本发明涉及医学检验质量控制
技术领域：
，特别涉及一种肝炎类病原学复合质控品及其制备方法。
背景技术：
：肝炎问题一直是全球性重要公共卫生问题之一。世卫组织最新数据显示，全球共有20亿人感染肝炎病毒，其中约有5亿人(全世界十二分之一的人口)感染了慢性肝炎，每年约有100万人因此而死亡。肝炎病毒感染者包括肝炎病毒携带者和肝炎患者。病毒性肝炎是主要肝炎类型。病毒性肝炎是由多种肝炎病毒引起的，其中主要包括甲型、乙型、丙型、丁型和戊型五种病毒。我国是甲肝流行最严重的国家之一，被列为甲型肝炎高发区，主要侵犯儿童，较易引起严重后果。hev是全球急性病毒性肝炎最重要的病因，病死率居病毒性肝炎首位，疾病负担重，对慢肝患者、孕妇、老人具有高危害性。丁肝是一种缺陷病毒，只能存在于hbv感染的人及某些嗜肝dna病毒表面抗原阳性的动物中，极少有单独hdv感染。丁型肝炎的临床表现在一定程度上取决于同时伴随的hbv感染状态。hbcigm(乙型肝炎核心igm抗体)出现于乙型肝炎急性期和慢性肝炎急性发作期。有hbcigm(乙型肝炎核心igm抗体)存在的情况下，表明具有一定的传染性，病毒在复制。在急性感染后的乙型肝炎“窗口期”，hbcigm(乙型肝炎核心igm抗体)是唯一能检出的特异性hbv指标。故对“窗口期”hbsag(乙型肝炎表面抗原)阴性的病人，更需要进行hbcigm检测，可提高乙肝的早期诊断率。hbv-pres1ag(乙型肝炎前s1抗原)可以敏感的反映乙肝病毒复制，可作为早期诊断乙肝病毒感染的较好指标，弥补hbeag(乙型肝炎e抗原)阴性仍然存在病毒复制的情况；它还是提示乙肝病毒变异、hbeag(乙型肝炎e抗原)转变成抗hbe(乙型肝炎e抗体)阳性的仍存在病毒复制特别有价值的指标。目前市场上现有的肝炎类病原学质控品多为单项质控品，种类繁多，操作繁琐，缺乏商品化复合类质控品，且进口质控品价格昂贵。因此，开发一种肝炎类病原学复合质控品，既方便了临床操作又节约了成本，为临床检验结果的准确性提供保障。但在本发明研发过程中发现采用常规的辅料制备得到的复合质控品，在临床检测时会出现抗体对抗原产生抑制作用的问题。技术实现要素：有鉴于此，本发明提供了一种肝炎类病原学复合质控品及其制备方法。该复合质控品在实际检测时无抗体抗原间抑制作用；均一性、精密性和稳定性较好，既方便了临床操作又节约了成本。为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：本发明提供了一种肝炎类病原学复合质控品，该复合质控品由病原学标志物、表面活性剂、防腐剂、稳定剂、均匀剂和基质组成；病原学标志物为甲型肝炎igm抗体、戊型肝炎igm抗体、戊型肝炎igg抗体、丁型肝炎igm抗体、丁型肝炎igg抗体、乙型肝炎核心igm抗体、乙型肝炎前s1抗原中的至少两种标志物；稳定剂为酪蛋白；均匀剂为丙三醇。作为优选，以质量百分含量计，肝炎类病原学复合质控品中各组分的用量为：优选地，以质量百分含量计，肝炎类病原学复合质控品中各组分的用量为：更优选地，以质量百分含量计，肝炎类病原学复合质控品中各组分的用量为：在本发明提供的实施例中，以质量百分含量计，肝炎类病原学复合质控品中各组分的用量为：作为优选，表面活性剂为tween-20、trixon-100、聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种。作为优选，防腐剂为nan3、proclin300、mit、氨苄西林钠中的至少一种。作为优选，基质为灭活血清、磷酸盐缓冲液或tris缓冲液中的一种。本发明还提供了该肝炎类病原学复合质控品的制备方法，包括如下步骤：将病原学标志物、表面活性剂、防腐剂、稳定剂、均匀剂和基质混匀。作为优选，在混匀步骤之前还包括检测基质中病原学标志物含量、排除病原学标志物含量≥0.5s/co的基质。本发明提供了一种肝炎类病原学复合质控品及其制备方法。该复合质控品由病原学标志物、表面活性剂、防腐剂、稳定剂、均匀剂和基质组成；病原学标志物为甲型肝炎igm抗体、戊型肝炎igm抗体、戊型肝炎igg抗体、丁型肝炎igm抗体、丁型肝炎igg抗体、乙型肝炎核心igm抗体、乙型肝炎前s1抗原中的至少两种标志物；稳定剂为酪蛋白；均匀剂为丙三醇。本发明具有的技术效果为：本发明将甲型肝炎igm抗体、戊型肝炎igm抗体、戊型肝炎igg抗体、丁型肝炎igm抗体、丁型肝炎igg抗体、乙型肝炎核心igm抗体、乙型肝炎前s1抗原等七种病原学标志物中的至少两种标志物叠加复合在一起配制成为一种病原学复合质控品，解决了单项质控品操作繁琐，种类繁多的缺点，可以商品化生产复合类质控品，为临床检验结果的准确性提供保障。本发明添加了稳定剂酪蛋白，可大大降低复合质控品对hbv-pres1ag的抑制作用；本发明添加了均匀剂丙三醇，使得该病原学复合质控品的均一性较好；本发明复合质控品精密性和稳定性较好，可以在-15℃保存三年或者在4℃保存两年。本发明开发的肝炎类病原学复合质控品，既方便了临床操作又节约了成本，且该质控品均一性、精密性和稳定性良好，为临床检验结果的准确性提供保障。通过将多个项目复合到一个瓶中，可以大大精简实验室质控品种类，减少存储空间，同时缩短工作时间，提高工作效率，减少失误。相比于单项质控品，复合质控品的使用也可以减少因质控品失效和死体积引起的浪费。具体实施方式本发明公开了一种肝炎类病原学复合质控品及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本发明公开了一种病原学复合质控品及其制备方法与应用。首先选择血清为基质，依次加入保护物质和病原学标志物分析成分。保护物质由表面活性剂、防腐剂、稳定剂、均匀剂等组成，病原学标志物包括havigm(甲型肝炎igm抗体)、hevigm(戊型肝炎igm抗体)、hevigg(戊型肝炎igg抗体)、hdvigm(丁型肝炎igm抗体)、hdvigg(丁型肝炎igg抗体)、hbcigm(乙型肝炎核心igm抗体)、hbv-pres1ag(乙型肝炎前s1抗原)七种中的至少两种。质控品制备过程中所用原辅料均已热灭活，以除去各种潜在病原微生物的危害。该质控品不仅能够同时用于七项病原学中至少两项的检测过程的质量控制，为临床疾病的诊断提供准确的依据；而且均一性和稳定性好，这种复合质控品制备完成后既方便了临床操作又节约成品，为临床检验结果的准确性提供了可靠保障。本发明提供的肝炎类病原学复合质控品及其制备方法中所用试剂或仪器均可由市场购得。下面结合实施例，进一步阐述本发明：实施例1一种病原学复合质控品，以血清为基质，保护物质包括表面活性剂；防腐剂；稳定剂；均匀剂；病原学标志物；表面活性剂为3％的tween-20；防腐剂为2％的nan3；稳定剂为5％的酪蛋白；均匀剂为15％的丙三醇。病原学标志物为2％甲型肝炎igm抗体、0.25％戊型肝炎igm抗体、0.14％戊型肝炎igg抗体、0.17％丁型肝炎igm抗体、0.13％丁型肝炎igg抗体、1％乙型肝炎核心igm抗体、0.13％乙型肝炎前s1抗原中的至少两种标志物。具体制备步骤如下：(1)收集血清，解冻后在60-70℃水浴1-2h灭活，灭活血清作为基质血清，置于4℃保存；(2)检测分析基质血清中各病原学标志物成分的含量，甲型肝炎igm抗体、戊型肝炎igm抗体、戊型肝炎igg抗体、丁型肝炎igm抗体、丁型肝炎igg抗体、乙型肝炎核心igm抗体、乙型肝炎前s1抗原在血清中含量均<0.5s/co；(3)按比例加入表面活性剂、防腐剂、稳定剂及均匀剂搅拌均匀；(4)按比例加入甲型肝炎igm抗体阳性物质；戊型肝炎igm抗体阳性物质；戊型肝炎igg抗体阳性物质；丁型肝炎igm抗体阳性物质；丁型肝炎igg抗体阳性物质；乙型肝炎核心igm抗体阳性物质；乙型肝炎前s1抗原阳性物质，充分搅拌均匀，得到液态病原学复合质控品。实施例2一种病原学复合质控品，以血清为基质，保护物质包括表面活性剂；防腐剂；稳定剂；均匀剂；病原学标志物；表面活性剂为3％的tween-20；防腐剂为2％的nan3；稳定剂为10％的酪蛋白；均匀剂为15％的丙三醇。病原学标志物为2％甲型肝炎igm抗体、0.25％戊型肝炎igm抗体、0.14％戊型肝炎igg抗体、0.17％丁型肝炎igm抗体、0.13％丁型肝炎igg抗体、1％乙型肝炎核心igm抗体、0.13％乙型肝炎前s1抗原中的至少两种标志物。具体制备步骤实施例1。实施例3一种病原学复合质控品，以血清为基质，保护物质包括表面活性剂；防腐剂；稳定剂；均匀剂；病原学标志物；表面活性剂为3％的tween-20；防腐剂为2％的nan3；稳定剂为15％的酪蛋白；均匀剂为15％的丙三醇。病原学标志物为2％甲型肝炎igm抗体、0.25％戊型肝炎igm抗体、0.14％戊型肝炎igg抗体、0.17％丁型肝炎igm抗体、0.13％丁型肝炎igg抗体、1％乙型肝炎核心igm抗体、0.13％乙型肝炎前s1抗原中的至少两种标志物。具体制备步骤实施例1。对比例1本对比例与实施例1相比，缺少稳定剂酪蛋白。一种病原学复合质控品，以血清为基质，保护物质包括表面活性剂；防腐剂；稳定剂；均匀剂；病原学标志物；表面活性剂为3％的tween-20；防腐剂为2％的nan3；均匀剂为15％的丙三醇。病原学标志物为2％甲型肝炎igm抗体、0.25％戊型肝炎igm抗体、0.14％戊型肝炎igg抗体、0.17％丁型肝炎igm抗体、0.13％丁型肝炎igg抗体、1％乙型肝炎核心igm抗体、0.13％乙型肝炎前s1抗原中的至少两种标志物。对比例2本对比例与实施例2相比，牛血清白蛋白替代了酪蛋白。一种病原学复合质控品，以血清为基质，保护物质包括表面活性剂；防腐剂；稳定剂；均匀剂；病原学标志物；表面活性剂为3％的tween-20；防腐剂为2％的nan3；稳定剂为10％的牛血清白蛋白；均匀剂为15％的丙三醇。病原学标志物为2％甲型肝炎igm抗体、0.25％戊型肝炎igm抗体、0.14％戊型肝炎igg抗体、0.17％丁型肝炎igm抗体、0.13％丁型肝炎igg抗体、1％乙型肝炎核心igm抗体、0.13％乙型肝炎前s1抗原中的至少两种标志物。对比例3本对比例与实施例2相比，卵清蛋白替代了酪蛋白。一种病原学复合质控品，以血清为基质，保护物质包括表面活性剂；防腐剂；稳定剂；均匀剂；病原学标志物；表面活性剂为3％的tween-20；防腐剂为2％的nan3；稳定剂为10％的卵清蛋白；均匀剂为15％的丙三醇。病原学标志物为2％甲型肝炎igm抗体、0.25％戊型肝炎igm抗体、0.14％戊型肝炎igg抗体、0.17％丁型肝炎igm抗体、0.13％丁型肝炎igg抗体、1％乙型肝炎核心igm抗体、0.13％乙型肝炎前s1抗原中的至少两种标志物。试验例1采用实施例1-3的质控品和对比例1-3的质控品进行抗原抗体的检测，试验结果如下：表1实施例1-3检测结果表2对比例1检测结果检测项目稀释比例复合配制单项配制偏差havigm1:507.306.876％hevigm1:4008.047.823％hevigg1:7008.529.09-7％hdvigm1:6006.806.87-1％hdvigg1:8007.066.823％hbcigm1:1005.916.29-7％hbv-pres1ag1:8001.998.44-325％表3对比例2检测结果检测项目稀释比例复合配制单项配制偏差havigm1:507.637.551％hevigm1:4007.827.96-2％hevigg1:7008.267.815％hdvigm1:6007.568.02-6％hdvigg1:8007.066.725％hbcigm1:1006.256.53-4％hbv-pres1ag1:8002.657.62-188％表4对比例3检测结果检测项目稀释比例复合配制单项配制偏差havigm1:507.597.75-2％hevigm1:4007.267.49-3％hevigg1:7008.158.69-7％hdvigm1:6007.667.236％hdvigg1:8006.926.654％hbcigm1:1006.696.217％hbv-pres1ag1:8003.058.42-176％未加酪蛋白时，七项复合质控品对hbv-pres1ag的抑制作用很强(表2)。采用牛血清白蛋白或卵清蛋白作为稳定剂时，七项复合质控品对hbv-pres1ag的抑制作用也较强(表3)。在基质血清中加入不同比例的酪蛋白，配制的复合质控品和单项质控品偏差较低，七项复合质控品对hbv-pres1ag的抑制作用大大降低，以酪蛋白的添加比例10％～15％为优(表1)。试验例2本试验例在实施例2配方基础上研究了添加不同比例丙三醇配制的质控品在混匀和不混匀的条件下连续检测十天(每天一次)验证精密性及均匀性，具体数据见下表：表5精密性及均匀性检测结果从数据可以看出，丙三醇的添加提高质控品均匀性，适当的添加比例提高质控品的精密性，以15％添加量最优。在临床操作中可一定程度的减少因操作等原因带来的人为误差，更好的保证了试验结果的可靠性。试验例3对配制好的实施例2的病原学复合质控品进行4℃和37℃的稳定性考核，具体结果见下表：表6稳定性检测结果项目名称/存储条件﹣20℃对照4℃14天4℃28天37℃7天37℃14天havigm3.375.70％10.21％8.89％10.03％hevigm4.177.87％10.60％2.08％11.23％hevigg3.524.59％6.35％5.43％7.29％hdvigm3.254.15％6.87％8.69％10.25％hdvigg4.033.26％7.26％6.75％9.65％hbcigm3.157.57％8.92％8.63％13.35％hbv-pres1ag3.656.25％8.28％8.62％10.45％从上表可以看出，液体病原学复合质控品在4℃可保存28天(降幅≤15％)，在37℃可保存14天(降幅≤15％)。性能稳定，保存时间长，制备工艺简单方便，可满足商品化生产及临床检验上对质控品稳定性、均一性的要求。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页1 2 3