专利名称：富锗灵芝菌丝体的生产方法
技术领域：
本发明涉及一种灵芝菌丝体的生产方法，尤其是一种以灵芝液态发酵、可 明显提高有机锗含量、安全可靠的富锗灵芝菌丝体的生产方法。
背景技术：
当今医学实验已经证实，有机锗含有多个Ge-O键，参与体内代谢具有多
种功效有机锗所载负电荷氧原子可从癌细胞中夺取电子，使其电位下降， 使肿瘤细胞处在不利于生存的环境，从而抑制癌细胞繁殖并防止其向它处扩散； 有机锗能排成网状结构与体内污染物、重金属相结合成为锗化合物后而迅速排 出体外；同时能捕捉代谢产物中的氢，起到净化血液的作用，可消除血管壁 上的脂类附着物，抑制血栓形成，使血液循环畅通；有机锗可增强红血球携氧 能力，使治癌药物能到达病灶，充分发挥制癌、止痛效果；有机锗与人体血红 蛋白结合，可保证细胞的有氧代谢，促进细胞新陈代谢，抵御病害的侵蚀， 延缓机体的衰老。为此，含有机锗的产品相继问世。
灵芝，是祖国中医药宝库中的珍品，素有"仙草"之誉。古今药理与临床研 究均证明，灵芝确有防病治病、延年益寿之功效。东汉时期的《神农本草经》、 明代著名医药学家李时珍的《本草纲目》，都对灵芝的功效有详细的极为肯定的 记载。现在，灵芝作为药物已正式被国家药典收载，同时它又是国家批准的新 资源食品，无毒副作用，可以药食两用。虽然灵芝的药理成分非常丰富，其中 有效成份可分为十大类，包括灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、16种氨基酸(其 中含有七种人体必需氨基酸)、蛋白质、甾类、甘露醇、香豆精苷、生物碱、有 机酸(主含延胡索酸)，以及微量元素Ge、 P、 Fe、 Ca、 Mn、 Zn等。但是现有 灵芝中有机锗含量较少，因此其药理作用的主要成分还是灵芝多糖。
为了提高灵芝中有机锗的含量，中国专利申请号200410041827.3的发明专 利申请公开了一种"富锗紫灵芝及其生产工艺"，是将阔叶木粒、麸皮、米糠、 石膏粉、蛋白胨、硫酸镁、二氧化锗的草酸溶液混合作为固体培养基对紫灵芝 菌种进行培养。因培养基中所用的二氧化锗是无机锗且与草酸按重量比1: 5 配比，其有效量只是培养基总重量的0.002 0.15%,故无机锗转化为灵芝中的有机锗成分有限且不排除无机锗残留的灵芝中的可能性。
发明内容
本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种以灵芝液态 发酵、可明显提高有机锗含量、安全可靠的富锗灵芝菌丝体的生产方法。
本发明的技术的技术解决方案是 一种富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特 征在于按以下步骤进行 一种富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于按以下 步骤进行-
a. 制备富锗玉米浸泡液；
b. 在富锗玉米浸泡液中加入碳源、氮源、中量元素、豆油制备培养基并灭 菌、冷却；
C.在培养基中接种经斜面培养的灵芝液体菌种，培养菌种至生成灵芝菌丝体。
可将C步骤得到的含有灵芝菌丝体的液态产品过滤，将所得到的灵芝菌丝 体在58 62"C烘干，粉碎成粉末状。
所述的a步骤是以有机锗含量为0.5 1.5mg/kg的富锗玉米为原料，用水浸 泡、浓縮而得到有机锗含量为0.4~0.6mg/L的浓縮液。
所述b步骤中碳源、氮源、中量元素、豆油的加入量是每100ml培养基含 碳源4 5g、氮源l 2g、中量元素0.05 0.1g、豆油0.1g、富锗玉米浸泡液余量。
所述b步骤的灭菌、冷却处理是将培养在121'C灭菌30分钟，冷却至28°C 以下。
所述c步骤是在培养基中加入总体积2 10%的灵芝液体菌种，在25~28°C 通气搅拌培养60~100小时。
所述碳源为葡萄糖、蔗糖、饴糖、红薯粉、玉米粉、谷类淀粉中的至少一种。
所述氮源为酵母粉、黄豆粉、玉米浆、蛋白胨、花生饼粉中的至少一种。 所述中量元素是磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠中的 至少一种。
本发明是以富锗玉米的浸泡液为原料，与碳源、氮源、中量元素及豆油配 合制成灵芝培养液对灵芝菌种深层发酵而生产灵芝菌丝体。可将有机锗元素(玉 米锗)转化为灵芝锗生物大分子，明显提高了灵芝中有机锗含量(12.5g/kg)， 使灵芝在有效发挥灵芝多糖作用的前提下，还可以充分发挥有机锗的作用。
具体实施例方式
a. 称取锗含量为0.5~1.5mg/kg的富锗玉米，去除虫蚀粒、病斑粒、破损粒、 生芽粒、生霉粒、热损伤粒后，再用水进行漂洗，除去表面灰尘，然后用水浸 泡约18 36小时，再将浸泡好的水打入浓縮罐进行减压浓縮，浓缩至锗含量达 到0.4~0.6mg/L，即制备成富锗玉米浸泡液。
0.5-1.5mg/kg的富锗玉米可以通过外购，也可以在种植玉米时，施加的富 锗氨基酸肥，收获得到富锗玉米。
富锗氨基酸肥是按照以下步骤得到的。
在搪瓷反应釜中加入豆粕及水，豆粕与水的质量比为l: 1.5，浸泡至豆粕 吸水均匀；加入与豆粕质量相等的工业浓硫酸，密封，使反应釜罐内温度升温 到110 12(TC，搅拌水解IO小时；在釜罐内温度降温至8(TC时，加碳酸氢铵调 PH至中性，继续冷却至常温；按顺序边搅拌边加入如下以豆粕量为基数的组 分1.6-1.7倍磷酸氢二氨、0.97 0.98倍尿素、0.012倍硫酸锌、0.012倍硫酸 铜、0.016倍硼酸、0.016倍钼酸铵、0.008倍的硝酸烯钍、0.0001 0.001倍二 氧化锗、1.3倍氯化钾、1.3 1.4倍菜籽饼粉、0.0012倍中性蛋白酶；干燥造粒 或静置过夜取10%的上清液。
b. 取锗含量为0.4~0.6mg/L富锗玉米浸泡液，加入碳源、氮源、中量元素及 豆油，加入量是每100ml培养基含碳源4 5g、氮源l~2g、中量元素0.05 0.1g、 豆油O.lg，用富锗玉米浸泡液定容。将配置好的培养液在12rC灭菌30分钟， 冷却至28"C以下。
碳源为葡萄糖、蔗糖、饴糖、红薯粉、玉米粉、谷类淀粉中的至少一种。 氮源为酵母粉、黄豆粉、玉米浆、蛋白胨、花生饼粉中的至少一种。 中量元素是磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠中的至少 一种。
c. 在培养基中加入总体积2 10%经斜面培养的灵芝液体菌种，在25~28°C 通气搅拌培养60~100小时，培养菌种至生成灵芝菌丝体。
灵芝液体菌种采用CGMCC多孔菌科灵芝属真菌灵芝(GWwo^rmflf/""V/ww 5.616)，斜面培养同现有技术。
d. 将c步骤得到的含有灵芝菌丝体的液态产品过滤，将所得到的灵芝菌丝 体在58 62'C烘干，用超微粉碎机粉碎成粉末状，过100目筛，获得富锗灵芝 菌丝体产品。按照2005药典中灵芝多糖的测试方法及GB/T5009.151-2003食品中锗的 测定方法进行测试，测试结果
灵芝多糖 43g/kg。 灵芝锗(以Ge计) 12.5g/kg。
权利要求
1.一种富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于按以下步骤进行a.制备富锗玉米浸泡液；b.在富锗玉米浸泡液中加入碳源、氮源、中量元素、豆油制备培养基并灭菌、冷却；c.在培养基中接种经斜面培养的灵芝液体菌种，培养菌种至生成灵芝菌丝体。
2. 根据权利要求1所述的富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于将c 步骤得到的含有灵芝菌丝体的液态产品过滤，将所得到的灵芝菌丝体在 58 62'C烘干，粉碎成粉末状。
3. 根据权利要求1所述的富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于所述的 a步骤是以有机锗含量为0.5 1.5mg/kg的富锗玉米为原料，用水浸泡、浓縮而 得到有机锗含量为0.4~0.6mg/L的浓縮液。
4. 根据权利要求3所述的富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于所述b 步骤中碳源、氮源、中量元素、豆油的加入量是每100ml培养基含碳源4 5g、 氮源l 2g、中量元素0.05 0.1g、豆油0.1g、富锗玉米浸泡液余量。
5. 根据权利要求3所述的富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于所述b 步骤的灭菌、冷却处理是将培养在12rC灭菌30分钟，冷却至28。C以下。
6. 根据权利要求4或5所述的富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于所 述c步骤是在培养基中加入总体积2~10%的灵芝液体菌种，在25 28'C通气搅 拌培养60~100小时。
7. 根据权利要求6所述的富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于所述碳 源为葡萄糖、蔗糖、饴糖、红薯粉、玉米粉、谷类淀粉中的至少一种。
8. 根据权利要求7所述的富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于所述氮源为酵母粉、黄豆粉、玉米浆、蛋白胨、花生饼粉中的至少一种。
9. 根据权利要求8所述的富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于所述中 量元素是磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠中的至少一种。
全文摘要
本发明公开一种富锗灵芝菌丝体的生产方法，其特征在于按以下步骤进行制备富锗玉米浸泡液；在富锗玉米浸泡液中加入碳源、氮源、中量元素、豆油制备培养基并灭菌、冷却；在培养基中接种经斜面培养的灵芝液体菌种，培养菌种至生成灵芝菌丝体。可将有机锗元素(玉米锗)转化为灵芝锗生物大分子，明显提高了灵芝中有机锗含量，使灵芝在有效发挥灵芝多糖作用的前提下，还可以充分发挥有机锗的作用。
文档编号A01G1/04GK101558720SQ200910011338
公开日2009年10月21日 申请日期2009年4月29日 优先权日2009年4月29日
发明者平 杨, 谭新国 申请人:大连三禾生物有限公司