转基因物质的检测方法与流程

本发明涉及一种转基因物质的检测方法。

背景技术：

随着转基因物质及食品地不断增加，转基因食品引发的各类问题也随之增加，如何有效地对转基因样品进行检测将变得尤为重要。常用的转基因检测手段有dna检测和蛋白质检测两大类。

dna检测主要是检查受体基因的基因多态性、内容分析、核酸序列以及整合点位等，一般有启动子、终止子、选择标记基因和报告基因等。目前常用的dna检测技术包括：高效液相色谱法(hplc法)、核酸印迹法(southernblot，sb)、毛细管凝胶电泳法(capillarygelelectrophoresis，cge)、聚合酶链反应法(polymerasechainreaction，pcr)等。在上述方法中，最为常见的是pcr和sb检测法。pcr方法是将植入的外源基因进行高效扩增，故又称基因体外扩增法，该方法是目前应用最为广泛的转基因检测方法之一，其特点是快速、简便、灵敏。pcr方法虽然能对转基因生物及深加工的成品进行定性分析，但是由于pcr方法对dna的纯度要求非常严格，促使其检测成本非常昂贵，加上pcr检测很容易受到干扰，这将导致pcr检测灵敏度的降低。pcr检测方法受到如聚合酶链抑制因子、dna质量及pcr参数选择等多种因子的影响，而这些因子均会影响pcr结果的准确性。更重要的是pcr检测必须精心操作，否则很容易交叉感染产生假阳性。sb方法也是一种应用非常广泛的转基因检测方法，核酸印迹法以其特异性强(可鉴别出20个碱基对左右的同源序列)和准确性高的特点被认为是当前鉴定外源基因整合的权威方法。但是核酸印迹法与pcr方法一样对样品的纯度有较高要求，导致费用昂贵。

常用的蛋白质检测法主要有wb法(蛋白质印迹)和elisa法(酶联免疫吸附试验)。wb法的高灵敏度约为(为1ng-5ng)，特别适应于检测难溶蛋白质。elisa法和wb法不同，它是将高效反应和免疫反应进行有机的结合，以此来对非降解蛋白进行特异性筛选。由于酶联免疫吸附法的费用低、灵敏度高等特点，能够大量分析非变性蛋白质。缺点是在检测的过程中蛋白质受到过高温度影响后容易发生变性，导致检测结果的不准确，因此，用蛋白质检测法仅仅只能用来测定未加工过的转基因产品。

技术实现要素：

基于此，有必要提供一种能够较为准确地检测各种浓度的转基因物质的检测方法。

一种转基因物质的检测方法，包括如下步骤：

将非转基因标准品制作成片状得到标准样品；

测试所述标准样品的厚度；

使用太赫兹时域光谱装置采集所述标准样品的太赫兹时域光谱，并根据所述标准样品的太赫兹时域光谱和所述标准样品的厚度得到所述标准样品的折射率谱；

将待检测品制作成片状得到待检测样品；

测试所述待检测样品的厚度；

使用太赫兹时域光谱装置采集所述待检测样品的太赫兹时域光谱，并根据所述待检测样品的太赫兹时域光谱和所述待检测样品的厚度得到所述待检测样品的折射率谱；及

将所述待检测样品的折射率谱与所述标准样品的折射率谱进行比对。

在其中一个实施例中，所述使用太赫兹时域光谱装置采集所述标准样品的太赫兹时域光谱，并根据所述标准样品的太赫兹时域光谱和所述标准样品的厚度得到所述标准样品的折射率谱的步骤包括：将所述标准样品置于第一保护气体中，使用所述太赫兹时域光谱装置分别采集所述标准样品的太赫兹时域光谱和所述第一保护气体的太赫兹时域光谱；将所述第一保护气体的太赫兹时域光谱作为参考信号，所述标准样品的太赫兹时域光谱作为样品信号，将所述第一保护气体的太赫兹时域光谱和所述标准样品的太赫兹时域光谱分别进行快速傅里叶变换，分别得到所述第一保护气体的频域谱和所述标准样品的频域谱，并获取所述第一保护气体的电场相位信息和所述标准样品的电场相位信息；根据所述第一保护气体的电场相位信息和所述标准样品的电场相位信息计算得到所述标准样品和所述第一保护气体的电场相位差；根据所述第一保护气体的相位信息、所述标准样品的相位信息、所述第一保护气体的频域谱、所述标准样品的频域谱、所述标准样品的厚度、以及所述标准样品和所述第一保护气体的电场相位差获取所述标准样品的折射率谱；

及/或，所述使用太赫兹时域光谱装置采集所述待检测样品的太赫兹时域光谱，并根据所述待检测样品的太赫兹时域光谱和所述待检测样品的厚度得到所述待检测样品的折射率谱的步骤包括：将所述待检测样品置于第二保护气体中，使用所述太赫兹时域光谱装置分别采集所述待检测样品的太赫兹时域光谱和所述第二保护气体的太赫兹时域光谱；将所述第二保护气体的太赫兹时域光谱作为参考信号，所述待检测样品的太赫兹时域光谱作为样品信号，将所述第二保护气体的太赫兹时域光谱和所述待检测样品的太赫兹时域光谱分别进行快速傅里叶变换，分别得到所述第二保护气体的频域谱和所述待检测样品的频域谱，并获取所述第二保护气体的电场相位信息和所述待检测样品的电场相位信息；根据所述第二保护气体的电场相位信息和所述待检测样品的电场相位信息计算得到所述待检测样品和所述第二保护气体的电场相位差；根据所述第二保护气体的相位信息、所述待检测样品的相位信息、所述第二保护气体的频域谱、所述待检测样品的频域谱、所述待检测样品的厚度、以及所述待检测样品和所述第二保护气体的电场相位差获取所述待检测样品的折射率谱。

在其中一个实施例中，所述根据所述标准样品的太赫兹时域光谱和所述标准样品的厚度得到所述标准样品的折射率谱是基于菲涅尔公式获得的；所述根据所述待检测样品的太赫兹时域光谱和所述待检测样品的厚度得到所述待检测样品的折射率谱是基于菲涅尔公式获得。

在其中一个实施例中，所述将所述待检测样品的折射率谱与所述标准样品的折射率谱进行比对的步骤包括：从所述待检测样品的折射率谱中选取多个不同频率值对应的折射率，并计算平均值，得到所述待检测样品的平均折射率；从所述标准样品的折射率谱中选取多个所述不同频率值对应的折射率，并计算平均值，得到所述标准样品的平均折射率；将所述标准样品的平均折射率和所述待检测样品的平均折射率进行比对。

在其中一个实施例中，多个所述不同频率值分别选自0.5thz～1.8thz中的一个频率值。

在其中一个实施例中，所述将所述待检测样品的折射率谱与所述标准样品的折射率谱进行比对的步骤包括：从所述待检测样品的折射率谱中选取特定频率值对应的折射率，记作所述待检测样品的折射率；从所述标准样品的折射率谱中选取所述特定频率值对应的折射率，记作所述标准样品的折射率；将所述标准样品的折射率和所述待检测样品的折射率进行比对。

在其中一个实施例中，所述特定频率值选自0.1thz～2.5thz中的一个频率值。

在其中一个实施例中，所述特定频率值为1thz。

在其中一个实施例中，所述将非转基因标准品制作成片状得到标准样品的步骤包括：将所述非转基因标准品干燥，然后制作成粉末状，将粉末状的所述非转基因标准品制作成片状；

及/或，所述将待检测品制作成片状得到待检测样品的步骤包括：将所述待检测品干燥，然后制作成粉末状，将粉末状的所述待检测品制作成片状。

在其中一个实施例中，所述将粉末状的所述非转基因标准品制作成片状的步骤包括：将所述粉末状的所述待检测品和填充物混合，得到第一混合物，将所述第一混合物压制成片状；

所述将粉末状的所述待检测品制作成片状的步骤包括：将所述粉末状的所述待检测品和所述填充物混合，得到第二混合物，将所述第二混合物压制成片状；

其中，所述标准样品中的所述非转基因标准品的质量百分含量和所述待检测样品中的所述待检测品的质量百分含量相等。

上述转基因物质的检测方法通过使用太赫兹时域光谱装置采集标准样品的太赫兹时域光谱和待检测样品的太赫兹时域光谱，并根据标准样品的太赫兹时域光谱和标准样品的厚度得到标准样品的折射率谱，根据待检测样品的太赫兹时域光谱和待检测样品的厚度得到待检测品的折射率谱，再通过将待检测样品的折射率谱与标准样品的折射率谱进行比对，使得能够较为准确地检测出各种浓度转基因物质，相对于传统检测方法，上述转基因物质的检测方法受基质(即影响检测的干扰物)干扰较小、所用试剂量少，不需要复杂的专业操作，即可检测费转基因与非转基因的区别。

附图说明

图1为实施例1的bt63转基因抗虫水稻和非转基因水稻的太赫兹折射率谱；

图2为实施例3的8种转基因玉米和6种非转基因玉米的太赫兹折射率谱；

图3为实施例5的73496转基因油菜籽和非转基因油菜籽的太赫兹折射率谱。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳的实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

一实施方式的转基因物质的检测方法，为基于太赫兹时域光谱(thz-tds)技术的检测方法。太赫兹(therahertz，thz，1thz＝10¹²hz)辐射是位于微波和红外之间的电磁辐射，由于分子的低频转动和振动跃迁落在这个波段，使得thz光谱在化学、生物医药等领域有着广泛的应用前景。太赫兹时域光谱(thz-tds)是一种基于飞秒激光器的光谱探测技术，具有较高的信噪比和探测灵敏度。其中，转基因物质为转基因农作物。该转基因物质的检测方法包括如下步骤：

步骤s110：将非转基因标准品制作成片状得到标准样品。

在本实施方式中，将非转基因标准品制作成片状得到标准样品的步骤包括：将非转基因标准品干燥，然后制作成粉末状，将粉末状的非转基因标准品制作成片状。具体地，制作成粉末状的方法为研磨。将粉末状的非转基因标准品制作成片状的步骤包括：将粉末状的非转基因标准品在30mpa～40mpa的压力下压制成型。

步骤s120：测试标准样品的厚度。

在其中一个实施例中，测试标准样品的厚度的仪器为电子螺旋测微器。

在其中一个实施例中，标准样品的厚度为1.5毫米～2毫米。样品厚度过厚，对太赫兹辐射吸收较强，则可能会导致探测得到的光谱有效频率范围较窄，样品在高频段的光谱吸收特性会丢失。样品厚过小，则很容易在探测到的频域谱图中留下干涉条纹，可能导致样品thz吸收光谱中较弱的吸收峰不能很明显的显示出来，影响光谱的质量。

步骤s130：使用太赫兹时域光谱装置采集标准样品的太赫兹时域光谱，并根据标准样品的太赫兹时域光谱和标准样品的厚度得到标准样品的折射率谱。

具体地，太赫兹时域光谱装置为透射式太赫兹时域光谱装置。

具体地，步骤s130得到标准样品的折射率谱的步骤包括：

步骤s132：将标准样品置于第一保护气体中，使用太赫兹时域光谱装置分别采集标准样品的太赫兹时域光谱和第一保护气体的太赫兹时域光谱。

具体地，使用太赫兹时域光谱装置分别采集标准样品的太赫兹时域光谱和第一保护气体的太赫兹时域光谱的步骤是在相对湿度小于或等于5％的条件下进行。

第一保护气体可以为本领域常用的气体。具体地，第一保护气为氮气或惰性气体。进一步地，第一保护气体为氮气。

步骤s134：将第一保护气体的太赫兹时域光谱作为参考信号，标准样品的太赫兹时域光谱作为样品信号，将第一保护气体的太赫兹时域光谱和标准样品的太赫兹时域光谱分别进行快速傅里叶变换，分别得到第一保护气体的频域谱和标准样品的频域谱，并获取第一保护气体的电场相位信息和标准样品的电场相位信息。

具体地，将第一保护气体的太赫兹时域光谱进行快速傅里叶变换得到第一保护气体的频域谱的转换公式如公式1所示，将标准样品的太赫兹时域光谱进行快速傅里叶变换得到标准样品的频域谱的转换公式如公式2所示：

式中，ar(ω)和as(ω)分别为第一保护气体的太赫兹时域光谱和标准样品的太赫兹时域光谱的振幅；和分别为第一保护气体的太赫兹时域光谱和标准样品的太赫兹时域光谱的电场相位；i是虚数单位，er(ω)为第一保护气体的频域谱；es(ω)为标准样品的频域谱；er(t)为第一保护气体的太赫兹时域光谱，es(t)为标准样品的太赫兹时域光谱；t为时间；ω为光谱的角频率。

步骤s136：根据第一保护气体的电场相位信息和标准样品的电场相位信息计算得到标准样品和第一保护气体的电场相位差。

步骤s138：根据第一保护气体的相位信息、标准样品的相位信息、第一保护气体的频域谱、标准样品的频域谱、标准样品的厚度、以及标准样品和第一保护气体的电场相位差获取标准样品的折射率谱。

具体地，根据标准样品的太赫兹时域光谱和标准样品的厚度得到标准样品的折射率谱是基于菲涅尔公式获得的。其中，基于菲涅尔公式，根据如下公式3转换成标准样品的折射率谱：

式中，φ(ω)为标准样品和第一保护气体的电场相位差，d为标准样品的厚度；c为电磁波在真空中的传播速度。

步骤s140：将待检测品制作成片状得到待检测样品。

在本实施方式中，将待检测品制作成片状得到待检测样品的步骤包括：将待检测品干燥，然后制作成粉末状，将粉末状的待检测品制作成片状。具体地，制作成粉末状的方法为研磨。将粉末状的待检测品制作成片状的步骤包括：将粉末状的待检测品在30mpa～40mpa的压力下压制成型。

需要说明的是，制作标准样品和待检测样品的方法不限于为上述方法，在其他实施例中，将非转基因标准品制作成片状的步骤包括：将粉末状的待检测品和填充物混合，得到第一混合物，将第一混合物压制成片状；将粉末状的待检测品制作成片状的步骤包括：将粉末状的待检测品和填充物混合，得到第二混合物，将第二混合物压制成片状，得到待检测样品；此时，标准样品中的非转基因标准品的质量百分含量和待检测样品中的待检测品的质量百分含量相等，以便于标准样品和待检测样品的准确对比。即标准样品和待检测样品可以分别直接由非转基因标准品和待检测品制作得到，也可以与填充物共同制作得到，加入填充物时，使标准样品中的非转基因标准品的质量百分含量和待检测样品中的待检测品的质量百分含量相等即可。其中，填充物为对光吸收较小的物质，具体地，填充物为密度高密度聚乙烯(密度为0.940g/cm³～0.976g/cm³)。

步骤s150：测试待检测样品的厚度。

在其中一个实施例中，测试待检测样品的厚度的仪器为电子螺旋测微器。

在其中一个实施例中，测试待检测样品的厚度为1.5毫米～2毫米。

步骤s160：使用太赫兹时域光谱装置采集待检测样品的太赫兹时域光谱，并根据待检测样品的太赫兹时域光谱和待检测样品的厚度得到待检测样品的折射率谱。

具体地，步骤s160得到待检测样品的折射率谱的步骤包括：

步骤s162：将待检测样品置于第二保护气体中，使用太赫兹时域光谱装置分别采集待检测样品的太赫兹时域光谱和第二保护气体的太赫兹时域光谱。

具体地，使用太赫兹时域光谱装置分别采集待检测样品的太赫兹时域光谱和第二保护气体的太赫兹时域光谱的步骤是在相对湿度小于或等于5％的条件下进行。

第二保护气体可以为本领域常用的气体。具体地，第一保护气为氮气或惰性气体。第一保护气体与第二保护气体相同。进一步地，第二保护气体为氮气。

步骤s164：将第二保护气体的太赫兹时域光谱作为参考信号，待检测样品的太赫兹时域光谱作为样品信号，将第二保护气体的太赫兹时域光谱和待检测样品的太赫兹时域光谱分别进行快速傅里叶变换，分别得到第二保护气体的频域谱和待检测样品的频域谱，并获取第二保护气体的电场相位信息和待检测样品的电场相位信息。

具体地，将第二保护气体的太赫兹时域光谱进行快速傅里叶变换得到第二保护气体的频域谱的转换公式与公式1相似，待检测样品的太赫兹时域光谱进行快速傅里叶变换得到待检测样品的频域谱的转换公式与公式2相似，区别在于，此时，ar(ω)和as(ω)分别为第二保护气体的太赫兹时域光谱和待检测样品的太赫兹时域光谱的振幅；和分别为第二保护气体的太赫兹时域光谱和待检测样品的太赫兹时域光谱的电场相位；er(ω)为第二保护气体的频域谱；es(ω)为标准样品的频域谱；er(t)为第二保护气体的太赫兹时域光谱，es(t)为待检测样品的太赫兹时域光谱。

步骤s166：根据第二保护气体的电场相位信息和待检测样品的电场相位信息计算得到待检测样品和第二保护气体的电场相位差。

步骤s168：根据第二保护气体的相位信息、待检测样品的相位信息、第二保护气体的频域谱、待检测样品的频域谱、待检测样品的厚度、以及待检测样品和第二保护气体的电场相位差获取待检测样品的折射率谱。

具体地，待检测样品的折射率谱也通过公式3转换获得，区别在于，此时，式中，φ(ω)为待检测样品和第二保护气体的电场相位差，d为待检测样品的厚度。

步骤s170：将待检测样品的折射率谱与标准样品的折射率谱进行比对。

在其中一个实施例中，将待检测样品的折射率谱与标准样品的折射率谱进行比对的步骤包括：从待检测样品的折射率谱中选取多个不同频率值对应的折射率，并计算平均值，得到待检测样品的平均折射率；从标准样品的折射率谱中选取多个不同频率值对应的折射率，并计算平均值，得到标准样品的平均折射率；将标准样品的平均折射率和待检测样品的平均折射率进行比对，平均折射率是折射率谱的量化手段，通过使用平均折射率进行对比更直观和具体。即此时通过对比标准样品和待检测样品的平均折射率判断待检测品是否含有非转基因。若标准样品和待检测样品的平均折射率相等，则不含有非转基因，若标准样品和待检测样品的平均折射率不相等，则含有非转基因。进一步地，多个不同频率值分别选自0.5thz～1.8thz中的一个频率值。即待检测样品的平均折射率和标准样品的平均折射率均为0.5thz～1.8thz范围内的多个不同频率对应的折射率的平均值。

在另一个实施例中，将待检测样品的折射率谱与标准样品的折射率谱进行比对的步骤包括：从待检测样品的折射率谱中选取特定频率值对应的折射率，记作待检测样品的折射率；从标准样品的折射率谱中选取特定频率值对应的折射率，记作标准样品的折射率；将标准样品的折射率和待检测样品的折射率进行比对，通过选取特定频率值进行对比更直观和具体。即此时通过对比标准样品和待检测样品在特定频率下的折射率判断待检测品是否含有非转基因。若标准样品和待检测样品的平均折射率相等，则不含有非转基因，若标准样品和待检测样品的平均折射率不相等，则含有非转基因。进一步地，特定频率值选自0.1thz～2.5thz中的一个频率值。在该范围内折射率谱呈现出较为规则的线性，在该范围内取值便于比较。更进一步地，特定频率值为1thz。

上述转基因物质的检测方法通过使用太赫兹时域光谱装置采集标准样品的太赫兹时域光谱和待检测样品的太赫兹时域光谱，并根据标准样品的太赫兹时域光谱和标准样品的厚度得到标准样品的折射率谱，根据待检测样品的太赫兹时域光谱和待检测样品的厚度得到待检测样品的折射率谱，再通过将待检测样品的折射率谱与标准样品的折射率谱进行比对，使得能够较为准确地检测出各种浓度转基因物质，相对于传统检测方法，上述转基因物质的检测方法受基质干扰较小、所用试剂量少，不需要复杂的专业操作，即可检测费转基因与非转基因的区别。

同时，由于上述转基因物质的检测方法采用太赫兹时域光谱装置进行检测，而太赫兹时域光谱(thz-tds)是一种基于飞秒激光器的光谱探测技术，具有较高的信噪比和探测灵敏度，使得上述检测快速方便。

需要说明的是，上述转基因物质的检测方法不限于为上述顺序，在其它实施例中，步骤s110和步骤s140可以同时进行，也可以先进行步骤s140～步骤s160，再进行步骤s110～步骤s130，步骤步骤s110～步骤s130和步骤s140～步骤s160中的步骤交替或同时进行。

以下为具体实施例部分(以下实施例如无特殊说明，则不含有除不可避免的杂质以外的其它未明确指出的组分。以下实施例中使用的太赫兹时域光谱系统为teraview公司生产的型号为tps-4000的太赫兹时域光谱系统，太赫兹谱宽为0.06thz～4.0thz，在信号的扫描过程中，扫描范围0～1200ps，采集速率为30scans/second，谱分辨率为1.2cm^-1；测量样品厚度的为电子螺旋测微器测量，精确度为0.01mm；以下实施例均以氮气为保护气为例，但是保护气并不限于为氮气)：

实施例1

本实施例的待检测品为两种，分别为bt63转基因质量浓度为1.01％的抗虫水稻及bt63转基因浓度为5.03％的抗虫水稻，非转基因标准品为bt63转基因抗虫水稻对应的非转基因水稻，且均购买于中国计量科学研究院，本实施例的检测过程具体如下：

(1)将非转基因水稻在50℃下干燥2小时，然后转移至玛瑙研钵中研细，过200目筛，得到粉末状的非转基因水稻，将粉末状的非转基因水稻在35mpa的压力下压制成厚度为1.8毫米、直径为13毫米的圆片状，得到标准样品1。

(2)将标准样品置于透射式太赫兹时域光谱装置的样品仓中，在氮气吹扫且相对湿度小于或等于5％的条件下采集标准样品的太赫兹时域光谱和氮气的太赫兹时域光谱；将氮气的太赫兹时域光谱作为参考信号，标准样品1的太赫兹时域光谱作为样品信号，将氮气的太赫兹时域光谱和标准样品1的太赫兹时域光谱分别根据公式1和公式2进行快速傅里叶变换，分别得到氮气的频域谱和标准样品1的频域谱，并获取氮气的电场相位信息和标准样品1的电场相位信息；根据氮气的电场相位信息和标准样品1的电场相位信息，计算得到标准样品1和氮气的电场相位差；根据氮气的相位信息、标准样品1的相位信息、氮气的频域谱、标准样品1的频域谱、标准样品1的厚度、以及标准样品1和氮气的电场相位差，基于公式3获取标准样品1的折射率谱，如图1所示。

(3)按照步骤(1)相同的操作，将bt63转基因浓度为1.01％的抗虫水稻和bt63转基因浓度为5.03％的抗虫水稻分别制作厚度为1.8毫米、直径为13毫米的待检测样品1-1和厚度为1.8毫米、直径为13毫米的待检测样品1-2。

(4)按照步骤(2)的相同操作，获取待检测样品1-1的折射率谱和待检测样品1-2的折射率谱，如图1所示。

(5)根据标准样品1的折射率谱计算标准样品在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率，根据待检测样品1-1的折射率谱(如图1所示)计算待检测样品1-1在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率，根据待检测样品1-2的折射率谱(如图1所示)计算待检测样品1-2在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率，其中，标准样品1、待检测样品1-1以及待检测样品1-2在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率见表1。

实施例2

本实施例使用的为实施例1的标准样品、待检测样品1-1以及待检测样品1-2，检测方法与实施例1大致相同，区别在于步骤(5)不同，在本实施例中，步骤(5)为：

根据标准样品1的折射率谱(如图1所示)选取标准样品在1thz时的折射率，根据待检测样品1-1的折射率谱(如图1所示)选取待检测样品1-1在1thz时的折射率，根据待检测样品1-2的折射率谱选取待检测样品1-1，其中，标准样品1、待检测样品1-1以及待检测样品1-2在1thz时的折射率见表1。

实施例3

本实施例的待检测品为浙江大学提供的转基因浓度为100％的8种抗草甘膦基因玉米，非转基因标准品为6种非转基因玉米，具体检测过程如下：

(1)将6种非转基因玉米在50℃下干燥2小时，然后分别转移至玛瑙研钵中研细，过200目筛，分别得到6种粉末状的非转基因玉米，将6种粉末状的非转基因玉米分别在30mpa的压力下压制成厚度为1.5毫米、直径为13毫米的圆片状，分别得到标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6。

(2)按照实施例1的步骤(2)相同的步骤分别得到标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6的折射率谱，如图2所示。

(3)按照本实施例的步骤(1)相同的操作，将8种抗草甘膦基因玉米分别制作成厚度为1.5毫米、直径为13毫米的待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'。

(4)按照本实施例的步骤(2)的相同操作，分别获取待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'的折射率谱，如图2所示。

(5)根据标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6的折射率谱(如图2所示，图2中，标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6的折射率谱分别用为曲线2-1、2-2、2-3、2-4、2-5及2-6)分别计算标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率，根据待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'的折射率谱(如图2所示，待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'的折射率谱分别用为曲线2-1'、2-2'、2-3'、2-4'、2-5'、2-6'、2-7'及2-8')计算待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率，其中，标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6和待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率见表1。

实施例4

本实施例的标准样品为实施例3的标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6，待检测样品为实施例3的待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'，本实施例的标准样品和待检测样品的检测方法与实施例3大致相同，区别在于步骤(5)不同，在本实施例中，步骤(5)为：

根据标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6的折射率谱(如图2所示)分别计算标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6在1thz时的折射率，根据待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'的折射率谱(如图2所示)计算待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'在1thz时的折射率，其中，标准样品2-1、标准样品2-2、标准样品2-3、标准样品2-4、标准样品2-5及标准样品2-6和待检测样品2-1'、待检测样品2-2'、待检测样品2-3'、待检测样品2-4'、待检测样品2-5'、待检测样品2-6'、待检测样品2-7'及待检测样品2-8'在1thz时的折射率见表1。

实施例5

本实施例的待检测品为两种，分别为转基因浓度为10％的73496转基因油菜籽和转基因浓度为100％的73496转基因油菜籽，非转基因标准品为73496转基因油菜籽对应的非转基因油菜籽，均购买于欧盟联合研究中心的标准物质与测量研究所(irmm)，本实施例的检测过程具体如下：

(1)将非转基因油菜籽在50℃下干燥2小时，然后转移至玛瑙研钵中研细，过200目筛，得到粉末状的非转基因油菜籽，将粉末状的非转基因油菜籽与聚乙烯混合，得到混合粉体，且混合粉体中的非转基因油菜与聚乙烯的质量百分比为80％:20％；将混合粉体在40mpa的压力下压制成厚度为2毫米、直径为13毫米的圆片状，得到标准样品3。

(2)按照实施例1的步骤(2)相同的步骤得到标准样品3的折射率谱，如图3所示。

(3)按照步骤(1)相同的操作，将转基因浓度为10％的73496转基因油菜籽和转基因浓度为100％的73496转基因油菜籽分别制作成厚度为2毫米、直径为13毫米的待检测样品3-1和厚度为2毫米、直径为13毫米的待检测样品3-2，且待检测样品3-1中的转基因浓度为10％的73496转基因油菜籽与聚乙烯的质量比为80％:20％，待检测样品3-2中的转基因浓度为100％的73496转基因油菜籽与聚乙烯的质量比为80％:20％。

(4)按照步骤(2)的相同操作，获取待检测样品3-1的折射率谱和待检测样品3-2的折射率谱，如图3所示。

(5)根据标准样品3的折射率谱(如图3所示)计算标准样品3在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率，根据待检测样品3-1的折射率谱(如图3所示)计算待检测样品3-1在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率，根据待检测样品3-2的折射率谱(如图3所示)计算待检测样品3-2在0.5thz～-1.8thz范围内的平均折射率，其中，标准样品3、待检测样品3-1以及待检测样品3-2在0.5thz～1.8thz范围内的平均折射率见表1。

实施例6

本实施例的标准样品以及待检测样品与实施例5相同，检测方法也大致相同，区别在于步骤(5)不同，在本实施例中，步骤(5)为：

根据标准样品3的折射率谱(如图3所示)选取标准样品3在1thz时的折射率，根据待检测样品3-1的折射率谱(如图3所示)选取待检测样品3-1在1thz时的折射率，根据待检测样品5的折射率谱(如图3所示)选取待检测样品3-2在1thz时的折射率，其中，标准样品3、待检测样品3-1以及待检测样品3-2在1thz时的折射率见表1。

表1

结合图1～图3可以看出，转基因物质和非转基因物质的折射率谱不同，且不同浓度的转基因物质的折射率谱也不同，因此，可以通过直接对比待检测品和非转基因标准品的折射率谱就能够检测出待检测品是否为非转基因物质。

且从图1～图3中还可以看出，转基因物质和非转基因物质的折射率谱在频率为0.5thz～1.8thz的范围均呈较为规则的线性，结合表1可以看出，非转基因水稻和两种浓度不同的转基因水稻在0.5thz～1.8thz的平均折射率和1thz时的折射率均不同，6种非转基因玉米的在0.5thz～1.8thz的平均折射率均为1.58，在1thz时的折射率在1.54～1.59范围内，而8中转基因玉米，在0.5thz～1.8thz的平均折射率均为1.67，在1thz时的折射率在1.64～1.70范围内，且非转基因油菜籽和两种浓度的转基因油菜籽在0.5thz～1.8thz的平均折射率和1thz时的折射率也均不同，因此，可以通过对比0.5thz～0.18thz范围内的平均折射率判断待检测品是否为非转基因物质，也可以通过对比频率在1thz时的折射率判断待检测品是否为非转基因物质。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。