一种测定盐酸氯丙嗪中有关物质的方法与流程

本发明涉及一种药品的检测方法，特别涉及一种测定盐酸氯丙嗪中有关物质的方法。

背景技术：

1、盐酸氯丙嗪，别名:2-氯-10-(3-二甲氨基丙基)吩噻嗪盐酸盐,cpz,氯普马嗪,分子式：c17h19cln2s.hcl，cas号:69-09-0，分子量:355.33，为一种吩噻嗪类抗精神病药，结构式如下：

2、

3、其作用机制主要与其阻断中脑边缘系统及中脑皮层通路的多巴胺受(da2)有关。对多巴胺(da1)受体、5-羟色胺受体、m-型乙酰胆碱受体、α-肾上腺素受体均有阻断作用，作用广泛。盐酸氯丙嗪片是常用的一种剂型，适应症为1.对兴奋躁动、幻觉妄想、思维障碍及行为紊乱等阳性症状有较好的疗效。2.止呕，各种原因所致的呕吐或顽固性呃逆。

4、中国药典2020年版收载的盐酸氯丙嗪有关物质项检测方法为液相色谱等度方法，无已知杂质的控制；usp中收载的盐酸氯丙嗪片与盐酸氯丙嗪原料均未对有关物质进行控制；ep收载的盐酸氯丙嗪中共有已知杂质6个，分别为杂质a、b、c、d、e、f，

5、结构式分别为：

6、杂质a：

7、

8、c17h19cln2os 334.86

9、杂质b：

10、

11、c21h30cl3n3s 462.91

12、杂质c：

13、

14、c17h21cln2s 320.88

15、杂质d：

16、

17、c16h18cl2n2s 341.30

18、杂质e：

19、

20、c12h8clns 233.72

21、杂质f：

22、

23、c17h19cln2s 318.86

24、其中杂质f为主成分异构体，以单独液相正相方法检测，其余5个杂质均在有关物质项下以液相反相等度方法检测，色谱条件与中国药典2020年半收载的方法一致。

25、参考中国药典的色谱条件，盐酸氯丙嗪保留时间约为10分钟，记录色谱至保留时间的4倍，采集时间约为40分钟，经研究发现将运行方法增加至90分钟时，在约70分钟处发现一个未知杂质峰，且由于保留时间过长，该峰被拉宽，峰高较低，无法准确积分，。因此需重新开发一个梯度洗脱方法，以满足杂质检测强需求。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种检测盐酸氯丙嗪中有关物质的方法。

2、本发明所述方法，步骤如下：

3、步骤1，对照品溶液的配制：称取盐酸氯丙嗪杂质a、杂质b、杂质c、杂质d及杂质e，用溶剂溶解并稀释至刻度，作为储备液；称取对照品盐酸氯丙嗪，加储备液，用溶剂溶解并稀释至刻度；

4、步骤2，供试品溶液的配制：；称取盐酸氯丙嗪，加溶剂溶解并稀释至刻度；

5、步骤3，测定：取对照品溶液和供试品溶液，注入hplc色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，计算供试品溶液中各组分的含量。

6、其中测定过程中的色谱条件如下：

7、色谱柱：以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂[alltima c8(4.6mm×250mm，5μm)]；流动相：以0.5％三氟乙酸(用四甲基乙二胺调节ph值至5.3)-乙腈(90：10)为流动相a，以0.5％三氟乙酸(用四甲基乙二胺调节ph值至5.3)-乙腈(10：90)为流动相b，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，检测波长为254nm。按下表进行线性梯度洗脱，

8、梯度洗脱条件

9、

10、其中，流动相的配制方法如下：

11、流动相a的配制方法：精密移取三氟乙酸5ml置1000ml水中混匀，用四甲基乙二胺调节ph值至5.3抽滤，量取上述溶液900ml和经微孔滤膜抽滤的乙腈100ml，混匀，超声脱气；流动相b的配制方法：精密移取三氟乙酸5ml置1000ml水中混匀，用四甲基乙二胺调节ph值至5.3抽滤，量取上述溶液100ml和经微孔滤膜抽滤的乙腈900ml，混匀，超声脱气。

12、其中，步骤1，对照品溶液的配制方法如下：精密称取盐酸氯丙嗪杂质a、杂质b、杂质c、杂质d及杂质e各4mg置100ml量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液；精密称取对照品盐酸氯丙嗪对照品40mg，置100ml量瓶中，精密移入10ml储备液，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即制成每1ml含盐酸氯丙嗪0.4mg、各杂质4μg的溶液。精密量取对照溶液2ml，置20ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀。

13、其中，步骤2，供试品溶液的配制方法如下：精密称取盐酸氯丙嗪40mg，置100ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，使用针头式过滤器滤过，得到续滤液1；精密移取1ml经滤过的供试品溶液，置200ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，使用针头式过滤器滤过，得到续滤液2。

14、其中，步骤1和步骤2中，所述溶剂为三氟乙酸，四甲基乙二胺，乙腈的混合水溶液，其配制方法如下：精密移取三氟乙酸5ml置1000ml水中混匀，用四甲基乙二胺调节ph值至5.3抽滤，量取上述溶液500ml和经微孔滤膜抽滤的乙腈500ml，混匀，超声脱气。

15、其中，测定过程中各组分的计算采用到相对保留时间与校正因子，其关系如下

16、杂质相对保留时间

17、

18、本发明最优选的方法，步骤如下：

19、步骤1，对照品溶液的配制：精密称取盐酸氯丙嗪杂质a、杂质b、杂质c、杂质d及杂质e各约4mg置100ml量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液；

20、精密称取对照品盐酸氯丙嗪对照品约40mg，置100ml量瓶中，精密移入10ml储备液，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即制成每1ml含盐酸氯丙嗪0.4mg、各杂质4μg的溶液。精密量取对照溶液2ml，置20ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀。

21、步骤2，供试品溶液的配制：精密称取盐酸氯丙嗪约40mg，置100ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，使用针头式过滤器滤过，得到续滤液1；精密移取1ml经滤过的供试品溶液，置200ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，使用针头式过滤器滤过，得到续滤液2。

22、步骤3，测定：取对照品溶液和供试品溶液，注入hplc色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，计算供试品溶液中各组分的含量。

23、其中，步骤1和步骤2中，所述溶剂为三氟乙酸，四甲基乙二胺，乙腈的混合水溶液，其配制方法如下：精密移取三氟乙酸5ml置1000ml水中混匀，用四甲基乙二胺调节ph值至5.3抽滤，量取上述溶液500ml和经微孔滤膜抽滤的乙腈500ml，混匀，超声脱气(当配制量大于1000ml时，其取用量均应按比例增加)。

24、测定过程中的色谱条件如下：

25、色谱柱：以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂[alltima c8(4.6mm×250mm，5μm)]，流动相：以0.5％三氟乙酸(用四甲基乙二胺调节ph值至5.3)-乙腈(90：10)为流动相a，以0.5％三氟乙酸(用四甲基乙二胺调节ph值至5.3)-乙腈(10：90)为流动相b，

26、流速为1.0ml/min，柱温为30℃，检测波长为254nm。

27、按下表1进行线性梯度洗脱，

28、表1、梯度洗脱条件

29、

30、测定过程中各组分的计算采用到相对保留时间与校正因子，其关系如下

31、表2、杂质相对保留时间

32、

33、其中，流动相的配制方法：

34、流动相a的配制方法：精密移取三氟乙酸5ml置1000ml水中混匀，用四甲基乙二胺调节ph值至5.3抽滤，量取上述溶液900ml和经微孔滤膜抽滤的乙腈100ml，混匀，超声脱气(当配制量大于1000ml时，其取用量均应按比例增加)。

35、流动相b的配制方法：精密移取三氟乙酸5ml置1000ml水中混匀，用四甲基乙二胺调节ph值至5.3抽滤，量取上述溶液100ml和经微孔滤膜抽滤的乙腈900ml，混匀，超声脱气(当配制量大于1000ml时，其取用量均应按比例增加)。

36、本发明的方法，和现有技术相比，优点如下：

37、梯度洗脱的方法能够缩短主峰后出峰的杂质的保留时间，缩短检测时间，提高检测效率。优化杂质的峰型，使峰高更高，峰型更好看，提高杂质峰的积分准确度，也提高了检测的灵敏度。