可同时检测双酚A、双酚F、双酚S含量的方法与流程

本发明涉及到仪器分析领域，特别是涉及到一种可同时检测双酚a、双酚f、双酚s含量的方法。

背景技术：

在食品接触材料领域，双酚s作为双酚a的替代品，它的安全性也一直备受人们的关注。

研究表明，双酚s对生物体产生的雌性激素影响与双酚a类似，也是一种内分泌干扰素(环境荷尔蒙)，具有扰乱生殖系统的危害。双酚s(bps)迁移量的测定是评价食品接触材料安全性的科学途径。我国gb9685-2016《食品安全国家标准食品接触材料及制品用添加剂使用标准》规定食品模拟物中双酚s的迁移限量为0.05mg/kg。

双酚f，又称4,4二羟基二苯基甲烷，是一种合成材料用单体。可用于合成环氧树脂、聚碳酸酯树脂、聚酯树脂和酚酫树脂、阻燃剂、抗氧剂和表面活性剂等。

cn201310105282公开了一种食品包装材料及容器迁移污染物双酚类物质的纯化富集预处理方法，该方法包括如下步骤：c18反相固相萃取小柱经甲醇和超纯水活化后上样，先用20％甲醇水溶液淋洗，再用甲醇洗脱，洗脱液经氮气吹干，用乙腈复溶残留物，过滤后进行液相色谱-荧光检测器检测。采用该预处理技术，6种双酚类物质(双酚a(bpa)、双酚b(bpb)、双酚e(bpe)、双酚f(bpf)、双酚a二缩水甘油醚(badge)和双酚f二缩水甘油醚(bfdge))的回收率在75.92％～102.10％之间，相对偏差均低于5％，准确度和精密度良好。

cn201410247394公开了一种塑料食品包装材料中双酚s迁移量的测定方法，包括[步骤1]制备标准工作溶液、食品模拟物试液和空白试液；[步骤2]采用高效液相色谱-串联三重四极杆质谱联用仪对步骤一的三种溶液分别进行液相色谱—串联三重四级杆质谱测定；以标准工作溶液中双酚s的浓度x为横坐标，以对应的测得的定量离子峰面积y为纵坐标，绘制标准工作溶液回归曲线，根据曲线得到的线性方程y＝ax+b，计算出回归曲线的斜率a和截距b；[步骤3]根据公式c＝[(y模-y空)-b]/a，计算食品模拟物试液中双酚s浓度。该方法可以准确测量出塑料食品包装材料中双酚s的迁移量，定量准确可靠，且重现性良好。

然而，cn201310105282属于对样品前处理过程的改进，操作繁琐，耗时过长；cn201410247394仅可以分析双酚s，分析时间虽有所缩短，仍不够理想。

技术实现要素：

本发明的主要目的为提供可同时检测双酚a、双酚f、双酚s含量的方法，能大幅度地减少检测时间，提高检测效率。

本发明提出一种可同时检测双酚a、双酚f、双酚s含量的方法，包括以下步骤：

将样品进行预处理，获得待检试样；

使用lc-ms/ms对所述待检试样进行检测，获得双酚a、双酚f、双酚s含量中的一种或多种；

其中，lc-ms/ms的液相条件为：

液相色谱柱：acquityuplchss或相当色谱柱，填料直径为1.8μm；色谱柱长度为100mm；色谱柱内径为2.1mm；

流动相组成与洗脱条件：色谱纯级别的乙腈和一级水，梯度洗脱条件为：

0min，40％水，60％乙腈；

3min，40％水，60％乙腈；

进样量：1μl；

柱温：40℃；

流速：0.35ml/min；

质谱条件为：

离子源：esi，离子化方式es(-)；

毛细管电压：3.4kv；

锥孔电压：35.0v；

碰撞池电压：3.55v；

分析仪电压：2.35v；

离子源温度：150℃

脱溶剂气温度：500℃；

扫描模式：多反应监测(mrm)；

碰撞能量为：

双酚a：定量离子包括m/z为212的子离子，碰撞能量为27ev，定性离子包括m/z为133的子离子，碰撞能量为13ev；

双酚f：定量离子包括m/z为105的子离子，碰撞能量为22ev，定性离子包括m/z为93的子离子，碰撞能量为30ev；

双酚s：定量离子包括m/z为108的子离子，碰撞能量为26ev，定性离子包括m/z为92的子离子，碰撞能量为34ev。

优选地，所述样品为食品接触材料。

优选地，所述样品为食品接触用塑料制品。

优选地，所述将样品进行预处理，获得待检试样之前，还包括：

建立双酚a、双酚f、双酚s的混合标准浓度曲线。

优选地，所述建立双酚a、双酚f、双酚s混合标准浓度曲线，包括：

用50％v/v乙醇配制最终浓度为0.01mg/kg、0.02mg/kg、0.05mg/kg、0.10mg/kg、0.20mg/kg的双酚a、双酚f、双酚s混合标准工作溶液，再分别加入内标物质双酚a-d16，双酚a-d16的浓度为0.02mg/kg，通过内标法进行定量，建立双酚a、双酚f、双酚s的混合标准浓度曲线。

优选地，所述双酚a、双酚f、双酚s混合标准浓度曲线的线性相关系数均大于0.998。

优选地，还包括：

在空白样品基质中添加浓度为0.01mg/kg的双酚a、双酚f、双酚s混合物，然后测定双酚a、双酚f、双酚s的含量，计算回收率，双酚a、双酚f、双酚s的回收率均在90％到110％之间。

优选地，所述将样品进行预处理，获得待检试样，包括：

取1dm²样品于烧杯中，加入已预热至70℃的50％v/v乙醇模拟液167ml，用玻璃皿盖住烧杯，并转移至已预热至70℃的烘箱中，放置2h，然后将烧杯取出，立即移除样品，再取适量模拟液，经0.22μm尼龙滤膜过滤，转移至样品瓶，样品瓶中的液体即为待检试样。

优选地，所述方法的最低检测限为0.01mg/kg。

优选地，所述方法的检测时间为3min。

本发明提出的可同时检测双酚a、双酚f、双酚s含量的方法，能快速、准确、同时定量测定双酚a、双酚f、双酚s三种物质，最低检测限可达0.01mg/kg，检测省时，减少了检测人员的工作量，易于实现批量化处理，从而大大提升了检测效率；所用耗材毒性低，萃取试剂使用量少，降低了测试人员的接触风险，同时大大降低了耗材消耗以及废液处理的成本。

附图说明

图1为本发明可同时检测双酚a、双酚f、双酚s含量的方法一实施例的流程示意图；

图2为双酚a的标准浓度曲线；

图3为双酚f的标准浓度曲线；

图4为双酚s的标准浓度曲线；

图5为双酚a的色谱图；

图6为双酚f的色谱图；

图7为双酚s的色谱图。

本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。

具体实施方式

应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

参照图1，本发明提出一种可同时检测双酚a、双酚f、双酚s含量的方法，包括以下步骤：

s10、将样品进行预处理，获得待检试样；

s20、使用lc-ms/ms对所述待检试样进行检测，获得双酚a、双酚f、双酚s含量中的一种或多种。

步骤s10中，预处理方法可参照gb5009.156-2016《食品安全国家标准食品接触材料及制品迁移试验预处理方法通则》和gb31604.1-2015《食品安全国家标准食品接触材料及制品迁移试验通则》，选择合适的食品模拟液、测试温度、测试时间以及测试样液比，进行迁移试验。

步骤s20中，lc-ms/ms的液相条件为：

1)液相色谱柱：acquityuplchss或相当色谱柱，填料直径为1.8μm；色谱柱长度为100mm；色谱柱内径为2.1mm；

2)流动相组成与洗脱条件：色谱纯级别的乙腈和一级水，梯度洗脱条件如表1所示；

3)进样量：1μl；

4)柱温：40℃；

5)流速：0.35ml/min。

表1液相色谱洗脱条件

质谱条件为：

1)离子源：esi，离子化方式es(-)；

2)毛细管电压：3.4kv；

3)锥孔电压：35.0v；

4)碰撞池电压：3.55v；

5)分析仪电压：2.35v；

6)离子源温度：150℃

7)脱溶剂气温度：500℃；

8)扫描模式：多反应监测(mrm)；

9)碰撞能量见表2-4；

表2双酚a的碰撞能量

表3双酚f的碰撞能量

表4双酚s的碰撞能量

以下实施例为具体的测定过程：

首先，建立双酚a、双酚f、双酚s的混合标准浓度曲线。

用50％v/v乙醇配制最终浓度为0.01mg/kg、0.02mg/kg、0.05mg/kg、0.10mg/kg、0.20mg/kg的双酚a(以bpa表示，cas:80-05-7)、双酚f(以bpf表示，cas:620-92-8)、双酚s(以bps表示，cas:80-09-1)混合标准工作溶液，再分别加入内标物质双酚a-d16(以bpa-d16表示，cas:96210-87-6)，双酚a-d16的浓度为0.02mg/kg，通过内标法进行定量。

双酚a、双酚f、双酚s的混合标准浓度曲线分别如图2～4所示。由图2～4容易看出，双酚a、双酚f、双酚s混合标准浓度曲线的线性相关系数均大于0.998，符合定量要求。

然后是制备待测样液，过程如下：

取1dm²样品于烧杯中，加入已预热至70℃的50％v/v乙醇模拟液167ml，用玻璃皿盖住烧杯，并转移至已预热至70℃的烘箱中，放置2h。本实施例采用的样品为食品接触用塑料制品。然后将烧杯取出，立即移除样品，再取适量模拟液，经0.22μm尼龙滤膜过滤，转移至样品瓶，获得待测样液。

然后是待测样液上机测试，具体的工作条件采用上述步骤s20中的液相条件和质谱条件。

按上述方法获得双酚a、双酚f、双酚s的色谱图，分别如图5～7所示。由图5～7可以看出，双酚a、双酚f、双酚s的出峰时间间隔较大，没有发生重叠，因而可同时进行测量。

在空白样品基质中添加浓度为0.01mg/kg的混合目标物，对本发明提供的方法进行校验。结果表明，双酚a、双酚f、双酚s的回收率如下，均在90％到110％之间，完全满足定量测试的要求。

经验证，本发明实施例提供的方法，最低检测限为0.01mg/kg，检测时间为3min。

本发明提出的可同时检测双酚a、双酚f、双酚s含量的方法，能快速、准确、同时定量测定双酚a、双酚f、双酚s三种物质，最低检测限可达0.01mg/kg，检测省时，减少了检测人员的工作量，易于实现批量化处理，从而大大提升了检测效率；所用耗材毒性低，萃取试剂使用量少，降低了测试人员的接触风险，同时大大降低了耗材消耗以及废液处理的成本。

以上所述仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。