL/min，

高效液相色谱采用下列条件：

流动相流动速度：0.4mL/min。

色谱柱柱温：35℃，

试液温度：4℃，

进样体积(V)：10μL，

流动相：A相，0.1％甲酸溶液；B相，乙腈溶液，

梯度洗脱：