一种用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法与流程

技术特征：

1.一种用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)样品的制备：分别称取利伐沙班对照品、乙酰草酰胺对照品、二-草酰胺-脲对照品、三胺对照品、脱氯化合物对照品、氧代邻苯二甲酰亚胺对照品、4,5-二氯化合物对照品、二胺对照品、苯胺基吗啉酮对照品、环氧代邻苯二甲酰亚胺对照品、1,1’-羰基二咪唑对照品、5-氯噻吩-2-羧酸对照品、羟基氨基邻苯二甲酰亚胺对照品、4-{4-[(5S)-5-(氨基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]苯基}吗啉-3-酮盐酸盐对照品，将各对照品分别溶于混合溶剂中，得到对照品溶液，将对照品溶液混匀，得到样品，每1L样品中含每种对照品4～6μg；

所述混合溶剂由乙腈和无机溶剂按照体积比3:1～2混匀而成，所述无机溶剂为水、磷酸溶液或含有磷酸盐及磷酸的水溶液；

(2)测定：以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以流动相A及流动相B混合进行梯度洗脱，流动相流速为0.8～1.2mL/min，用紫外检测器进行检测，检测波长为205～280nm，色谱柱柱温箱温度为30～50℃；

其中，流动相A由甲醇和含有缓冲盐、离子对试剂及磷酸的水溶液混合而成，且流动相A中甲醇的体积分数为5～10％，含有缓冲盐、离子对试剂及磷酸的水溶液中缓冲盐的浓度为10～100mmol/L、离子对试剂的浓度为5～50mmol/L、H3PO4的浓度为2～6mmol/L；

流动相B为乙腈和水的混合液，且流动相B中乙腈的体积分数为90～95％。

2.根据权利要求1所述用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于：步骤(1)中作为无机溶剂的磷酸溶液中H3PO4的浓度为0.008～0.015mol/L。

3.根据权利要求2所述用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于，步骤(2)中所述梯度洗脱按照以下设置：

4.根据权利要求1所述用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于：步骤(1)中所述含有磷酸盐及磷酸的水溶液中，磷酸盐的浓度为10～100mmol/L、H3PO4的浓度为2～6mmol/L。

5.根据权利要求4所述用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于，步骤(2)中所述梯度洗脱按照以下设置：

6.根据权利要求1所述用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于：步骤(2)中所述缓冲盐为磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐及高氯酸盐中的一种。

7.根据权利要求6所述用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于：步骤(2)中所述缓冲盐为磷酸二氢钾。

8.根据权利要求1所述用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于：步骤(2)中所述离子对试剂为己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠及十二烷基硫酸钠的一种。

9.根据权利要求1所述用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于：步骤(2)中流动相流速为1.0mL/min。

10.根据权利要求1所述用液相色谱法分离测定利伐沙班及其有关物质的方法，其特征在于：步骤(2)中所述紫外检测器的检测波长为250nm。