一种测定尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐对映体含量的方法与流程

本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐对映体的测定方法。

背景技术：

1、尼古丁（nicotine）又称为烟碱，其化学名称为3-(n-甲基吡咯烷-2-基)吡啶，是一种存在于烟草中的，具有n-胆碱受体活性的物质。天然烟草中含有的尼古丁绝大部分为s构型。在现有的技术手段中，获取纯品尼古丁的方法除了从烟草中提取之外，最主要采用的方法是人工全合成法。在不使用立体选择合成法的情况下，得到的尼古丁产物往往为r-尼古丁与s-尼古丁的混合物，需要使用拆分试剂对其进行分离，以得到相对纯净的s-尼古丁。酒石酸及其衍生物常被用于尼古丁的手性拆分，用它们拆分后得到对应的尼古丁盐，再游离得到尼古丁。在实际的工作中，拆分得到的盐纯度往往会受到各种因素的影响，导致对映体的混入，因此有必要对得到的产物进行分析。

2、在现有技术中，一种比较常见的做法是，先对得到的尼古丁盐进行处理，得到游离尼古丁，再对尼古丁进行分析以评估拆分的效果。这种先进行前处理再分析的原因是尼古丁盐难溶于正相体系，而常用的手性色谱法多为正相色谱。这种方法的缺点有两个，一是需要对样品进行前处理，操作繁琐费时；二是经过前处理的样品容易带有损伤色谱柱的溶剂，降低色谱柱的寿命。因此，本提供了一种无需对尼古丁盐进行游离前处理的，可以使用反相色谱条件进行手性分析的方法，克服了上述方法的缺陷。

技术实现思路

1、为了解决现有技术中的缺陷，本发明提供了一种测定尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐对映体的方法，该方法使用手性高效液相色谱法测定，无需对尼古丁盐进行游离前处理，前处理简便，使用反相色谱条件进行手性分析，检测快速、有效以及准确度高。

2、本发明提供了一种测定尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐对映体的方法，所述尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐的结构如下所示：

3、；

4、所述方法包括如下步骤：

5、步骤1：取尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐样品，加稀释液溶解并稀释，配制成浓度为0.1～3mg/ml的样品溶液；

6、步骤2：采用手性高效液相色谱法，将步骤1中配制得到的样品溶液进样，记录分析谱图。

7、进一步地，色谱条件：使用安捷伦高效液相色谱仪，紫外检测器，检测波长：210～280nm；柱温：20～50℃；进样量：5～20μl；色谱柱：以直链淀粉共价键合的硅胶为填料的色谱柱；流动相a：0.01～0.5%碱性水溶液；流动相b：有机溶剂；流动相流速：0.5～1.5ml/min；等度洗脱：0-30min，流动相a的体积含量保持在80%。

8、更进一步的，色谱柱为硅胶表面共价键合有直链淀粉-三（3-氰-5-甲基苯基氨基甲酸酯）。

9、更进一步的，所述碱性水溶液选自二乙胺水溶液、三乙胺水溶液、吡啶水溶液中的一种或几种，优选为二乙胺水溶液。

10、更进一步的，所述有机溶剂选自乙腈、乙醇和甲醇中的一种或几种，优选为乙腈。

11、进一步地，所述谱图中r构型尼古丁盐的保留时间为15.3-15.7min，s构型尼古丁盐的保留时间为16.5-17.1min。

12、有益效果：本发明提供了一种无需对尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐进行复杂前处理的检测对映体的方法，该方法使用手性高效液相色谱法测定，前处理简便，使用反相色谱条件进行手性分析，可以使得异构体有效分离，分析方法稳定，将分析周期控制在30分钟内，能实现操作简单、检测快速、有效以及准确度高。

技术特征：

1.一种测定尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐对映体含量的方法，其特征在于，所述尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐的结构如下所示：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，色谱条件：使用安捷伦高效液相色谱仪，紫外检测器，检测波长：210～280nm；柱温：20～50℃；进样量：5～20μl；色谱柱：以直链淀粉共价键合的硅胶为填料的色谱柱；流动相a：0.01～0.5%碱性水溶液；流动相b：有机溶剂；流动相流速：0.5～1.5ml/min；等度洗脱：0-30min，流动相a与流动相b的体积比为80%。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，色谱柱为硅胶表面共价键合有直链淀粉-三（3-氰-5-甲基苯基氨基甲酸酯）。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述碱性水溶液选自二乙胺水溶液、三乙胺水溶液、吡啶水溶液中的一种或几种，优选为二乙胺水溶液。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂选自乙腈、乙醇和甲醇中的一种或几种，优选为乙腈。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述谱图中r构型尼古丁盐的保留时间为15.3-15.7min，s构型尼古丁盐的保留时间为16.5-17.1min。

技术总结
本发明提供了一种无需对尼古丁二对甲苯酰酒石酸盐进行复杂前处理的检测对映体的方法，该方法使用手性高效液相色谱法测定，前处理简便，使用反相色谱条件进行手性分析，碱性水溶液和有机溶剂作为流动相，可以使得异构体有效分离，分析方法稳定，将分析周期控制在30分钟内，能实现操作简单、检测快速、有效以及准确度高。

技术研发人员：杨柳,余航,谢林霞,蔡强,谢立
受保护的技术使用者：珠海润都制药股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17