B对所述虎驹乙肝制剂中的药材虎杖、丹参、五味子、和茵陈 或者它们指标成分进行鉴别，药材虎杖、丹参、五味子、和茵陈的指标成分有:虎杖苷、丹酚 酸B、五味子醇甲、五味子甲素、和绿原酸。
[0114]根据本发明的方法，其中对药材虎杖、丹参、五味子、和茵陈或者它们指标成分进 行鉴别所用的高效液相色谱法B包括如下步骤：
[0115] (1)取虎驹乙肝制剂适量，研细，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀 乙醇100ml，密塞，称定称重，加热回流1小时，放冷，再称定称重，加稀乙醇补足减失的重量， 摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
[0116] (2)取虎杖苷对照品、丹酚酸B对照品、五味子醇甲对照品、五味子甲素对照品和绿 原酸对照品，加甲醇制成每lml各含80yg的混合溶液，作为对照品溶液；
[0117] (3)照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录36页"附录VID高效液相色谱法" 所载方法试验，或者照《中华人民共和国药典》2015年版四部第59页"0512高效液相色谱法" 所载方法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1 %磷酸溶液为 流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为每分钟0.8ml;测定波长为215nm;柱温为30 °C；
[0118]
[0119]
[0120] (4)分别精密吸取上述两种溶液各15μ1，注入液相色谱仪，记录色谱图，比较供试 品溶液色谱图和对照品溶液色谱图。
[0121] 照本试验例的方法，检查上文实施例1-5所得各制剂。结果显示，对照品溶液色谱 图中五种指标成分之间的分离度均大于3,具有优异的分离度;供试品溶液色谱图中五种指 标成分之间的分离度均大于3,并且各峰均不受其它杂峰的干扰;供试品溶液色谱图中五种 指标成分的保留时间与对照品溶液色谱图中各自相应的指标成分吻合。就这些结果而言， 通常来说，针对这些试样的鉴别试验合格。
[0122] 另外，本发明人发现，在本试验例中，细微地改变梯度洗脱程序，都无法将丹酚酸Β 和绿原酸两者分离开，例如将上表中15_28min期间的流动相Α改为25%，就无法将丹酚酸Β 和绿原酸两者分离度达1.5以上；申请人已经努力尝试使用现有技术已公开的各种HPLC方 法，均不能获得丹酚酸B和绿原酸之间大于1.5的优良分离度，更不用说实现大于3分离度的 效果。
[0123] 试验例3:
[0124] 使用高效液相色谱法C对所述虎驹乙肝制剂进行含量测定，该含量测定针对制剂 中使用到的药材虎杖和五味子二者进行。
[0125] 高效液相色谱法C包括以下步骤：
[0126] (1)照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录36页"附录VID高效液相色谱法" 所载方法测定，或者照《中华人民共和国药典》2015年版四部第59页"0512高效液相色谱法" 所载方法测定；
[0127] (2)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流 动相A，以0.1 %磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱;流速为每分钟0.8ml;
[0128] 柱温为30°C;检测波长为215nm;理论塔板数按虎杖苷计算不得低于3000;
[0129]
[0130] (3)对照品浴液的制备：分别取ii味于醇甲对照品和虎杖苷对照品适量，精密称 定，加甲醇制成每lml含五味子醇甲15yg、虎杖苷160yg的混合对照品溶液，即得；
[0131] (4)供试品溶液的制备:取虎驹乙肝制剂，确定每粒制剂的平均重量，取适量(如果 制剂是胶囊剂则是指胶囊内装的颗粒或粉末，亦称内容物），研细;取约2g，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇100ml，密塞，称定称重，加热回流1小时，放冷，再称定称重，加 稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
[0132] (5)测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ1或10μ1，注入液相色谱 仪，测定，计算每粒制剂中包含的虎杖以虎杖苷(C20H2208)计的量，和/或包含的五味子以 五味子醇甲（C24H3207)计的量。
[0133] 在上述高效液相色谱法C的梯度洗脱中，五味子醇甲和虎杖苷均可以与其它峰实 现分离度大于3的分离效果;但是，已经发现，细微改变洗脱程序(例如将20~30min期间流 动相A73%改为75%)，就会造成五味子醇甲与杂质峰分离不开(分离度小于1.2)的情况发 生。改用其它色谱条件，例如以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-乙腈-水(30:10: 60)为流动相，流速0.5ml/min，检测波长为303nm，理论板数按虎杖苷峰计算应不低于2000 这样的色谱条件时，无法获得五味子醇甲和虎杖苷均可以与其它峰分离度大于1.5的分离 效果;又例如以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水(23:77)为流动相，流速0.8ml/ min，检测波长为306nm，理论板数按虎杖苷峰计算应不低于3000这样的色谱条件时，无法获 得五味子醇甲和虎杖苷均可以与其它峰分离度大于1.5的分离效果。
[0134] 在上述含量测定的步骤(4)中，"确定每粒制剂的平均重量"，如果所述制剂是片 剂，则采取这样的操作方式:取20片，精密称定，研细，精密称取约2g。以此方式确定每粒制 剂的平均重量，该平均重量与精密称取的约2g试样可用于最终计算每粒制剂中虎杖苷和/ 或五味子醇甲的含量。对于包衣片而言，去除包衣与不去除包衣均可以，没有实质影响，本 试验中不必去除包衣。在上述含量测定的步骤(4)中，"确定每粒制剂的平均重量"，如果所 述制剂是胶囊剂，则采取这样的操作方式:预先进行装量差异测定，接着取装量差异项下的 本品内容物，混匀，研细，取约2g，精密称定;这样确定每粒制剂的平均重量，该平均重量与 精密称取的约2g试样可用于最终计算每粒制剂中虎杖苷和/或五味子醇甲的含量。
[0135] 照本试验例的方法，测定上文实施例1-5所得各制剂。结果显示，实施例1-4的各片 剂中，每粒片剂含虎杖以虎杖苷(C20H2208)计均在5.3~7. lmg范围内，均大于4.5mg/粒;每 粒片剂含五味子以五味子醇甲（C24H3207)计均在0.41~0.83mg范围内，均大于0.32mg/粒。 实施例5的胶囊剂中，每粒胶囊剂含虎杖以虎杖苷(C20H2208)计为2.3mg，大于1.4mg/粒;每 粒胶囊剂含五味子以五味子醇甲（C24H3207)计为0.22mg，大于0.13mg/粒。
【主权项】
1. 一种虎弓句乙肝制剂质量控制的方法，所述虎弓句乙肝制剂由W下11味中药W及任选的 药用辅料制成:虎杖、妈蚁、柴胡、茵陈、板蓝根、构杞子、黄巧、Ξ屯、丹参、五味子、大要，该 方法包括使用高效液相色谱法A对所述虎菊]乙肝制剂中的药材Ξ屯和/或黄巧或者它们指 标成分进行鉴别的步骤。2. 根据权利要求1的方法，其中： 所述虎骑乙肝制剂是片剂、胶囊剂或颗粒剂； 制备所述虎菊1乙肝制剂的药材比例为:虎杖665重量份、妈蚁287.5重量份、柴胡132.5 重量份、茵陈250重量份、板蓝根332.5重量份、构杞子132.5重量份、黄巧167.5重量份、Ξ屯 17.5重量份、丹参167.5重量份、五味子132.5重量份、大要50重量份;和/或 所述Ξ屯和/或黄巧的指标成分是选自下列的一种或多种:Ξ屯皂巧R1、人参皂巧Rgl、 人参皂巧肺1、黄巧甲巧。3. 根据权利要求1的方法，其中对药材Ξ屯和/或黄巧或者它们指标成分进行鉴别所用 的高效液相色谱法A包括如下步骤： (1) 取虎菊]乙肝制剂适量，研细，取2g，加甲醇40ml，超声处理(例如，功率400~600W，频 率35~45kHz;例如，功率500W，频率40kHz)30~50分钟（例如40分钟）（本领域技术人员公 知，超声处理是使得制剂中的指标成分溶解于溶剂中，因此其超声处理的强度也不需要严 格限定），放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液用水饱和的正下醇振摇提 取2次，每次20ml，合并正下醇液，用浓氨试液洗涂两次，每次20ml，取正下醇液水浴蒸干，残 渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液； (2) 另取Ξ屯皂巧R1对照品、人参皂巧Rgl对照品、人参皂巧Rbl对照品、黄巧甲巧对照 品，加甲醇制成每1ml各含70yg的混合溶液，作为对照品溶液； (3) 照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录36页"附录VID高效液相色谱法"所载 方法试验，或者照《中华人民共和国药典》2015年版四部第59页"0512高效液相色谱法"所载 方法试验，W十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；W水为流动相A，W乙腊为流动相B，按下表 中的规定进行梯度洗脱，流速为Iml/min，柱溫为35°C，蒸发光散射检测器检测；(4)分别精密吸取上述两种溶液各15