流动相测试条组件、结合垫预处理溶液及其相关方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种免疫测试测试条组件、预处理溶液及其相关方法。更具体地，本发 明涉及关于人体前列腺相关情况的流动相测试条组件、结合垫预处理溶液及其相关方法。
[0002] 发明背景
[0003] 前列腺特异性抗原（PSA)是前列腺细胞产生的一种蛋白质，其是位于雄性膀胱下 方的小腺体。血液循环中一般可以发现存在少量的PSA。然而，由于各种原因，个体生命中 定期地检测和监控PSA水平的升高、升高水平、和/或进一步的波动是非常重要的。
[0004] 男性PSA的升高水平可以作为前列腺癌的标记，前列腺增大或前列腺炎的标记， 和/或其他潜在的非癌症相关情况的标记。一般而言，PSA水平越高，男性形成前列腺癌的 可能性越高。结果，PSA检测已经广泛用作一种筛选男性前列腺癌或前列腺缺陷（prostate deficiencies)的方法。
[0005] PSA检测被认为是多种免疫测定方法中的一种。免疫测定被定义为一种通过使用 抗体或免疫球蛋白检测或测定特定蛋白质或其他物质的存在的过程。通过免疫测定检测到 的物质经常被称为"分析物"，大多数情况下它是蛋白质。免疫测定方法一般检测血液或其 他体液样本中分析物的存在。
[0006] 除了癌症筛选，PSA检测也可以用于监测已经被确诊为前列腺癌或前列腺增大并 且正在进行治疗的男性，从而确定，特别是该情况是否响应治疗和/或所述情况是否存在 改变或复发。
[0007] 然而，不论PSA检测的目的或动机是什么，为了给病人提供尽可能最高水平的照 顾，医学技术人员需要对他们来说可用的PSA检测，该PSA检测能够提供一致地精确的PSA 水平测定。
[0008] 考虑到上文，本发明通过提供用于人体前列腺相关情况的检测和管理的能够提供 PSA精确测量的流动相测试条组件、结合垫预处理溶液及其相关方法，从而解决了上述问题 和其他需求。
【发明内容】
[0009] 根据本发明的至少一个实施方式，此处所述的流动相测试条组件包括结合垫。至 少一个实施方式中的所述结合垫包括抗体加载浓度（loading concentration)为约4 μ g/ OD的金溶液抗体，其中OD指光密度，并且金OD在5-6的范围内。该金溶液抗体与TRIS缓 冲液溶液结合并用分配缓冲液（dispensing buffer)再悬浮。至少一个实施方式中的结合 垫进一步包括高密度聚酯纤维垫材料。
[0010] 根据本发明的至少一个实施方式，结合垫预处理溶液如此处所述。至少一个实施 方式的结合垫预处理溶液包括：至少一种蛋白质、至少一种表面活性剂、至少一种金属阳离 子和至少一种聚合物。所述至少一种蛋白质选自于由牛血清白蛋白（BSA)和酪蛋白构成的 组。所述至少一种表面活性剂选自于由聚乙二醇十二烷基醚和聚乙二醇山梨糖醇单月桂酸 酯构成的组。所述至少一种金属阳离子选自于由四硼酸钠和偏硼酸钾构成的组。所述至少 一种聚合物选自于由蔗糖和聚乙烯醇构成的组。
[0011] 根据本发明的至少一个实施方式，用于预处理结合垫的方法如此处所述。至少一 个实施方式的方法包括将至少一种溶质溶解在预定体积的溶剂中以形成预处理溶液。调节 预处理溶液的PH值至期望的pH值以形成调节过pH的预处理溶液。至少一个实施方式的 方法进一步包括将结合垫浸渍于调节过PH的预处理溶液中。然后干燥浸渍过的结合垫。
【附图说明】
[0012] 通过参考下述附图，可以更好地理解本申请公开的内容，并使得本申请的众多特 征和优点对于本领域技术人员而言变得显而易见。
[0013] 图1为与本申请公开的方法有关的流程图。
【具体实施方式】
[0014] 如上所述，男性PSA的升高水平可以作为前列腺癌的标记、前列腺增大或前列腺 炎的标记、和/或其他潜在的非癌症相关情况的标记。相应地，由于各种原因，个体生命中 定期地检测和监控个体的PSA水平的升高、升高水平、和/或PSA水平的进一步波动是非常 有用和重要的。
[0015] 除了癌症筛选，个体PSA水平的检测和监测也可以用于监测已经被确诊为前列腺 癌或前列腺增大并且正在进行治疗的男性，从而确定，特别是该情况是否响应治疗和/或 所述情况是否存在改变或复发。
[0016] 考虑到上述，为了给所有病人提供尽可能最高水平的照顾，能够进行可以提供一 致地精确的PSA水平测量的PSA检测，对于医学技术人员而言是非常有益的。在癌症筛选的 背景中，具有可用的组件和相关方法对进行癌症筛选检测将是有益的，这能极大地降低和/ 或消除假阳性癌测试结果以及假阴性癌测试结果的发生。
[0017] 当个体PSA水平升高但并不真正存在癌症的时候，会产生假阳性癌测试结果。假 阳性测试结果可能使得男性及其家庭产生不必要的焦虑和痛苦，并导致额外的医疗步骤， 例如可能造成损害的前列腺活体检测。例如，活体检测可能的负面效应包括严重感染、疼 痛、和/或出血的可能。
[0018] 当男性PSA水平低但他实际上患有前列腺癌时，会产生假阴性癌测试结果。假阴 性测试结果可能使得男性、其家庭和其医生产生错误的认识，即认为他没有患癌症，而他实 际上可能患有需要立刻进行医学治疗的癌症。
[0019] 相应地，本发明不同的实施方式通过提供用于人体前列腺相关情况的检测和管理 的能够提供PSA精确测量的流动相测试条组件、结合垫预处理配方及其相关方法，从而解 决了上述问题和其他需求。
[0020] 令人惊奇地发现，当将本发明并入PSA检测盒和/或PSA相关测试条中时，本申请 至少提供下述中的一个，特别地（1)当例如并入PSA测试条中时，PSA检测整体稳定性的提 高；（2)稳定和稳健的金结合过程；(3)出乎意料的金OD (光密度）的降低；和（4)测试期 间流速的变化变小。
[0021] 免疫测定测试条一般可以分为固相和流动相。本申请的实施方式包含流动相测试 条组件。
[0022] 在流动相测试条组件的实施方式中，所述流动相测试条可以包括结合垫。该结合 垫可以包括金溶液抗体。本申请合适的抗体包括，例如PSA抗体。
[0023] 金溶液或金胶体的颜色为宝石红，当与抗体结合后一般也应保持该颜色。为了结 合，该抗体与金结合之前会首先用缓冲液和/或缓冲溶液洗涤。
[0024] 将金溶液抗体与金胶体结合的合适的缓冲液和/或缓冲溶液包括TRIS缓冲溶液。 TRIS缓冲溶液是一种使用弱碱性的三羟甲基氨基甲烷（HOCH2)3CNH2制备的缓冲液，其常被 称为"TRIS"。相应地，优选地，此处所用术语"TRIS缓冲溶液"或"TRIS缓冲液"和类似的 术语被用于表征一种使用三羟甲基氨基甲烷（HOCH 2) 3CNH2制备的缓冲液或缓冲溶液。
[0025] 本发明的流动相测试条组件实施方式中，用于将抗体结合到金胶体的缓冲溶液， 例如TRIS缓冲溶液的pH值可以为约7. 5-8. 0,例如约7. 8±2. 0%。
[0026] 用于将抗体结合至金胶体的缓冲溶液还可以包括2. 5-100mM或0. 0025-0.1 M范围 内的TRIS缓冲液，其中M指每升溶液中溶质的摩尔值。
[0027] 在期望的情况下，然后，可以用氯化钠（例如IM的氯化钠溶液）冲击（challenge) 缓冲液洗脱过的抗体溶液以测定金和抗体之间的结合的有效程度和牢固程度。pH不正确的 缓冲液的弱结合会导致金溶液的颜色从红色变为紫色或黑色。
[0028] 在流动相测试条组件的实施方式中，然后，可以用分配缓冲液再悬浮残留的 金-抗体复合物。
[0029] 在实施方式中，分配缓冲溶液可以包括蔗糖。蔗糖的合适含量包括约0. 5-30. 0% (以分配缓冲溶液的总重量为基准）。在某些实施方式中，蔗糖的含量可以是大约15% (以 分配缓冲溶液的总重量为基准）。
[0030] 针对下限，以分配缓冲溶液的总重量为基准，分配缓冲溶液中存在的蔗糖的含量 可以是至少约0.5%，例如，以分配缓冲溶液的总重量为基准，其为至少约1.0%、至少约 2. 0 %、至少约3. 0 %、至少约3. 5 %、至少约4. 0 %、至少约5. 0 %、至少约6. 0 %、至少约 7. 0%、至少约8. 0%、至少约9. 0%、至少约10. 0%、至少约10. 5%、至少约11. 0%、至少约 12. 0%、至少约12. 5%、至少约13. 0%、至少约13. 5%、至少约14. 0%、至少约14. 5%，和/ 或至少约15. 0%。
[0031] 针对上限，以分配缓冲溶液的总重量为基准，分配缓冲溶液中存在的蔗糖含量可 以是不超过约30. 0%，例如，以分配缓冲溶液的总重量为基准，其不超过约29. 5%、不超过 约29. 0%、不超过约28. 0%、不超过约27. 0%、不超过约26. 0%、不超过约25. 5%、不超过 约