用于检测肿瘤细胞的装置的制造方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及用于检测肿瘤细胞的装置，属于医疗器械领域。
【背景技术】
[0002]目前，肿瘤越来越严重威胁到人类的生命健康。据报道，我国每年新发肿瘤病例约为312万例，其中，全国平均每天8550人、每分钟有6人被诊断为肿瘤，全国肿瘤死亡率为180.54/10万，每年因肿瘤死亡的病例达270万例。如此触目的数据，高度引起相关部门的重视，每位医疗工作者也都为降低肿瘤疾病而努力。肿瘤的死亡率高居不下的原因除了发病率外，肿瘤的恶性化转移是造成癌症复发和治愈率低下的根本原因，对肿瘤细胞缺乏有效的检测是一个重要原因。
[0003]检测肿瘤细胞能有效地对肿瘤情况进行早期诊断；能对治疗手段的效果进行快速有效的评估，可以以此确定较为合适的具体治疗方案；能实现对肿瘤复发监测，具有重要的临床应用价值。
[0004]然而传统的技术方法很难对其进行直接检测分析。跟着科技的发展，人们提出了一系列基于微米/纳米材料与结构的分离技术以实现对肿瘤细胞的富集和检测。但是现有基于此种方法的检测灵敏度依然有待于提高，据报道，利用此法仅有五六成的乳腺癌患者中检测出了肿瘤细胞。因此需要不断的发展高灵敏富集和检测方法。
【实用新型内容】
[0005]为了克服现有的肿瘤细胞检测方法的不足，本实用新型提供了一种以纳米凸起为基底的装置来检测肿瘤细胞。
[0006]为达到上述实用新型目的，本实用新型所采用的技术方案是:用于检测肿瘤细胞的装置，其由玻璃基板与硅盖板组成；所述硅盖板设有由凸起构成的粗糙区域；所述硅盖板还设有两个孔；所述玻璃基板设有储液池与两条流体通道；所述玻璃基板位于硅盖板的下方；所述粗糙区域与储液池对应；所述每条流体通道一端连通储液池，一端与一个孔对应。
[0007]根据本实用新型的装置，所述凸起的高度为1.2微米；凸起的间距为0.3微米。
[0008]根据本实用新型的装置，所述储液池的面积为玻璃基板面积的40%。
[0009]根据本实用新型的装置，所述硅盖板与玻璃基板为方形；所述硅盖板上的两个孔位于对角线位置。
[0010]硅盖板上的凸起粗糙区域捕捉富集肿瘤细胞，为检测区域。上述所谓粗糙区域与储液池对应是指粗糙区域与储液池面积接近，最好一致；面面相向。
[0011]优选的，流体通道包括平滑流道和鱼骨形流道。鱼骨形流道能够很好地混合均匀流入其中的流体。
[0012]玻璃基板与硅盖板封接结合，玻璃基板上的储液池与流体通道形成封闭结构，玻璃基板形成的储液池可以用来存放试剂，通道用于流体的流通，需要在硅盖板上设置小孔，作为流体的出入口 ；本实用新型优选小孔的孔径为I毫米。
[0013]本实用新型公开了用于检测肿瘤细胞装置的制备:
[0014]根据设计的储液池、流体通道，绘制出所需图形，制出铬掩膜板；以超声波刻蚀法，在玻璃基板上制备出储液池与流体通道；根据设计，采用反应离子刻蚀法在硅盖板上制备出凸起粗糙区域；用激光打孔法在硅盖板上制备出两个小孔；最后用乙醇及去离子水清洗干净；为带有粗糙区域的硅盖板；将硅盖板封接在玻璃基板上方，流体储液池与粗糙区域对应；流体通道的一端与小孔对应，分别为流体入口及出口。
[0015]由于上述技术方案的运用，本实用新型具有以下优点:
[0016]本实用新型将纳米粗糙区域应用到用于检测肿瘤细胞的装置中，显著地提高了捕捉肿瘤细胞的效率；极大的提高了肿瘤细胞检测的灵敏度；有利于病症的准确检测。
【附图说明】
[0017]图1为用于检测肿瘤细胞装置的结构示意图；
[0018]图2为实施例一硅盖板的结构示意图；
[0019]图3为实施例一玻璃基板的结构示意图；
[0020]其中，1、玻璃基板，2、硅盖板，21、流体入口，22、流体出口，23、凸起粗糙区域，11、储液池，12、流体通道，13、流体通道；
[0021]图4为已知数目的肿瘤细胞与用本实用新型的装置检测到肿瘤细胞的光强图。
【具体实施方式】
[0022]下面结合附图及实施例对本实用新型作进一步描述:
[0023]实施例一
[0024]附图1为检测肿瘤细胞装置的结构示意图，由玻璃基板I以及封接在玻璃基板上方的硅盖板2组成。
[0025]附图2为硅盖板的结构示意图，硅盖板设有流体入口 21与出口 22，还设有凸起粗糙区域23。
[0026]附图3为玻璃基板的结构示意图，设有储液池11，流体出口与入口通过流体通道12、13分别与储液池。流体通道包括平滑流道和鱼骨形流道。流入鱼骨形流道中的流体能够很好地混合均匀。
[0027]检测肿瘤细胞装置的制备:
[0028]根据设计的储液池、流体通道，绘制出所需图形，制出保护膜附在玻璃上；以超声波刻蚀法，在玻璃基板上制备出储液池与流体通道；根据设计，采用反应离子刻蚀法在硅盖板上制备出凸起粗糙区域；用激光打孔法在硅盖板上制备出两个小孔；最后用乙醇及去离子水清洗干净；为带有粗糙区域区域的硅盖板；将硅盖板封接在玻璃基板上方，流体储液池与粗糙区域对应；流体通道的一端与小孔对应，分别为流体入口及出口。将洁净硅盖板和玻璃基板表面用等离子氧化处理I分钟，再对应复合在一起，于124°C烘箱中处理22小时，实现不可逆封接。
[0029]储液池大小为1.3厘米X 1.4厘米X 2毫米；流体通道直径为I毫米，与小孔对应，流体不外泄；凸起的高度为1.2微米；凸起的间距为0.3微米。
[0030]样品检测:
[0031]将血样中红细胞裂解，分离出白细胞和肿瘤细胞；之后加入一定量的抗体(根据需要检测的肿瘤细胞选择合适的抗体)标记的电化学发光材料(三联吡啶钌化合物)，共孵育，离心去除未结合肿瘤细胞的电化学发光材料，得到细胞悬浮液；将细胞悬液以恒定的流速加入检测肿瘤细胞装置的入口，经过流体通道匀速进入储液池中。在凸起粗糙线的作用下，结合上电化学发光材料的肿瘤细胞被粗糙区域牢牢捕捉；细胞悬浮液添加完成后，捕捉的肿瘤细胞可以洗脱下来，利用电化学发光体系对捕获的肿瘤细胞进行检测，可以进行循环电位扫描，或者采用脉冲电位模式，或者采用恒电位模式，即可得到电化学发光信号，通过电化学发光强度计算出肿瘤细胞的捕获效率。
[0032]在血样中放置了已知不同数目的乳腺癌细胞，根据方法检测肿瘤细胞的信号。附图4是在血样中放置了不同数目已知的乳腺癌细胞电化学发光强度以及用本实用新型的装置去检测肿瘤细胞的电化学发光强度图。可以看到本实用新型的装置捕捉到的信号和已知数目的细胞的电化学发光强度有明显的相吻合的情况，证明本实用新型的装置有非常高的捕捉和检测效率。
【主权项】
1.用于检测肿瘤细胞的装置，其特征在于:所述用于检测肿瘤细胞的装置由玻璃基板与硅盖板组成；所述硅盖板设有由凸起构成的粗糙区域；所述硅盖板还设有两个孔；所述玻璃基板设有储液池与两条流体通道；所述玻璃基板位于硅盖板的下方；所述粗糙区域与储液池对应；所述每条流体通道一端连通储液池，一端与一个孔对应。
2.根据权利要求1所述用于检测肿瘤细胞的装置，其特征在于:所述凸起的高度为1.2微米；凸起的间距为0.3微米。
3.根据权利要求1所述用于检测肿瘤细胞的装置，其特征在于:所述储液池的面积为玻璃基板面积的40%。
4.根据权利要求1所述用于检测肿瘤细胞的装置，其特征在于:所述硅盖板与玻璃基板为方形。
5.根据权利要求4所述用于检测肿瘤细胞的装置，其特征在于:所述硅盖板上的两个孔位于对角线位置。
【专利摘要】本实用新型属于医用器械领域，公开了用于检测肿瘤细胞的装置其由玻璃基板与硅盖板组成；所述硅盖板设有由凸起构成的粗糙区域；所述硅盖板还设有两个孔；所述玻璃基板设有储液池与两条流体通道；所述玻璃基板位于硅盖板的下方；所述粗糙区域与储液池对应；所述每条流体通道一端连通储液池，一端与一个孔对应。本实用新型将纳米粗糙区域应用到用于检测肿瘤细胞的装置中，显著地提高了捕捉肿瘤细胞的效率；极大的提高了肿瘤细胞检测的灵敏度；有利于病症的准确检测。
【IPC分类】G01N33-574
【公开号】CN204462155
【申请号】CN201420817969
【发明人】张伟
【申请人】常熟市创新模具有限公司
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2014年12月22日