洗涤，其中甲醇静置活化2分钟，抽真空使其完全从纳米纤维膜脱离；20mL稀释液，经lmol/L盐酸水溶液调节pH至4_5，以4mL/min速度连续通过尼龙6纳米纤维膜，200 μ L正己烷、200 μ L 0.01mol/L乙酸水清洗，200 μ L酸化甲醇(乙酸-甲醇，5:95，ν/ν)洗脱吸附于尼龙6纳米纤维膜上的碱性橙II，取洗脱液用高效液相色谱-二极管阵列检测。
[0030]实施例2:
[0031]样品:油豆腐。
[0032]目标物质:碱性橙II。
[0033]以尼龙6为原料，间甲基苯酚和甲酸的混合溶液(4:6，ν/ν)为溶剂，于室温下搅拌混匀8h，得到浓度为32wt%的尼龙6溶液。采用静电纺丝法，于30%的湿度、20°C的温度，ISkV的电压下，注射器以0.5mL/h的速度推进，喷射针尖距接收装置的距离为20cm，电纺4h，收集得膜厚度约为120 μ m，纤维直径约为230nm的尼龙6纳米纤维膜。
[0034]称取2.0g的油豆腐，粉碎，加入ImL的乙醇均化后，加入5mL的正己烷，涡旋30s、
超声30min，离心5min，弃去正己烧层，然后加入1mL提取液---氢氧化钠水溶液调节pH
至10的80%乙醇水溶液(乙醇:水=70:30, ν/ν)，涡旋混匀，在常温下，超声提取30min，10000r/min离心5min，收集上清液，残渣中再加入1mL提取液，进行二次提取，合并两次上清液。取2mL，用水稀释至20mL，进行固相萃取。
[0035]称取4.0mg尼龙6纳米纤维膜圆片(直径约15mm)装入膜盘式固相萃取仪，甲醇—水一正己烷一水一甲醇一水(各ΙΟΟμ?活化洗涤，其中甲醇静置活化2分钟，抽真空使其完全从纳米纤维膜脱离；20mL稀释液，以乙酸调节pH至5-6，以3mL/min速度流动-停止-流动-停止-流动，间歇式地通过尼龙6纳米纤维膜，200 μ L正己烷、200 μ L甲醇水(甲醇:水=2:98，ν/ν)清洗，200 μ L酸化甲醇(lmol/L盐酸水溶液-甲醇，3:97，ν/ν)洗脱吸附于尼龙6纳米纤维膜上的碱性橙II，取洗脱液经高效液相色谱-二极管阵列检测。
[0036]实施例3:
[0037]样品:豆浆。
[0038]目标物质:碱性橙II。
[0039]以尼龙6为原料，间甲基苯酚和甲酸的混合溶液(4:6，ν/ν)为溶剂，于室温下搅拌混匀15h，得到浓度为30wt%的尼龙6溶液。采用静电纺丝法，于30%的湿度、20°C的温度，16kV的电压下，注射器以0.lmL/h的速度推进，喷射针尖距接收装置的距离为25cm，电纺2h，收集得膜厚度约为80 μ m，纤维直径约为ISOnm的尼龙6纳米纤维膜。
[0040]称取1.0g的豆浆粉，加入ImL的乙醇均化后，加入1mL提取液氨水调节pH至12的70%乙醇水溶液(乙醇:水=70:30, ν/ν)，涡旋混匀，在常温下，超声提取30min，10000r/min离心5min，收集上清液，残渣中再加入1mL提取液，进行二次提取，合并两次上清液。取2mL，用水稀释至20mL，进行固相萃取。
[0041]称取3.0mg尼龙6纳米纤维膜圆片(直径约20mm)装入膜盘式固相萃取仪，乙醇—水一乙醇一水一乙醇一水(各100 μ L)活化洗涤，其中乙醇静置活化5分钟，抽真空使其完全从纳米纤维膜脱离；20mL稀释液，经lmol/L盐酸水溶液调节pH至6，以4mL/min速度连续地通过尼龙6纳米纤维膜，200 μ L丙酮、200 μ L水清洗后，200 μ L酸化乙醇(乙酸-乙醇，3:97，ν/ν)洗脱吸附于尼龙6纳米纤维膜上的碱性橙II，取洗脱液用高效液相色谱-二极管阵列检测。
【主权项】
1.一种适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是该方法包括以下步骤： .1.)尼龙6纳米纤维膜的制备：电纺溶液通过静电纺丝法制备尼龙6纳米纤维膜； .2.)豆制品样品中碱性橙II的提取净化：将尼龙6纳米纤维膜制成直径约10-60mm的圆片，安装在膜盘式固相萃取仪上；尼龙6纳米纤维膜依次经活化溶剂和水的循环洗涤；取待检豆制品，经粉碎、均化、脱脂后，加入提取溶剂，以提取溶剂超声提取碱性橙II，再将含有碱性橙II的提取溶剂经离心、稀释，制成水性基质的样品溶液；调节水性基质样品溶液的PH值至4-7 ;样品溶液连续流动或“流动-停止-流动”间歇式地通过如前处理过的尼龙6纳米纤维膜，碱性橙II被吸附在尼龙6纳米纤维膜上；以清洗剂淋洗尼龙6纳米纤维膜，去除可能与碱性橙II分子共同吸附的杂质；以洗脱剂将碱性橙II从尼龙6纳米纤维膜上洗脱下来，进行分析检测。
2.如权利要求I所述的适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是所述的电纺溶液以尼龙6为溶质，溶剂为间甲基苯酚和甲酸的混合溶液，体积比为4:6 (v/v)，于室温下搅拌混匀8-16h，得到浓度为20-40wt%的尼龙6溶液。
3.如权利要求I所述的适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是所述的尼龙6纳米纤维膜由直径为100-500nm的纳米纤维非定向排列，均匀堆积成的厚度为.50-120 μπι的膜；纳米纤维的直径由改变电纺溶液浓度或电纺操作的电压、推进速度或收集距离进行调整，纳米纤维膜厚度由电纺时间长短进行调整。
4.如权利要求I所述的适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是所述的样品超声提取时所用的提取溶剂为50-80% (v/v)的乙醇水溶液，再经氨水或氢氧化钠水溶液调节pH至8-12。
5.如权利要求I所述的适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是所述的水性基质的样品溶液是由提取溶剂经水稀释后制得的有机相比例〈7% v/v的溶液。
6.如权利要求I所述的适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是所述的调节水性基质样品溶液的PH值至4-7，所用的pH调节剂为乙酸或盐酸水溶液。
7.如权利要求I所述的适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是所述的尼龙6纳米纤维膜依次经活化溶剂与水的循环洗涤时，循环洗涤次数为2?3次，且最后一次以水洗涤；分别以水和活化溶剂依次循环加在尼龙6纳米纤维膜上，其中活化溶剂静置I?5分钟后通过尼龙6纳米纤维膜，并抽真空使其完全从尼龙6纳米纤维膜脱离，水直接连续地通过尼龙6纳米纤维膜，不经抽干，使尼龙6纳米纤维膜保持湿润。
8.如权利要求I所述的适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是所述的活化溶剂为甲醇、乙醇、乙腈或丙酮。
9.如权利要求I所述的适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是所述的清洗剂为水、甲醇、乙醇、乙腈、丙酮或正己烷，或是其中两种的混合溶液。
10.如权利要求I所述的适用于豆制品中碱性橙II检测的样品预处理方法，其特征是所述的洗脱剂为乙酸或盐酸的水溶液，或乙酸或盐酸的水溶液与甲醇或乙醇的混合溶液。
【专利摘要】本发明提供的基于尼龙6纳米纤维膜的豆制品中碱性橙Ⅱ检测的样品预处理方法，1.)尼龙6纳米纤维膜的制备：电纺溶液通过静电纺丝法制备尼龙6纳米纤维膜；2.)豆制品样品中碱性橙Ⅱ的提取净化：将尼龙6纳米纤维膜制成直径约10-60mm的圆片，安装在膜盘式固相萃取仪上；碱性橙Ⅱ被吸附在尼龙6纳米纤维膜上；以清洗剂淋洗尼龙6纳米纤维膜，去除可能与碱性橙Ⅱ分子共同吸附的杂质；以洗脱剂将碱性橙Ⅱ从尼龙6纳米纤维膜上洗脱下来，进行分析检测。仅用数毫克的尼龙6纳米纤维膜，数百微升的洗脱溶剂，即可实现对各种豆制品实际样品中碱性橙Ⅱ染料的高选择性高效富集和净化，样品基质不影响目标物的检测，萃取效率较已商业化生产的固相萃取小柱大为提高。
【IPC分类】G01N1-34, G01N30-06
【公开号】CN104833564
【申请号】CN201510175514
【发明人】许茜, 祁菲菲, 李晓晴
【申请人】东南大学
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年4月14日