一种适合药物分析学样品前处理的96孔板的制作方法

本实用新型涉及一种96孔板，尤其涉及一种适合药物分析学样品前处理的96孔板。

背景技术：

96孔板是一块塑料平板，上面有96个小孔，每一个小孔可以当作一个小的试验管。与多通道移液器组合使用可大大提高试验的平型性和工作效率。96孔板的应用范围很广泛，包括浓度分析、临床检测、酶联免疫等等。

血浆药物分析试验的样品量多、包括复杂的样品前处理操作。为了提高样品前处理的效率，96孔板被大量应用。

血浆是一种成分非常复杂的基质、含有大量的内源性蛋白、多肽、激素、各种营养成分和细胞代谢废物。这些物质往往会干扰目标药物的检测分析。因此，血浆药物分析实验样品前处理的目的是将样品提纯，最大程度去除内源性基质。越纯净的样品越有利于后续的分析检测。具体做法是在血浆中加入有机试剂将药物从血浆中提取的有机试剂中，丢弃剩余的内源性基质。

96孔板目前主要适合两种样品前处理方法，即蛋白沉淀法和液-液提取法。

蛋白沉淀法是一种在血浆中加入蛋白变性试剂去除蛋白的方法。其目的是将血浆中蛋白去除掉，将与蛋白结合的药物提取到有机试剂中，最终达到纯化或浓缩样品的目的。具体流程如下：

加样：将一定体积的血浆加入到提取容器中。

加入蛋白沉淀剂：通常为有机化学试剂例如甲醇、乙醇、乙腈等，体积大于血浆体积的2倍。

涡流：涡流或振荡提取容器使血浆与提取试剂充分混匀。血浆中的蛋白质在有机试剂的作用下变性凝聚为固体颗粒。

离心：蛋白充分变性后将提取容器离心，固体蛋白颗粒处于容器底部从而与提取液分离。

分离：使用移液器分离提取液进行后续的分析检测。丢弃剩余的蛋白颗粒。

液-液提取法通过在血浆中加入不溶于水的有机试剂，将易溶于有机试剂的药物从血浆中提取出来。其主要步骤如下：

加样：将一定体积的血浆加入到提取容器中。

加入提取试剂：通常为有机化学试剂有乙酸乙酯、醚类、正己烷等。

涡流提取：涡流或振荡提取容器使血浆与提取试剂充分接触。

离心分层：提取容器经离心后，容器内的液体分为两层，多数种类的提取试剂的密度比水小处于上层，水层处于下层。上层提取试剂中含有需要检测的药物。下层水溶液中含有血浆中的大部分内源性基质，这些内源性基质对分析检测造成干扰。

分离：使用移液器分离处于上层的提取液进行后续的浓缩分析检测。丢弃下层含基质的水溶液。

常规96孔板的版面尺寸约为128×86mm，集中了96个样品提取孔，密度很大。大部分处于中间孔中的样品状态难以从侧面观察。常用的血浆药物浓度分析的96孔板为聚丙烯，材料透光性很差，导致不但中间部分样品无法从侧面观察其状态，边缘的孔径也无法观察。另外96孔的直径比较细，分离提取液时从正上方也几乎无法观察到提取孔底部的样品状态。

这种视线上的阻碍大大降低了96孔板在样品前处理过程中的应用。

当预处理方法为蛋白沉淀时，沉淀蛋白结束后分离提取液时，不易观察到底部蛋白沉淀颗粒和提取液的分界线。使用移液器分离提取液时不易判断吸液管插入液面的高度。如果移液管插入液面的高度约深。其底部的颗粒状沉淀物在虹吸产生的水流作用下漂浮起来，进入移液管中。这些颗粒状沉淀物可能堵塞移液管导致吸液体积出现误差。颗粒物还可能在随后的分析过程中堵塞分析仪器，使仪器不能正常使用或损坏。

当预处理方法为液-液提取时，无法观察上层提取试剂与下层含基质的水溶液之间的分界线，使分离工作变得十分困难。如果吸取了下层含内源性基质的水溶液，很容易干扰样品的检测。

在分离提取液后，可以进行后续的浓缩处理，使提取液中的浓度变高，有利于检测。也就是说，分离获得提取液体积越大，浓缩后浓度越高。但96孔视线上有阻碍，为了避免分离提取液时吸到蛋白沉淀颗粒或下层含内源性基质的水层，试验人员只能分离获得一部分提取液，丢弃了很多提取液。为了获得更多的提取液，试验人员往往选择透明的离心管作为提取容器替代96孔板。由于每个离心管只能提取一个样品，需要大量的体力操作如编码、单管加样和单管移液。整个样品前处理的通量大大降低。

技术实现要素：

为解决上述技术问题，本实用新型的目的是提供一种适合沉淀蛋白的96孔板。

为实现上述目的，本实用新型采用如下技术方案：

一种适合药物分析学样品前处理的96孔板，包括96孔板，所述96孔板上设置有提取管，所述提取管的底部上设置有延伸管，所述延伸管与提取管相连通布置，所述延伸管内设置有延伸杆，所述延伸杆的长度与延伸管的长度相等，所述延伸杆与延伸管之间紧密接触布置，当延伸杆在力的作用下，所述延伸杆可在延伸管内上下滑动布置，所述延伸管和延伸杆的下方设置有垫板，当延伸杆下滑动后，与垫板相接触并支撑延伸杆。

进一步的，所述的适合沉淀蛋白的96孔板，其中，所述延伸杆的材质为玻璃，或为经抛光处理的聚丙烯。

再进一步的，所述的适合药物分析学样品前处理的96孔板，其中，所述延伸管的材质为聚丙烯。

更进一步的，所述的适合药物分析学样品前处理的96孔板，其中，所述96孔板的两侧设置有支撑柱，垫板设置在支撑柱上。

再更进一步的，所述的适合药物分析学样品前处理的96孔板，其中，用于安装垫板的所述支撑柱的侧面上标有刻度尺。

再更进一步的，所述的适合药物分析学样品前处理的96孔板，其中，所述垫板设有若干层，由若干层堆叠布置，且每层的厚度均相等。

再更进一步的，所述的适合药物分析学样品前处理的96孔板，其中，所述垫板插接在支撑柱上。

借由上述方案，本实用新型至少具有以下优点：

本实用新型在提取管的下方增加了小内径的延伸管，增加了空间用于存放沉淀蛋白颗粒或液-液提取方法的下层含基质水溶液，通知在配合延伸杆的使用，将上述物质封存在延伸管内。与上方需要分离的提取试剂形成空间上的分隔。前处理方法为沉淀蛋白时，分离提取液时不易吸取到蛋白颗粒，移液体积一致性更好，样品洁净度大大提高，不易堵塞分析仪器造成损耗。前处理方法为液-液提取时，含内源性基质的水层集中于延伸管中而有机提取液在上方提取管中，两者之间接触面积大大减小并形成空间上分隔。分离提取试剂时不易吸到下层的基质。样品洁净度高，更适合检测分析。

上述说明仅是本实用新型技术方案的概述，为了能够更清楚了解本实用新型的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本实用新型的较佳实施例并配合附图详细说明如后。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本实用新型的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1是本实用新型的结构示意图；

图2是本实用新型的工作时延伸杆与垫板相接触后的结构示意图；

图3是沉淀蛋白法离心后96孔板刨面图；

图4是液-液提取法离心后96孔板刨面图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例，对本实用新型的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本实用新型，但不用来限制本实用新型的范围。

为了使本技术领域的人员更好地理解本实用新型方案，下面将结合本实用新型实施例中附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本实用新型实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。因此，以下对在附图中提供的本实用新型的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本实用新型的范围，而是仅仅表示本实用新型的选定实施例。基于本实用新型的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

实施例

如图1、图2所示，一种适合药物分析学样品前处理的96孔板，包括96孔板，所述96孔板上设置有提取管1，所述提取管1的底部上设置有延伸管2，所述延伸管2与提取管1相连通布置，所述延伸管2内设置有延伸杆3，所述延伸杆3的长度与延伸管2的长度相等，所述延伸杆3与延伸管2之间紧密接触布置，当延伸杆3在力的作用下，所述延伸杆3可在延伸管2内上下滑动布置，所述延伸管2和延伸杆3的下方设置有垫板4，当延伸杆3下滑动后，与垫板4相接触并支撑延伸杆3。通过在提取管1的底部设置有与其相连的延伸管2，并在延伸管2内装设有延伸杆，且与其紧密接触，同时也可以在力的作用下，能在延伸管内滑动，从而可以让延伸管2内装有沉淀物，提取的样品洁净度高，更适合检测分析用。

本实用新型中所述延伸杆3的材质为玻璃，或为经抛光处理的聚丙烯，同时所述延伸管2的材质为聚丙烯。

本实用新型中所述96孔板的两侧设置有支撑柱5，垫板4设置在支撑柱5上，且所述垫板4插接在支撑柱5上，方便对垫板4的安装和拆卸。

本实用新型中用于安装垫板4的所述支撑柱5的侧面上标有刻度尺，便于操作人员能准确的控制垫板4的厚度，从而最大化的提高提取的样品洁净度。

本实用新型中所述垫板4设有若干层，由若干层堆叠布置，且每层的厚度均相等，方便操作人员能对不同的要求进行不同容量的操作。

本实用新型的工作原理如下：

工作时，如图2所示，在提取管1需要对样品进行处理前，增加提取试剂，在经过一段时间的反应后，样品被离心，不需要的一部分被沉于提取管1的底部，而提取液在其上面，由于不需要的部分在被沉于提取管1的底部后，通过与延伸管2的连通，将其沉入至延伸管2内，在沉入延伸管2内后，其自身的重力下将推动延伸管2内的延伸杆3向下滑动，直至延伸杆3的下端与垫板4相接触，此时不需要的一部分几乎都被移动至延伸管2内，然后操作者就能进行提取。

实施例1

如图3所示，使用沉淀蛋白法对100微升血浆样品提取时，在提取管1中加入100微升血浆样品、再加入400微升甲醇，将96孔板置于摇板器上涡流振荡5min。血浆样品中的蛋白经甲醇充分变性后形成颗粒，同时安装50微升规格垫板4，于离心机中4500转/分钟离心10min后，延伸杆3下移至50微升刻度处。蛋白颗粒体积约为20微升以及少量提取液(约30微升)进入延伸管2中，蛋白颗粒与提取液产生空间上的分离，延伸管2上方提取液体积为450微升，移取400微升提取液于提另一普通96孔板中，提取液清澈、不含颗粒物、且体积一致。

实施例2

如图4所示，使用液-液提取法对100微升血浆样品提取时，在提取管1中加入100微升血浆、再分别加入100微升水和600微升乙酸乙酯，将96孔板置于摇板器上涡流振荡15min。安装200微升规格的垫板。于离心机中4500转/分钟离心10min。延伸杆3下移至200微升刻度处，含内源性基质的水溶液集中于延伸管中，提取管1内提取液体积约为600微升，与上层提取液产生空间上的分离。移取500微升提取液时，吸液管中样品清澈、不含下层液体。适合后续分析检测工作。

本实用新型在提取管的下方增加了小内径的延伸管，增加了空间用于存放沉淀蛋白颗粒或液-液提取方法的下层含基质水溶液，通知在配合延伸杆的使用，将上述物质封存在延伸管内。与上方需要分离的提取试剂形成空间上的分隔。前处理方法为沉淀蛋白时，分离提取液时不易吸取到蛋白颗粒，移液体积一致性更好，样品洁净度大大提高，不易堵塞分析仪器造成损耗。前处理方法为液-液提取时，含内源性基质的水层集中于延伸管中而有机提取液在上方提取管中，两者之间接触面积大大减小并形成空间上分隔。分离提取试剂时不易吸到下层的基质。样品洁净度高，更适合检测分析。

以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，并不用于限制本实用新型，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变型，这些改进和变型也应视为本实用新型的保护范围。