, 993 (2003 年 12 月 2 日）、 Deshpande等，美国专利号7, 691，290 (2010年4月6日）以及Deshpande等，美国专利号 7, 994,245 (2011年8月9日）。塑料基质中除氧剂的浓度可以广泛变化，并可通过常规实 验容易地确定最佳浓度，所述常规实验涉及观察和测试由该材料制成的盒内形成的聚丙烯 酰胺凝胶。在许多情况下，使用约1%至约10% (通常是约2%至约8%，以重量计）范围 的浓度来获得有效的结果。
[0036] 除添加至或包埋在基本或基质塑料内的氧阻隔或除氧材料以外用于构建盒壁的 基本或基质塑料可以是多种塑料材料中的任一种。示例是苯乙烯-丙烯腈聚合物、聚对苯 二甲酸乙二醇酯、醇修饰的聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚萘二甲酸乙二醇酯和聚碳酸酯。本文 公开的概念（如上文所述）特别适用于平板凝胶盒，其中典型的构建由两块板（其可通过 以下方法方便地形成：注塑，随后彼此平行排列并通过粘合或其他形式的焊接在两侧边缘 处连接在一起，其中各板之间的空间形成凝胶的平板形空腔）和沿空腔上下边缘的可移除 条组成，所述条用于在浇制凝胶期间保持单体溶液并且可移除以允许电极缓冲液在电泳期 间接触凝胶的上下边缘。这类盒以多种尺寸制备以适应大和小的平板凝胶。
[0037] 通过常规方法在盒中制造凝胶。在将氧阻隔层置于盒壁上方的情况下，该方法可 涉及首先使用氧阻隔层覆盖与丙烯酰胺单体溶液接触的盒壁表面，之后将溶液置于盒中。 随后将单体溶液与导致聚合发生所需的任何其他组分一起置于盒中，随后通过使单体聚合 来形成凝胶。在将除氧剂包埋在形成盒壁的基质塑料中的情况下，使用含有除氧剂的塑料 树脂，通过注塑最方便地形成盒本身。一旦盒形成，即可将单体溶液与导致聚合发生所需的 任何其他组分一起置于盒中，随后通过聚合形成凝胶。根据常规方法在盒支持的凝胶中进 行电泳实验，其中值得注意的是SDS-PAGE，其使用本文所述盒和凝胶不需要任何特殊调节。 实施例
[0038] 使用两种方法制备电泳凝胶盒的盒壁。随后由盒壁组装盒，并比较盒中制造的凝 胶分离和解析蛋白质的能力。
[0039] 在方法1中，通过注塑苯乙烯-丙烯腈（SAN)聚合物来制备盒壁，其中使用Bicor? 210ASB-X膜作为模内装饰。将Bicor膜置于模内，使得丙烯酸涂层朝向模具空腔并且聚偏 二氯乙烯涂层相对模具内表面压制。注塑后，Bicor膜固定质盒壁的塑料，其中丙烯酸涂层 接触SAN塑料且聚偏二氯乙烯涂层背向塑料。
[0040] 在方法2中，通过注塑SAN而不进行模内装饰来制备盒壁。注塑后，使壁冷却并硬 化，随后使用SARAN?胶乳（SERFENE? 400 ;美国密歇根州米德兰市的陶氏化学公司（Dow ChemicalCompany))涂覆，其以液体形式施涂并热固化。
[0041] 由根据方法1和2制备的盒壁组装盒。在对应于方法1的盒中，Bicor膜用作氧 阻隔层。在对应于方法2的盒中，SARAN?涂层用作氧阻隔层。两种盒都经组装以使得氧 阻隔层覆盖的盒壁表面朝内并与盒内制造的凝胶接触。
[0042] 由丙烯酰胺单体溶液在各盒内手工制造12 %Tris-HCl凝胶。在两块凝 胶上允许蛋白标准品（美国加利福尼亚州赫尔克里斯的伯乐实验室公司（Bio-Rad Laboratories,Inc.))和大肠杆菌细胞裂解液，并使用标准方法观察凝胶（图1)。与对应 于方法2的凝胶相比，对应于方法1的凝胶中的蛋白条带至少是同样清晰（sharp)且良好 解析的。结果表明，用作覆盖盒壁的氧阻隔层时，在阻止氧在浇制期间接触凝胶方面，Bicor 膜至少与SARAN涂层同样有效。
[0043] 在所附的权利要求书中，术语"一个"或"一种"用来表示"一个（种）或多个 (种）"。在述及步骤或要素时，其前导术语"包含"及其变化形式例如"包括"和"含有"旨 在表示其它步骤或要素的增加是可任选且不被排除的。本说明书中引用的所有专利、专利 申请和其它公开的参考材料都通过引用全文纳入本文中。当本说明书的内容与本发明引用 的任何参考材料或任何现有技术之间存在矛盾之处的时候，以本说明书为准。所述矛盾之 处包括现有技术对词或词组的定义与本说明书对相同的词或词组明确给出的定义之间的 任何差异。
【主权项】
1. 一种聚丙烯酰胺凝胶和塑料盒的组合，所述聚丙烯酰胺凝胶包含于所述塑料盒内， 所述塑料盒包括： 盒壁，其包封凝胶空腔且包含氧可渗透的基质塑料，以及 材料，其包括（i)覆盖所述盒壁的氧阻隔层、（ii)包埋在所述基质中的除氧剂，或 (iii)同时包括（i)和（ii)， 所述材料阻止氧通过所述盒壁接触所述聚丙烯酰胺凝胶。
2. 如权利要求1所述的组合，所述材料包括覆盖所述盒壁的氧阻隔层。
3. 如权利要求2所述的组合，所述氧阻隔层覆盖与所述聚丙烯酰胺凝胶接触的所述盒 壁的表面。
4. 如权利要求2所述的组合，所述氧阻隔层是选自下述物质的层：聚偏二氯乙烯、低密 度聚乙烯和丙烯腈乙酸甲酯共聚物。
5. 如权利要求2所述的组合，所述氧阻隔层在25 °C和100 % RH下的氧渗透率是 SxlO-iaiicn^cmVIicn^sf^cm Hg)]或更低。
6. 如权利要求2所述的组合，所述氧阻隔层是置于所述聚丙烯酰胺凝胶与所述盒壁之 间的片材。
7. 如权利要求2所述的组合，所述氧阻隔层是粘合至所述盒壁表面的膜。
8. 如权利要求1所述的组合，所述材料包括包埋在所述基质内的除氧剂。
9. 如权利要求8所述的组合，所述除氧剂选自：羟基官能化的聚丁二烯寡聚体、间二甲 苯二胺和己二酸的晶体缩聚反应产物，以及尼龙6纳米复合物。
10. 如权利要求1所述的组合，所述基质塑料选自：苯乙烯-丙烯腈聚合物、聚对苯二 甲酸乙二醇酯、醇修饰的聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚萘二甲酸乙二醇酯和聚碳酸酯。
11. 一种在塑料盒中由丙烯酰胺单体浇制聚丙烯酰胺凝胶的方法，所述塑料盒的盒壁 包含氧可渗透的基质塑料，阻止所述丙烯酰胺单体接触氧，所述方法包括： (a) (i)使用氧阻隔层覆盖所述盒壁、（ii)使用其中纳入除氧剂的塑料材料作为所述 基质塑料，或者（iii)同时使用（i)和（ii);以及 (b) 在所述塑料盒中由丙烯酰胺单体溶液浇制所述聚丙烯酰胺凝胶。
12. 如权利要求11所述的方法，所述方法包括使用氧阻隔层覆盖将与所述丙烯酰胺单 体接触的所述盒壁的表面，之后将所述丙烯酰胺单体置于所述盒中，并在具有如此覆盖的 所述表面的所述盒中浇制所述聚丙烯酰胺凝胶。
13. 如权利要求12所述的方法，所述氧阻隔层是选自下述物质的层：聚偏二氯乙烯、低 密度聚乙烯和丙烯腈乙酸甲酯共聚物。
14. 如权利要求12所述的方法，所述氧阻隔层在25°C和100% RH下的氧渗透率是 SxlO-iaiicn^cmVIicn^sf^cm Hg)]或更低。
15. 如权利要求12所述的方法，所述氧阻隔层是置于所述聚丙烯酰胺凝胶与所述表面 之间的片材，或者粘合至所述表面的膜。
16. 如权利要求11所述的方法，所述方法包括使用其中纳入除氧剂的塑料材料作为所 述基质塑料。
17. 如权利要求16所述的方法，所述除氧剂选自：羟基官能化的聚丁二烯寡聚体、间二 甲苯二胺和己二酸的晶体缩聚反应产物，以及尼龙6纳米复合物。
18. 如权利要求11所述的方法，所述基质塑料选自：苯乙烯-丙烯腈聚合物、聚对苯二 甲酸乙二醇酯、醇修饰的聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚萘二甲酸乙二醇酯和聚碳酸酯。
19. 如权利要求2所述的组合，所述盒壁通过注塑形成且所述氧阻隔层通过模内装饰 施用于所述盒壁。
20. 如权利要求2所述的组合，所述氧阻隔层包含第一亚层和第二亚层，所述第一亚层 与所述盒壁接触且所述第二亚层与所述聚丙烯酰胺凝胶接触，且所述第二亚层阻止氧接触 所述聚丙烯酰胺凝胶。
【专利摘要】通过在盒壁表面上方使用氧阻隔材料(否则氧会通过其进入盒空腔)，或者通过在制备盒壁的塑料中混合除氧剂，或者通过以上两种方法，可降低或消除在氧可渗透的塑料盒中聚丙烯酰胺电泳凝胶在形成过程中接触氧的有害影响。
【IPC分类】G01N27-447
【公开号】CN104813161
【申请号】CN201380060311
【发明人】J·麦基, C·帕纳托尼
【申请人】生物辐射实验室股份有限公司
【公开日】2015年7月29日
【申请日】2013年11月20日
【公告号】EP2923199A1, US20140138248, WO2014081874A1