专利名称：：一种有抗炎抑菌作用的组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种有抗炎抑菌作用的组合物，属于中药
技术领域：
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背景技术：
：炎症，就是平时人们所说的"发炎"，是机体对于剌激的一种防御反应，表现为红、肿、热、痛。炎症，可以是感染引起的感染性炎症，也可以不是由于感染引起的非感染性炎症。通常情况下，炎症是有益的，是人体的自动的防御反应，但是有的时候，炎症也是有害的，例如对人体自身组织的攻击、发生在透明组织的炎症等等。呼吸系统疾病为临床常见病。根据全国医药经济信息网(CPN)的相关统计数据，2004年呼吸系统疾病用药医院市场金额感冒药占了40%,2005年前三季度医院市场的感冒用药的增长率达到了23.32%。有资料表明，我国每年约有75%的人至少患一次感冒，也就是说每年有近10亿人至少需用一次感冒药物。可见感冒药的市场是非常巨大的。同时，受化学药本身有毒副作用的影响，很多感冒患者倾向于中药治疗。
发明内容本发明所要解决的技术问题在于，提供一种具有抗炎抑菌作用，疗效确切的药物制剂。为解决上述技术问题，本发明公开了一种具有抗炎抑菌作用的组合物。所述具有抗炎抑菌作用的组合物，各种成分的重量份数比为黄芩苷50-120份，绿原酸3-20份，荭草苷3-20份，牡荆苷1-10份。所述具有抗炎抑菌作用的组合物，各种成分的重量份数比还可以为黄苳苷65-110份，绿原酸6-17份，荭草苷5-15份，牡荆苷2-8份。所述具有抗炎抑菌作用的组合物，各种成分的重量份数比还可以为黄芩苷70-91份，绿原酸8-15份，荭草苷7-14份，牡荆苷3-7份。所述具有抗炎抑菌作用的组合物，各种成分的重量份数比还可以为黄芩苷77-85份，绿原酸10-13份，荭草苷9-12份，牡荆苷4-6份。所述组合物制成片剂、粉针剂、颗粒剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、口服液、口含片或泡腾片。所述组合物在制备具有抗炎抑菌作用药物中的应用。所述组合物在制备治疗上呼吸道感染引起的各种疾病药物中的应用。所述组合物在制备治疗流行性感冒，咽炎、急慢性支气管炎、扁桃腺炎、肺炎药物中的应用。所述组合物粉针剂的制备方法如下将黄芩苷以10%的氢氧化钠溶解，将绿原酸、荭草苷、牡荆苷按比例添加，调节pH值；过滤，滤液准备冻干。冷冻干燥工艺过滤后药液分装入西林瓶中，于冷冻干燥机中冷冻干燥。-50-30匸预冻2小时，升温至-20-10。C，开始减压，升华。干燥后，压盖。本发明的优点在于成分全都是中药有效成分，药源充足，价格相对便宜。本发明中药组合物可以为片剂、粉针剂、颗粒剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、口服液、口含片或泡腾片，使用方便。具体实施方式药理毒理研究部分药效学试验主要对本发明制剂的抗炎及免疫作用进行了急性非特异性炎症、慢性非特异性炎症模型及一些免疫指标的试验。结果表明该制剂对多种致炎剂引起的炎症水肿、肉芽肿和毛细血管通透性增高均有明显的抑制作用；能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数，对大鼠、小鼠的胸腺有增重作用。故该制剂是一种具有较好的抗炎作用和增强机体防御能力的药物。安全性试验包括了静脉注射血管刺激性试验、肌肉剌激性试验、过敏试验、异常毒性、溶血试验和热原检查试验。结果表明，该制剂对家兔静脉血管及肌肉无刺激性；未引起豚鼠的过敏反应；未发生异常毒性反应；未引起家兔血红细胞溶血和凝集反应；热原检査结果无热原反应符合《中国药典》2005年版标准规定。药效学试验中本发明制剂还与黄金菊粉针剂(野菊花、金莲花、黄芩苷的重量分数比为6:12:1的配比制得)进行比对试验，结果表明本发明制剂的效果优于黄金菊粉针剂。一、药效学试验方法如下1、试验药物本发明复合制剂，每瓶装600mg。阳性对照药双黄连粉针剂(冻干)，每瓶装600mg。阴性对照0.9%氯化钠注射液。黄金菊粉针剂组黄金菊粉针剂(冻干)，每瓶装600mg。实验动物ICR小鼠，雌雄兼用，体重22士2g，动物合格证医动字08-24号。Water大白鼠，雌雄兼用，体重155士10g，动物合格证号医动字08-25号，均由陕西省中医药研究院动物中心提供。2、试验方法与结果(1)该制剂对小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响取小鼠60只，雌雄兼用，按体重随机均分为6组，空白对照组(生理盐水)，阳性对照组(双黄连粉针剂)，该制剂大、中、小剂量组，黄金菊粉针剂组。按剂量静脉给药每天一次，第二次给药1小时后静脉静脉注射0.5%伊文斯兰生理盐水0.1ml/10g，即时腹腔注射0.7%冰醋酸0.2ml/只，20分钟后脱颈椎处死，轻轻剪开腹部皮肤，用6ml生理盐水分次洗涤腹腔，用吸管吸出洗涤液，合并后加入生理盐水至10ml，3000rpm离心15分钟,取上清液于590nm比色测定。进行组间对比测验，结果该制剂与对照组比较对中、小剂量毛细血管通透性增加有显著抑制作用。中剂量尤为明显。结果见表l。表l该制剂对HAC所致小鼠腹腔毛细血管通透性影响(又士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>与对照组比较、<0.05，"p<0.01(2)该制剂对小鼠耳廓二甲苯致炎的影响取小鼠60只，雌雄兼用，按体重随机均分为6组，空白对照组(生理盐水)，阳性对照组(双黄连粉针剂)，该制剂大、中、小剂量组,黄金菊粉针剂组。空白对照组给生理盐水，按照各剂量的不同，每鼠静脉给药两次，每天一次，连续两天，第二次静脉给药后30min将每只小鼠右耳以0.02ml二甲苯涂于耳廓两面，4h后，小鼠脱颈椎处死，剪下两耳，用直径7mm的打孔器打下左右耳片，称重，以右耳片重剪去左耳片重的差值进行统计，并计算抑制率，结果见表2。表2该制剂对小鼠耳廓二甲苯致炎的影响(又土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>与对照组比较、<0.05，"p<0.01(3)该制剂对大鼠角叉菜胶致炎作用影响取大白鼠72只，雌雄兼用，按体重随机均分为6组，空白对照组(生理盐水)，阳性对照组(双黄连粉针剂)，该制剂大、中、小剂量组，黄金菊粉针剂组。空白对照组腹腔给生理盐水，其余组按剂量给药，每天一次，连续4天，于最末一次给药的30min后，用1/4针头注射器给大鼠右后趾间中部皮下注射l。/。角叉菜胶溶液0.1ml，分别在注入后lh、2h、4h、6h用容积测量法测定致炎后不同时间足趾肿胀度，以其差值作为肿胀度进行统计，比较组间差异，结果见表3。与对照组比较，大、中剂量组在给药lh后、小剂量组在2h后对大鼠足趾肿胀有显著的抑制作用，一直持续到第6h，效果明显。表3该制剂对大鼠角叉菜胶致炎的影响(又士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>与对照组比较'P<0.05，、<0.01(4)该制剂对大鼠棉球肉芽肿的影响取大白鼠60只，按体重随机均分为6组，各组大鼠均在戊巴比妥钠的麻醉下，剪掉大鼠靠头背部毛，消毒后，在大鼠背肩胛骨之间正中切一小口，轻轻用镊子分别将两个10mg灭菌的棉球植入大鼠两侧腋窝部皮下，缝合伤口，手术后开始腹腔给药，连续6天。第7天颈椎脱臼处死大鼠，取出棉球，置入瓷盘中6(TC烤箱放置10小时后称重即为肉芽重量，各组进行统计处理，与对照组比较，各剂量组对肉芽肿均有抑制作用，中剂量效果较好，结果见表4表4该制剂对大鼠棉球肉芽肿的影响(又士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>与对照组比较'p〈0.05，"p<0.01(5)该制剂对大鼠、小鼠免疫器官的影响取大白鼠58只，小鼠96只分别按休重随机分为6组，同上给药，每天腹腔注射该制剂一次，连续8天，于最后一次给药前先秤体重，给药后1小时将大鼠窒息处死，小鼠脱臼处死，取出大鼠、小鼠的胸腺、脾称湿重，比较各组脏器系数，结果(见表5、6)显示，该制剂对大鼠、小鼠胸腺有增重的趋势，二者对脾脏无影响。表5该制剂对大鼠胸腺脾脏影响(又土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表6该制剂对小鼠胸腺脾脏影响(又士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>(6)、该制剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响取小鼠60只，雌雄兼用，按体重随机均分为6组，每组10只。给药组每天分别按剂量给药，连续5天，最后一次给药1小时后每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞0.4ml。9小时后将动物脱颈处死，仰位固定在鼠板上。消毒腹部，剪开皮肤，经腹腔注入生理盐水2.0ml。转动固定板1分钟，抽取腹腔洗液lml，滴涂在干净载玻片上，每片0.2ml,共2片，放在垫有湿纱布的盘中，置37"C孵化箱中温育30分钟，取出玻片，放入生理盐水中漂洗，除去未贴片的细胞，晾干，以丙酮-甲醇液(1:1)固定5分钟，再用4%姬姆萨-瑞特氏液染色5分钟，用蒸馏水漂洗，晾千，再油镜下每载玻片计巨噬细胞数200个，计算吞噬指数与吞噬百分率。结果见表7表7该制剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能影响(又士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>与对照组比较》<0.05，"p<0.01二、体外抗流感病毒作用的实验研究实验药物本发明制剂600mg/瓶。取1瓶无菌打开瓶盖，加无菌去离子水3ml，配制成含生药400mg/ml药液，除菌后备用。实验以400mg/ml药液为原液。煮沸后无菌过滤后作为实验用原液，实验时用无菌生理盐水做2倍连续梯度稀释溶液，4。C冰箱保存备用。实验材料1.病毒流感病毒甲型PK8株购自中国医学科学院病毒所，由本实验室传代保存。病毒浓度(血凝滴度)为1:640。实验中使用流感病毒(PR8株)的浓度为80个血凝单位。2.鸡胚9~10日龄胚蛋购自西安华秦肉鸡公司，鸡胚生长良好。3.阳性药物病毒唑，华北制药秦皇岛有限公司，实验中所用的终浓度为0.25mg/ml用于阳性药物对照试验。4.鸡红细胞采取健康的公鸡血，以生理盐水洗涤3次，配成0.5%鸡红细胞悬液，用于检测病毒滴度血凝试验用。实验方法依据《中药新药研究指南》中抗病毒实验要求，采用鸡胚培养流感病毒，并用鸡红血球凝集试验检测药物抑制病毒在鸡胚中的增殖作用。1.受试药物对鸡胚毒性作用的观察常规选择生长良好的鸡胚，把该制剂溶液(含生药400mg/ml)进行2倍连续稀释到1:64(400~12.5mg/ml)，将各浓度的药液分别接种至9日龄鸡胚的尿囊腔中，每胚0.2ml，每一稀释度9个鸡胚，36.5t:孵育，逐日观察，以鸡胚生长发育良好，72h仍然存活的浓度为最大无毒浓度，逐日观察鸡胚接种后的活动、发育情况和胚体有无充血，判断药物对鸡胚的毒性作用。同时设生理盐水对照，正常鸡胚对照。以鸡胚存活的药物最大稀释度为无毒浓度。2.受试药物对流感病毒PR8株在鸡胚增殖的抑制作用实验采用流感病毒PRs株(80个血凝单位)，药物浓度为20012.5mg/ml(2倍连续稀释)。实验分为2个实验组，A组采用病毒与药物等量混合，室温下直接作用2h后接种鸡胚。B组分次接种(先接种病毒4h后，再接种不同浓度药物)。每个鸡胚尿囊腔中接种0.2ml病毒液，每一浓度接种9个鸡胚。同时设病毒、阳性药物和正常对照组。在35-C孵育72h，收获尿囊液，测定病毒血凝滴度，以"++"为血凝效价终点，并计算其几何平均滴度(GMT)，同时观察鸡胚发育情况，实验重复3次，对实验结果进行统计学分析。实验结果1.本发明制剂对鸡胚生长发育的影响本发明制剂药液在本实验中，接种药液后每日观察鸡胚存活情况，24h内死亡为非特异性死亡。72h后取胚观察，鸡胚发育正常，胚体无明显出血。除药物原液(含生药400mg/ml时，鸡胚发育较小些外，从原液到各稀释浓度下，对鸡胚未见死亡，也未见明显毒性作用，表明该制剂对鸡胚的最大无毒浓度为200mg/ml。2.该制剂药液对流感病毒鸡胚增殖的抑制作用本发明制剂溶液对甲型流感病毒PR8株的抑制实验结果显示接种受试药物72h后取胚观察，病毒对照组胚体发育偏小、有片状出血。阳性药物对照组与正常对照组的鸡胚大小基本一致，无明显充血。收获尿囊液，测定血凝滴度，计算其几何平均滴度(GMT),结果见表8。.表8该制剂对流感PRs株抑制作用测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*与病毒对照组比表l结果显示①试验A组中，流感病毒PRs株与受试药物等量混合作用2h后感染鸡胚，本发明制剂在药液浓度为25200mg/ml时，其对流感病毒PR8株有直接杀灭作用(尸<0.05)。②先病毒后药物组，药物浓度为25400mg/ml生药时，本发明制剂对流感PRg株在鸡胚内的增殖有抑制作用(P<0.05)。本实验对送检的本发明制剂体外抗流感病毒作用进行了实验研究。结果表明1.该制剂在药液浓度为25200mg/ml时，其对流感病毒PR8株有直接杀灭作用CP<0.05)。2.该制剂在药液浓度为25400mg/ml时，对流感PR8株在鸡胚内的增殖有抑制作用CP<0.05)。权利要求1、一种具有抗炎抑菌作用的组合物，其特征在于，由下列成分重量份数比的制成黄芩苷50-120份，绿原酸3-20份，荭草苷3-20份，牡荆苷1-10份。2、根据权利要求l所述的组合物，其特征在于，由下列成分重量份数比的制成黄芩苷65-110份，绿原酸6-17份，赶草苷5-15份，牡荆苷2-8份。3、根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，由下列成分重量份数比制成黄零苷70-91份，绿原酸8-15份，荭草苷7-14份，牡荆苷3-7份。4、根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，由下列成分重量份数比制成黄芩苷77-85份，绿原酸10-13份，荭草苷9-12份，牡荆苷4-6份。5、根据权利要求1-4屮任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物制成片剂、粉针剂、颗粒剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、口服液、口含片或泡腾片。6、权利要求1-4中任一项所述的组合物，在制备具有抗炎抑菌作用药物中的应用。7、权利要求1-4中任一项所述的组合物，在制备治疗上呼吸道感染引起的各种疾病药物中的应用。8、权利要求1-4中任一项所述的组合物，在制备治疗流行性感冒、咽炎、急慢性支气管炎、扁桃腺炎或肺炎药物中的应用。9、根据权利要求1-4中任一项所述的组合物的粉针剂制备方法，其特征在于将黄芩苷以10%的氢氧化钠溶解；将绿原酸、荭草苷、牡荆苷按比例添加，调节pH值；过滤，滤液分装入西林瓶中，于冷冻干燥机中冷冻干燥。-50~-30°。预冻2小时，升温至-20-l(TC,开始减压，升华，干燥后，压盖。全文摘要本发明公开了一种有抗炎抑菌作用的组合物，各种成分的重量份数比为黄芩苷50-120份，绿原酸3-20份，荭草苷3-20份，牡荆苷1-10份。本发明药物主要用于治疗上呼吸道感染引起的各种疾病，如流行性感冒，咽炎、急慢性支气管炎、扁桃腺炎、肺炎等。本发明组合物可制成片剂、粉针剂、颗粒剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、口服液、口含片或泡腾片。文档编号A61P29/00GK101411718SQ200810225959公开日2009年4月22日申请日期2008年11月7日优先权日2008年11月7日发明者张春晖,张贵君,茹韩申请人:北京宏泰康达医药科技有限公司