一种新型冠状病毒荧光定量快速检测二联卡试剂盒的制作方法

本发明属于生物技术领域的免疫学体外诊断产品技术领域。

背景技术：

2019-ncov与2003年“非典”sars冠状病毒和“中东呼吸综合征”mers冠状病毒类似，均属于β属冠状病毒。实验中，通过三者的基因序列比对，2019-ncov与sars-cov有约85%相似性，与mers-cov有40%的相似性。

2019-ncov的免疫学诊断方法与sars-cov及mers-cov类似，主要依赖于其基因组编码的两个结构蛋白，刺突蛋白（s）和核衣壳蛋白（np）。

因此，sars-covnp重组蛋白可应用于冠状病毒免疫学的快速诊断检测。

技术实现要素：

本发明提供了一种新型冠状病毒（2019-ncov）荧光定量快速检测二联卡试剂盒，本二联卡通过分别诊断sars-covnp蛋白阳性和诊断sars-cov蛋白阴性来确诊新型冠状病毒阳性，使用方便快捷，适合各类医疗机构的新型冠状病毒引起的疾病的快速诊断。

本发明采取如下技术方案：

一种新型冠状病毒（2019-ncov）荧光定量快速检测二联卡试剂盒，所述二联卡试剂盒采用荧光微球（202nm）作为抗体标记物，所述二联卡试剂盒分为1卡和2卡二卡合一，所述二卡分别具备c线和t线，所述t线分为1卡t1线和2卡t2线，本二联卡试剂盒通过分别诊断sars-covnp蛋白阳性和诊断sars-cov蛋白阴性来确诊新型冠状病毒阳性。

进一步地，所述sars-covnp蛋白抗体标记物采用的是荧光微球（202nm）。

进一步地，所述1卡t1线包被的是sars-covnp的单克隆抗体。

进一步地，所述2卡t2线包被的是sars-cov的单克隆抗体。

进一步地，所述二联卡荧光微球标记的是识别sars-covnp和sars-cov的单克隆抗体。

本发明制备的试纸具有灵敏度高、检测时间短、准确度高的特点。

附图说明：

图1为新型冠状病毒（2019-ncov）荧光定量快速检测二联卡示意图。

具体实施方式：

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明，应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明，并不限定于本发明。

试纸的制备：

具体实施例一：

配制0.02m的pb溶液，加0.05%的吐温20、0.01%牛血清白蛋白，将300mm*150mm的样品垫浸泡处理30min，并且60℃烘干备用。

配制包被液，0.02m的pb溶液加0.1%的蔗糖和0.2%的牛血清白蛋白。

配制复溶液，0.01m的pb溶液，加0.5%的蔗糖和0.1%吐温20、0.5%的牛血清白蛋白。

包被羊抗鼠igg、sars-cov单克隆抗体、sars-covnp单克隆抗体各10-30ul，分别划线长c、t1、t2，烘干备用。

用202nm的荧光微球标记sars-cov单克隆抗体、sars-covnp单克隆抗体10-50ul，分装至96孔无吸附酶标板中，冻干。备用。

组装荧光试纸条，按底板、nc膜、吸水纸、样品垫的顺序依次组装，切条，即可。

具体实施例二：

配制0.02m的tris溶液，加0.05%的吐温20、0.01%牛血清白蛋白，将300mm*150mm的样品垫浸泡处理30min，并且60℃烘干备用。

配制包被液，0.02m的tris溶液加0.1%的蔗糖和0.2%的牛血清白蛋白。

配制复溶液，0.01m的tris溶液，加0.5%的蔗糖和0.1%吐温20、0.5%的牛血清白蛋白。

包被羊抗鼠igg、sars-cov单克隆抗体、sars-covnp单克隆抗体各10-30ul，分别划线长c、t1、t2，烘干备用。

用202nm的荧光微球标记sars-cov单克隆抗体、sars-covnp单克隆抗体10-50ul，分装至96孔无吸附酶标板中，冻干。备用。

组装荧光试纸条，按底板、nc膜、吸水纸、样品垫的顺序依次组装，切条，即可。

本试纸的使用方法：

将质控品或样本稀释至50倍，分别吸取50ul至2个冻干的荧光标记物孔中，吹打均匀，反应5min，再吸取孔中的液体分别滴到1卡和2卡测试条的样品垫上，等待10min后，放入荧光读数仪中读取数据即可，如图1所示。

本发明制备的试纸具有灵敏度高、检测时间短、准确度高的特点，本文中所述试剂盒即为新型冠状病毒（2019-ncov）荧光定量快速检测二联卡试剂盒。

技术特征：

1.一种新型冠状病毒荧光定量快速检测二联卡试剂盒，其特征在于：所述二联卡试剂盒采用荧光微球（202nm）作为抗体标记物，所述二联卡试剂盒分为1卡和2卡二卡合一，所述二卡分别具备c线和t线，所述t线分为1卡t1线和2卡t2线，本二联卡试剂盒通过分别诊断sars-covnp蛋白阳性和诊断sars-cov蛋白阴性来确诊新型冠状病毒阳性。

2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒荧光定量快速检测二联卡试剂盒，其特征在于：所述sars-covnp蛋白抗体标记物采用的是荧光微球（202nm）。

3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒荧光定量快速检测二联卡试剂盒，其特征在于：所述1卡t1线包被的是sars-covnp的单克隆抗体。

4.根据权利要求1所述的新型冠状病毒荧光定量快速检测二联卡试剂盒，其特征在于：所述2卡t2线包被的是sars-cov的单克隆抗体。

5.根据权利要求1所述的新型冠状病毒荧光定量快速检测二联卡试剂盒，其特征在于：所述二联卡荧光微球标记的是识别sars-covnp和sars-cov的单克隆抗体。

技术总结
本发明涉及一种新型冠状病毒（2019‑nCoV）荧光定量快速检测二联卡试剂盒。该试剂盒的特征是采用荧光微球（202nm）作为抗体标记物，二卡合一，两卡分别具备C线和T线。本二联卡通过分别诊断SARS‑CoV NP蛋白阳性和诊断SARS‑CoV蛋白阴性来确诊新型冠状病毒阳性，使用方便快捷，适合各类医疗机构的新型冠状病毒引起的疾病的快速诊断。

技术研发人员：李峰;王立坚;王竑婷;唐春
受保护的技术使用者：长春万成生物电子工程有限公司
技术研发日：2020.03.17
技术公布日：2020.06.12