本发明涉及一种基于三聚硫氰酸/还原石墨烯的三价砷电化学检测方法，属于电化学传感技术领域。
背景技术：
随着现代化工业水平的不断推进，重金属污染物问题，特别是砷污染，已然成为世界性的环境问题。目前，世界上许多国家地区的水环境中都检测出砷，其浓度范围超过世界卫生组织的饮用水标准限定值(10ppb)。砷在饮用水中主要是以无机砷的形式存在即，三价砷(As(III))和五价砷(As(V))，其中As(III)的毒性最大。因此，对As(III)的检测尤为重要。与原子吸收光谱法、原子荧光法、电感耦合等离子体质谱法、紫外可见分光光度法等方法相比，电化学检测重金属元素具有设备简单、操作方便以及灵敏度高等优点，在食品、卫生、环境等领域有着重要的应用价值。
溶出伏安法对重金属的检测过程包括两个阶段，即富集过程和溶出过程。在电位扫描过程中记录i-E曲线，每种金属离子对应一个溶出电流峰，通过峰高与被测离子浓度的关系对溶液中的重金属离子进行定量分析。这种检测方法具有灵敏度高、仪器简单、操作方便、检测限低、抗干扰等优点。近年来，重金属的电化学检测与吸附材料之间的联系越来越密切。As(III)对巯基具有强亲和力，因此，采用富巯基纳米材料修饰电极将极大提高对As(III)检测的灵敏度与选择性。三聚硫氰酸(TTCA)结构中含有1,3,5-三嗪母核和三个巯基，为工业常用原料，方便、易得且价廉。据结构分析，TTCA可用于对As(III)的选择性预富集，但在重金属的电化学检测领域并未见有相关应用。此外，二维纳米材料被认为是一种可能广泛应用于污染物检测领域的新型非金属材料，具有吸附能力强、比表面积大、导电性能优异等优点，在电化学传感领域有着举足轻重的地位。为了提高重金属离子的电化学检测方法的灵敏度，本发明结合TTCA和石墨烯的特性，制备三聚硫氰酸/还原石墨烯(TTCA/rGO)纳米复合材料，建立基于TTCA/rGO修饰电极的三价砷电化学检测方法，用于对三价砷的灵敏性、准确性和选择性检测。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供了基于三聚硫氰酸/还原石墨烯的三价砷电化学检测方法，它具有检测灵敏、准确、选择性好、简单快速的优点。
本发明是这样实现的，基于三聚硫氰酸/还原石墨烯的三价砷电化学检测方法，其特征在于，将三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料涂覆于金电极表面，制成的三聚硫氰酸/还原石墨烯修饰金电极作为工作电极，银/氯化银作为参比电极，铂丝作为对电极，将工作电极、参比电极和对电极一起置于含有三价砷的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中，工作电极表面修饰的三聚硫氰酸/还原石墨烯中含有大量的巯基，通过砷-硫键将溶液中的三价砷选择性预富集到电极表面；通过电化学工作站在工作电极上施加一定电压，预富集在工作电极表面的三价砷被还原为零价，再采用方波阳极溶出伏安法进行扫描测试，使得电极表面的零价砷迅速氧化为三价砷，从而产生阳极溶出伏安峰，工作电极表面修饰的还原石墨烯具有大的比表面积和优异的导电性能，可提高电极表面反应的电子传递速率进而增强阳极溶出伏安峰信号；随着样品中三价砷浓度的增加，结合到工作电极表面的三价砷增多，产生的阳极溶出伏安峰电流随之增强，阳极溶出伏安峰电流与三价砷浓度呈线性关系，可用于对三价砷的灵敏检测，检测限低至0.054ppb，并实现了环境水样中三价砷的准确性和选择性检测。
作为优选，所述的醋酸-醋酸钠缓冲溶液的浓度为0.1M，pH为5；在工作电极上施加一定电压的大小为-0.5V，时间为120秒；所述的方波阳极溶出伏安法的扫描电位范围为-0.36V～+0.4V。
作为优选方案，上述的三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料修饰金电极按下述步骤制备：
(1)三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料的制备；
(2)电极预处理：金电极先依次用粒径为1.0、0.3、0.05μm的氧化铝糊在麂皮上抛光至电极表面呈镜面，将电极分别在体积比为1:1的HNO3:H2O、乙醇和超纯水中分别超声1分钟，再将电极置于0.5M的硫酸中在-0.3V～+1.5V电位范围内进行循环伏安扫描，直到获得稳定的循环伏安峰，随后将电极用超纯水清洗，氮气吹干；
(3)制备三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料修饰金电极：将2μL 100μg/mL步骤(1)制备的三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料滴涂在经步骤(2)处理干净的金电极表面，在室温下自然晾干，制成三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料修饰金电极。
进一步优选，三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料的制备方法为：将0.4g氧化石墨烯加入到50mL二甲基甲酰胺中并超声分散，再加入10g三聚硫氰酸并在室温下磁力搅拌2小时，然后缓慢加入过量硼氢化钠充分还原上述混合物至黑色，搅拌2小时后，过滤，超纯水清洗，真空干燥后得到三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料。
由上可知，本发明还提供了三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料修饰金电极的制备方法。
由上可知，本发明还提供了三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料的制备方法。
本发明的技术效果是：本发明结合三聚硫氰酸和石墨烯的特性，制备三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料，利用三聚硫氰酸中含有的大量巯基，通过砷-硫键实现三价砷在电极表面的选择性预富集，同时利用还原石墨烯的大比表面积和优异的导电性能，提高电极表面反应的电子传递速率进而增强电化学测量信号，据此，建立基于三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料的三价砷电化学检测方法，实现了对三价砷的灵敏性、准确性和选择性检测，具有良好的应用前景。
附图说明
图1是TTCA/rGO的制备及对As(III)的电化学检测原理图。
图2是(A)GO和(B)TTCA/rGO的SEM图。
图3是傅里叶变换红外光谱图：(a)GO，(b)TTCA，(c)TTCA/rGO，(d)TTCA/rGO吸附As(III)。
图4是(A)EIS图和(B)CV图：(a)裸金电极，(b)GO/AuE，(c)TTCA/rGO/AuE。
图5是SWASV响应：(a)TTCA/rGO/AuE在0ppbAs(III)溶液中，(b)裸金电极、(c)GO/AuE和(d)TTCA/rGO/AuE在5ppbAs(III)溶液中。
图6是(A)TTCA/rGO/AuE对不同浓度As(III)的SWASV响应；(B)SWASV电流与As(III)浓度的线性关系曲线。
图7是TTCA/rGO/AuE对As(III)检测的选择性图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步阐述，本发明并不限于此；
实施例1
三聚硫氰酸/还原石墨烯纳米复合材料的制备
将0.4g氧化石墨烯(GO)加入到50mL二甲基甲酰胺中并超声分散，再加入10g三聚硫氰酸(TTCA)并在室温下磁力搅拌2小时，然后缓慢加入过量硼氢化钠充分还原上述混合物至黑色，搅拌2小时后，过滤，超纯水清洗，真空干燥后得到三聚硫氰酸/还原石墨烯(TTCA/rGO)纳米复合材料。TTCA/rGO的制备过程如图1所示。
采用扫描电镜(SEM)和傅里叶变换红外光谱对TTCA/rGO纳米复合材料进行表征，由图2可见，GO呈薄片褶皱状(图2A)，在GO表面修饰TTCA后，得到的TTCA/rGO纳米复合材料的表面明显变得粗糙(图2B)，表明大量TTCA负载到了石墨烯表面。图3是对GO、TTCA、TTCA/rGO和吸附As(III)后的TTCA/rGO的红外光谱表征，GO的红外光谱中出现了3431cm-1(O-H)，1636cm-1(C＝C)和1053cm-1(C-O-C)，表明GO合成成功(图3a)；在GO表面负载TTCA后，出现了2552cm-1(S-H)和746cm-1(C-S)，与TTCA的红外光谱一致(图3b)，表明TTCA成功负载到石墨烯表面，此外，GO在1053cm-1(C-O-C)处的特征峰消失，表明GO被还原，进一步表明制成了TTCA/rGO纳米复合材料(图3c)；为了进一步证实As(III)与TTCA/rGO的相互作用，我们对吸附As(III)后的TTCA/rGO进行了红外表征，由图3d可见，2552cm-1(S-H)的吸收峰几乎消失，这是由于巯基与As(III)之间的作用极大地消耗了TTCA/rGO纳米复合材料中的巯基，进而表明TTCA/rGO中的巯基可用于对As(III)的富集。
实施例2
TTCA/rGO纳米复合材料修饰电极的制备
金电极先依次用粒径为1.0、0.3、0.05μm的氧化铝糊在麂皮上抛光至电极表面呈镜面，将电极分别在体积比为1:1的HNO3:H2O、乙醇和超纯水中分别超声1分钟，再将电极置于0.5M的硫酸中在-0.3V～+1.5V电位范围内进行循环伏安扫描，直到获得稳定的循环伏安峰，随后将电极用超纯水清洗，氮气吹干；将2μL 100μg/mL的TTCA/rGO滴涂在金电极(AuE)表面，在室温下晾干，制成TTCA/rGO纳米复合材料修饰金电极(TTCA/rGO/AuE)。
采用电化学交流阻抗法(EIS)和循环伏安法(CV)对TTCA/rGO修饰电极进行表征(图4)。由图4A可见，裸金电极的电子传递阻力(Ret)很小(曲线a)，表明电极已经处理干净；当GO修饰在AuE表面后，GO/AuE的Ret增大(曲线b)，这是因为负电性的GO通过静电排斥作用阻碍溶液中负电性的[Fe(CN)6]3-/4-接近电极表面发生电子传递；但是，TTCA/rGO/AuE的Ret显著减小(曲线c)，这是由于在TTCA/rGO的制备过程中，GO被硼氢化钠还原为rGO而改善了TTCA/rGO的电子传递能力。CV表征结果(图4B)与EIS结果相一致。
为了进一步验证TTCA/rGO纳米复合材料对As(III)检测的可行性，我们设计了一系列对照试验，由图5可见，当样品中不存在As(III)时，TTCA/rGO/AuE没有As(III)的溶出伏安峰电流(曲线a)；当样品中存在5ppb As(III)时，裸金电极(曲线b)和GO/AuE(曲线c)没有As(III)的溶出伏安峰电流，但是，TTCA/rGO/AuE则在+0.047V处出现了明显的As(III)的溶出伏安峰，这是由于TTCA/rGO纳米复合材料的优良导电性能和巯基对As(III)的预富集性能。综上所述，本发明制备的TTCA/rGO纳米复合材料修饰电极可用于对As(III)的富集和灵敏性电化学检测。
实施例3
TTCA/rGO纳米复合材料修饰电极测定As(III)
在选择的最优pH为5.0和沉积电压为-0.5V的条件下，对不同浓度的As(III)进行检测。采用三电极系统进行电化学测试：TTCA/rGO/AuE为工作电极，银/氯化银电极为参比电极，铂丝为对电极。以含不同浓度As(III)的醋酸-醋酸钠缓冲溶液(0.1M、pH 5)为测试溶液，通过电化学工作站在工作电极上施加-0.5V的电压120秒，预富集在工作电极表面的三价砷被还原为零价，再采用方波阳极溶出伏安法(SWASV)在-0.36V～+0.4V电位范围内进行扫描，使得电极表面的零价砷迅速氧化为三价砷，As(III)在+0.047V处出现溶出伏安峰，随着As(III)浓度的增加，溶出峰电流值逐渐增大(图6A)，根据峰电流强度和As(III)浓度绘制工作曲线(图6B)，峰电流强度与As(III)浓度在0.2-10ppb范围内具有良好的线性关系，线性相关系数R2为0.99，检测限低至0.054ppb。
实施例4
选择性是评价检测方法性能优劣的重要指标，我们开展了一系列对照实验。向10ppbAs(III)中分别加入100ppb的下述干扰离子As(V)，Cu2+，Hg2+，Cd2+，Pb2+，Ca2+，Zn2+，Mg2+，K+，Na+和1mM Cl-，SO42-，CO32-，NO3-，PO43-，由图7可见，10ppb As(III)与不同干扰离子共存时的溶出峰电流几乎与10ppb As(III)的溶出峰电流一致。以上结果表明，本发明方法对As(III)检测具有良好的选择性。
为了进一步考察本发明方法的实用性，我们采用标准加入法对多个来源的水样包括自来水、赣江水和润溪湖水中的As(III)进行了测试，所有的样品均平行测定三次，得到的回收率为98.0％-105.5％，与ICP-MS测试结果相一致，表明本发明方法对环境水样中As(III)的检测具有很好的实用性。