酪氨酸在评估鸡蛋营养价值中的应用及评估方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种应用酪氨酸评估鸡蛋的营养价值以及评估方法，属于农产品中的 畜禽产品营养价值评估领域。
【背景技术】
[0002] 酪氨酸(英语:Tyrosine)简写为Tyr或Y，是一种芳香族氨基酸，亦是20种用来合成 蛋白质的蛋白氨基酸之一，它属于非必需氨基酸。酪氨酸比苯丙氨酸多一个羟基。苯丙氨酸 的主要代谢途径产生酪氨酸，苯丙氨酸羟化酶。代谢障碍会出现苯酮酸尿症(PKU)。酪氨酸 转变成儿茶酚胺和黑色素或彻底氧化分解。人体缺乏酪氨酸酶，黑色素合成出现障碍，称白 化病(albinism)。酪氨酸与多巴，多巴胺（与帕金森病相关），去甲肾上腺素，肾上腺素的合 成有关，在酪氨酸分解代谢过程中，尿黑酸分解受阻可出现尿黑酸尿症。
[0003]信号转导中的SH2结构域特异性结合磷酸酪氨酸残基。奶酪（cheese )、巧克力 chocolate)和柑橘类食物(citrous fruit)、腌渍沙丁鱼、西红柿、牛奶、乳酸饮料、乳酪、动 物肝脏、牛肉、酸牛奶、豆类、鱼类等等食物中含有丰富的酪氨酸。在现有技术中很少使用酪 氨酸作为评估食品营养价值的标志物。
[0004] 鸡蛋作为人类的日常营养来源，与人们的生活息息相关。鸡蛋中含有大量的营养 物质，其中微量元素，粗蛋白质，粗脂肪，胆固醇，卵磷脂，维生素 B2和维生素 A是其主要的营 养成分。鸡蛋中的这些营养素有助于增进神经系统的功能，可增强记忆，防止老年人记忆力 衰退;所含的微量元素硒、锌，维生素均有抗癌作用。所以，经常食用鸡蛋能丰富营养，健身 益寿。
[0005] 现在市场上可以买到的鸡蛋种类繁多，有规模化养鸡场的鸡蛋，也有粗放放养蛋 鸡产生的柴鸡蛋，还有人工鸡蛋等等，各类鸡蛋的营养价值参差不齐，而鸡蛋的营养价值也 越来越得到人们的重视。评估鸡蛋营养价值主要是通过表征鸡蛋中营养物质成分的含量高 低，进而评估营养价值。然而，鸡蛋中营养化学成分参数较多，同时评估不仅工作量大，且会 导致界定标准不一，因此，亟需一种通过单一物质或组合物迅速表征上述参数的高低进而 表征鸡蛋营养价值。
[0006] 而鸡蛋的营养价值与多种因素相关，其中最重要的因素包括饲养方式和蛋鸡品 种。当蛋鸡品种相同时，其营养价值则主要取决于饲养方式的选择。目前，市场上主要以以 下两种饲养条件鸡蛋为主：1)粗放养殖型鸡蛋:指以无污染的农作物作为主要饲料，以地表 昆虫等作为辅助饲料，散养鸡产的鸡蛋，该类鸡蛋是鸡在正常生理环境下产蛋而得到的鸡 蛋。其还被称为山鸡蛋，草鸡蛋，土鸡蛋、柴鸡蛋;2)规模化养殖型鸡蛋:是以人工合成饲料 喂养的鸡下的蛋，一般是机械化规模化养鸡场或养鸡专业户喂养的鸡下的蛋。然而一些厂 商为了提高经济利润，将本是规模化养殖条件下的鸡蛋标注为柴鸡蛋，因此如何能够更有 效的区分不同饲养方式的鸡蛋显得尤为重要。
[0007] 进一步地，如果能够找到专属性物质用于评估鸡蛋的营养价值，则为市场上鸡蛋 营养价值的评估提供了捷径。
[0008] 质谱与色谱分离联用技术具有快速、高灵敏度、高选择性等特点，尤其针对多种类 型及微量化合物的定性定量分析等特性，该技术日渐成为分析化学领域的重要手段。从现 有技术看，尚没有相关的方法将质谱和色谱联用技术应用于鸡蛋的营养价值评估中。本发 明基于上述问题提供一种简便的解决方案。
【发明内容】
[0009] 本发明解决的技术问题是提供一种评估鸡蛋营养价值的方法、物质及其应用。
[0010] 为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现：
[0011] 本发明提供一种评估鸡蛋营养价值的方法，其特征在于，检测鸡蛋中是否含有酪 氨酸或者酪氨酸含量高低。
[0012] 其中，该方法是通过超高效液相色谱分离系统(UPLC)与Q-T0F型
[0013] 质谱仪(Q-TOF MS/MS)的联用技术对鸡蛋进行检测。
[0014] 本发明还提供了一种评估鸡蛋营养价值的方法，其特征在于，通过超高效液相色 谱分离系统(UPLC)与Q-T0F型质谱仪(Q-TOF MS/MS)的联用技术在如下条件下对鸡蛋进行 检测：
[0015] 所述超高效液相色谱测定条件为:色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18柱;流 动相:A相为甲醇，B相为0.05%甲酸水-5mM醋酸铵溶液，梯度洗脱，梯度洗脱的方案如下:0_ 0. lmin：0%B-0.0%B；0. l-3.0min：0.0%B-0.0%B；3.0-15.0min：0.0%B-100.0%B； 15.0-23.0min：100.0%B-100.0%B；23.0-23. lmin： 100.0%Β-0.0%Β；23.1-26.Omin： 0.0%B-0.0%B；
[0016] 所述Q-TOF型MS/MS测定采用正离子检测模式，ESI离子源;检测到质谱离子特征峰 m/z 182.0810,其保留时间为 tR = 3.33min。
[0017] 本发明还提供了酪氨酸在评估鸡蛋营养价值中的应用。
[0018] 其中所述应用是通过检测鸡蛋中是否含有酪氨酸或者酪氨酸含量高低来实现的。
[0019] 其中通过超高效液相色谱分离系统(UPLC)与Q-T0F型质谱仪(Q-TOF MS/MS)的联 用技术检测鸡蛋中是否含有酪氨酸或者酪氨酸含量高低。
[0020] 另外，本发明还提供一种评估鸡蛋营养价值的物质，其特征在于，所述物质为酪氨 酸。
[0021] 进一步地，本发明还提供一种评估鸡蛋营养价值的试剂盒，其特征在于，所述试剂 盒含有能够鉴定或定量酪氨酸的试剂。
[0022]本发明的有益技术效果如下：
[0023]本发明采用超高效液相色谱分离系统(UPLC)与Q-T0F型质谱仪(Q-TOF MS/MS)的 联用技术，通过对鸡蛋样品的采集、鸡蛋样本前处理方法考察、优化液相色谱条件和质谱检 测参数、以及数据的采集、数据预处理、多变量数据分析等步骤，旨在获得可靠的评估营养 价值区分不同饲养方式鸡蛋的标志物。
[0024]本发明的物质和方法可以用于评估鸡蛋的营养价值，该方法简单，迅速，准确，而 且可以进行定量，本发明试剂盒可以做到实时监测，真正解决了鸡蛋营养价值评定需要多 参数，耗时长的问题。
【具体实施方式】
[0025] 为充分说明本发明所解决的技术问题和达到的技术效果，通过下述【具体实施方式】 和实施例对本发明进行详细说明。
[0026] 关于营养价值的评估，本发明通过对鸡蛋中化学成分如粗脂肪、粗蛋白质、灰分、 卵磷脂，VB2和VA等参数进行表征。作为本领域常识，由于粗放散养条件下鸡蛋中上述化学 成分含量较高，因此，其营养价值高于规模养殖条件下的鸡蛋。本发明创造性地发现评估鸡 蛋营养价值高低可以通过测定其中酪氨酸的含量进行，以酪氨酸的含量作为营养价值高低 的直接标准，即，酪氨酸含量高的鸡蛋的营养价值高于酪氨酸含量低的鸡蛋，不含酪氨酸的 鸡蛋的营养价值最低。
[0027]医学实验表明，放养型鸡蛋的品质显著高于人工喂养型鸡蛋，即放养型鸡蛋营养 价值高于人工喂养型鸡蛋，究其原因，因饲养场采用人工饲养，饲料单一，且饲料中含化学 添加剂，加速了鸡的产蛋频率，使鸡蛋本身营养价值大打折扣。而柴鸡蛋是散养鸡产下的 蛋，鸡饲料几乎不含有化学添加剂，主要以天然农作物为主要饲料，譬如:粮食、蔬菜、地表 昆虫等，鸡在正常生理环境下产蛋，营养价值颇高。
[0028] 然而，到目前为止，虽然不同来源鸡蛋的营养价值差异确认无异，并且很多学者也 发现微量元素、蛋白、或其他物质在不同鸡蛋中的含量差异，但鸡蛋营养评估仍是以多参 数、多指标做出综合评估，尚无一种能够区分不同来源鸡蛋的营养价值差异的特异性标志 物。
[0029] 基于上述需要，本发明在一种【具体实施方式】中提供一种评估鸡蛋营养价值的方 法，该方法检测鸡蛋中是否含有酪氨酸或者酪氨酸含量高低。在测定是否含有酪氨酸以及 酪氨酸含量时可以选择任何化学的、生物的检测方法，只要能够对其评估或定量即可，不限 于液相色谱质谱联用技术，并且进一步地还设计能够测定酪氨酸或其含量的试剂盒或试 纸，以用于评估鸡蛋的营养价值。
[0030] 在一种【具体实施方式】中，该方法是通过超高效液相色谱分离系统(UPLC)与Q-T0F 型质谱仪(Q-TOF MS/MS)的联用技术对鸡蛋进行检测。
[0031] 在一种【具体实施方式】中，本发明提供一种评估鸡蛋营养价值的方法，其特征在于， 通过超高效液相色谱分离系统(UPLC)与Q-T0F型质谱仪(Q-TOF MS/MS)的联用技术对鸡蛋 进行检测：
[0032] 所述高分辨液相色谱测定条件为:色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18柱;流 动相:A相为甲醇，B相为0.05%甲酸水-5mM醋酸铵溶液，梯度洗脱，梯度洗脱的方案如下:0_ 0. lmin：0%B-0.0%B；0. l-3.0min：0.0%B-0.0%B；3.0-15.0min：0.0%B-100.0%B； 15.0-23.0min：100.0%B-100.0%B；23.0-23. lmin： 100.0%Β-0.0%Β；23.1-26.Omin： 0.0%B-0.0%B；
[0033] 所述Q-TOF型MS/MS测定采用正离子检测模式，ESI离子源;检测到质谱离子特征峰 m/z 182.0810,其保留时间为 tR = 3.33min。
[0034] 在一种【具体实施方式】中，还提供了酪氨酸在评估鸡蛋营养价值中的应用;优选地， 其中所述应用是通过检测鸡蛋中是否含有酪氨酸或者酪氨酸含量高低来评估鸡蛋的营养 价值实现的；优选地，其中通过超高效液相色谱分离系统(UPLC)与Q-T0F型质谱仪(Q-T0F MS/MS)的联用技术对鸡蛋进行检测鸡蛋中是否含有酪氨酸或者酪氨酸含量高低。
[0035] 在一种【具体实施方式】中，本发明还提供一种评估鸡蛋营养价值的物质为酪氨酸。
[0036] 为了达到实时简便检测，在一种【具体实施方式】中，本发明还提供一种评估鸡蛋营 养价值的试剂盒，所述试剂盒含有评估或定量酪氨酸的试剂。用于评估的产品可以是试剂 盒，试纸，以达到方便用于评估和定量目的，并且能够进行方便地实时检测。
[0037] 实验例 [0038] 1.1样品米集
[0039] 粗放养殖条件下鸡蛋采集:从山地地区（河北