专利名称：非那吡啶化合物的制作方法
非那吡啶化合物发明背景发明领域本发明涉及共价连接于各种偶联物的非那吡啶化合物。采用这些化合物和组合物提高了(口服)生物利用度同时减少了副作用。相关技术本文引用了各种出版物，纳入它们公开的内容作为参考。然而，本文引用任何参考文献并不构成承认这类文献发表在本申请之前。非那吡啶(phenazopyridine)是一类止痛化合物，其适应症有尿道疼痛、烧伤、 刺激和不适；以及因尿道感染、手术、损伤或器械检查引起的尿频和尿急。非那吡啶虽然是有效的止痛剂，但携带者可预感到有恶心、呕吐副作用，最严重症状通常是胃肠道混乱。为改善非那吡啶的副作用和扩大应用范围，提出了继续开发穿过胃肠道上皮后能形成活性药物的前药化合物，。非那吡啶或2，6-吡啶二胺3-(苯基偶氮基)一氯化物(CAS号94_78_0)是一种偶氮染料，对尿道粘膜有局部止痛或局部麻醉作用，能缓解因感染、创伤、手术、内窥镜检查或使用插管导致下尿道刺激所引起的疼痛、烧灼感、尿急、尿频和其它不适症状。自1925年以来非那吡啶业已投入市场，从1951年以来处于处方药和非处方药(OTC)的双重状态。市售非那吡啶为一片IOOmg和200mg的片剂，商品名有许多=Nefrecil, Phenazodine, Pyridiate, Pyridium, Sedural, Uricalm, Uropyrine, Urodine,禾口 Urogesic0 单剂 OTC 药物包括 Azo-Gesic，Azo-Mandard 和 Uristat (95mg 片剂)，ReAzo (97mg 片剂)， 以及URIRelief和Baridium(97. 2mg片剂)。作为联合处方可购得非那吡啶与硫代异噁唑或磺胺甲氧噁唑(sulfamethoxazole)/三甲氧苄二氨嘧啶的复合制剂，以及非那吡啶加东莨菪胺和仲丁巴比妥的复合制剂。成人常用剂量是餐后100-200mg每天三次不超过两天，儿童剂量是12mg/kg/天， 分成三次餐后服用，不超过两天。非那吡啶止痛作用的药理学机制不清楚。非那吡啶口服后由胃肠道吸收。虽然尚未确定其在人体中的绝对生物利用度，但看来最高达200mg处方剂量时吸收差，血浆最高水平仅为10-20ng/mL。高达65%未改变的非那吡啶经尿液快速排泄，单次剂量M小时内约90%被廓清。代谢产物包括苯胺、N-乙酰基-对-氨基酚(NAPA或醋氨酚)和对-氨基酚。苯胺有助于口服非那吡啶对尿道粘膜的止痛作用。与治疗剂量非那吡啶有关的副作用包括头痛、皮疹瘙痒、胃肠道紊乱(恶心、呕吐和腹泻)、橙色到红色的尿变色以及软性隐形眼镜染色。在肾脏廓清不足病例中，由于药物积累，非那吡啶积可引起皮肤、巩膜或体液变黄。业已报道，在剂量水平过度时常发生正铁血红蛋白血症(Methemaglobenemia)、溶血性贫血、肾和肝毒性。也已报道有过敏样反应。非那吡啶和代谢产物苯胺在红细胞中可使血红蛋白转变为正铁血红蛋白而引起氧化应激反应。葡萄糖-6-磷酸酯脱氢酶缺乏病人倾向发生溶血性贫血。不应将非那吡啶给予肾功能损伤病人。超过推荐剂量可能导致血清水平升高和毒性反应。正铁血红蛋白血症一般发生于急性过量用药之后。考虑到非那吡啶的应用历史长范围广，这类严重毒性报道相对来说不常见。长期0年)给予盐酸非那吡啶可能诱发大鼠大肠腺瘤和腺癌，终生给予可能引起雌性小鼠肝细胞腺瘤和癌。业已证明非那吡啶在细菌中有诱变作用，在哺乳动物细胞中有诱变和染色体断裂作用。在2，214个接受盐酸非那吡啶治疗的病人流行病学研究中，没有观察到最少给药3年期间有任何类型癌症发病的上升。目前的非那吡啶产品标签说“长期给予盐酸非那吡啶会诱发大鼠(大肠)和小鼠(肝)肿瘤。虽然报道盐酸非那吡啶与人肿瘤形成无关，但没有沿着这些线索进行过充分的流行病学研究”。剂量高达大鼠50mg/kg/天或110mg/kg/天和家兔39mg/kg/天的重复研究显示对生育或胚胎发育没有影响。非那吡啶目前归类为妊娠B类药物。也没有对给予非那吡啶的妊娠妇女进行过充分和良好的对照研究。监视研究报告说服用非那吡啶与先天缺陷没有联系。围产期合作专项(The Collaborative Perinatal Project)监测了 50，282 对母亲-孩子，其中1，109对有妊娠期服药记录，219对有妊娠前三个月服药记录。没有发现与服药相关的重大或微小畸形或个体缺陷。监视的229，101名密歇根州医疗补助病人中469名鉴定为妊娠前三个月期间服用了非那吡啶。获得的数据表明该药物与异常无任何相关。据报道，非那吡啶的大鼠急毒性LD50为47ang/kg( 口服)和200(腹膜内给药 (i.p.))；小鼠为180mg/kg(i.p.)。尚没有对非那吡啶进行充分的安全性药理学研究和重复剂量的非临床毒理学研究。发明简述本发明提供共价连接于各种化学分子的非那吡啶及其衍生物或类似物。所述化学分子包括任何能产生前药形式的物质，即能在体内通过正常代谢过程转变成其活性形式的分子。例如，所述的化学分子可以是单个氨基酸、二肽或多肽。所述化学分子可直接或通过接头间接地与非那吡啶连接。连接点通常由非那吡啶上可利用的官能团决定。在一个实施方式中，非那吡啶连接于天然或合成氨基酸的一个氨基酸。在另一个实施方式中，非那吡啶连接于由天然或合成氨基酸的任何组合构成的二肽或三肽，在另一个实施方式中，所述氨基酸选自蛋白酶可消化的L-氨基酸。通过以下描述将会明白本发明的其它目的、优点和实施方式并可实施本发明。附图的简要说明
图1显示了大鼠口服非那吡啶偶联物后各种非那吡啶-氨基酸偶联物的血浆浓度。显示给予PAP · HC1、甘氨酰-PAP、丙氨酰-PAP、甲硫氨酰-PAP、组氨酰-PAP、色氨酰-PAP、缬氨酰-PAP和赖氨酰-PAP后，非那吡啶(PAP)血浆浓度与时间的曲线。图2是2-氨基-6-氨基乙酰氨基-3-E-非那吡啶二氢氯化物(盐酸盐)的说明。图3显示雄性大鼠的1)盐酸非那吡啶(2.8mg/kg，含2.5mg/kg非那吡啶碱) 释放的非那吡啶，2)Gly-PAP(^ig/kg，含2. 5mg/kg非那吡啶碱)释放的非那吡啶，和3) Gly-PAP(^ig/kg，含2. 5mg/kg非那吡啶碱)释放的Gly-PAP完整前药的平均血浆浓度曲线。图4显示雄性大鼠的1)盐酸非那吡啶0.8mg/kg，含2.5mg/kg非那吡啶碱)释放的非那吡啶和2) Gly-PAP (0. 9mg/kg，含0. 6mg/kg非那吡啶碱)释放的非那吡啶平均血浆浓
度曲线。图5表格，显示Gly-PAP游离碱和盐酸盐的室温溶解度。图6表格，显示Gly-PAP盐的水溶解度和大鼠生物利用度。图7表格，显示用UV-HPLC研究Gly-PAP的稳定性所得结果。图8表格，显示用UV-HPLC研究0. 2mg/mlGly-PAP-HCl在4°C水中的稳定性结果。图9表格，显示用UV-HPLC研究8. 8mg/mlGly-PAP-HCl在4°C水中的稳定性结果。
图10表格，显示用UV-HPLC研究Gly-PAP-HCl水溶液室温稳定性的结果。
图11表格，是雄性大鼠口服给予Gly-PAP或盐酸非那吡啶后非那吡啶药代动力学的小结。
图12表格，是雄性大鼠口服给予Gly-PAP后Gly-PAP后的药代动力学小结。
图13显示雄狗的1)盐酸非那吡啶(5. 9mg/kg，含5mg/kg非那吡啶碱)释放的非那吡啶，2) Gly-PAP (8. lmg/kg，含5mg/kg非那吡啶碱)释放的非那吡啶，和3) Gly-PAP (8. Img/ kg，含5mg/kg非那吡啶碱释放的Gly-PAP完整前药的平均血浆浓度曲线。
图14表格，是雄狗一次口服Gly-PAP (组1)或PAP HCl (组2)后收集得到的血浆药代动力学参数小结。
图15表格，是雄狗一次口服Gly-PAP (组1)或PAP HCl (组2)后尿液Gly-PAP和 PAP HCl浓度小结。
图16是合成2-氨基-6-氨基乙酰氨基-3-E-非那吡啶二氢氯化物产品的流程图。
图17表格，显示大鼠口服Gly-PAP盐后的生物利用度。
图18表格，显示胃肠道副作用呕吐减少。发明详述本申请中所用的“肽”包括单个氨基酸、二肽、三肽、寡肽、多肽或载体肽。寡肽指包含2-70个氨基酸的肽。此外，就示范性的具体实施方式
而言，本发明有时将连接于一个氨基酸、二肽、三肽、寡肽、多肽或载体肽的活性药物称为活性偶联药物。本文阐述了这种偶联药物的优选长度和其它优选实施方式。本文所用的“组合物”泛指含有所述分子偶联物的任何组合物。这种组合物包括无水制剂、水溶液或无菌组合物。包含本文所述分子的组合物可以冻干形式贮存，可与稳定剂例如碳水化合物混合。使用时，可将该组合物配制成含有盐(如NaCl)、洗涤剂(如十二烷基硫酸钠(SDS))和其它组分的水溶液。〃非那吡啶〃指
权利要求
1. 一种式I化合物其中，R1和&独立地是(a)氢；
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是氨基酸残基，R2是氢。
3.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是(L-)氨基酸残基，R2是氢。
4.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，所述氨基酸残基选自丙氨酸、精氨酸、天门冬氨酰胺、天门冬氨酸、胱氨酸、甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、色氨酸、苏氨酸、酪氨酸和缬氨酸残基。
5.如权利要求3所述的化合物，其特征在于，所述(L-)氨基酸残基选自丙氨酸、精氨酸、天门冬氨酰胺、天门冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、色氨酸、苏氨酸、酪氨酸和缬氨酸残基。
6.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是甘氨酸的氨基酸残基，R2是氢。
7.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是赖氨酸的氨基酸残基，R2是氢。
8.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是丙氨酸的氨基酸残基，R2是氢。
9.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是c)，民选自乙基、苄基、异丁基、十二烷基、乙基己基、三氯乙基和正丁基，R2是氢。
10.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是氨基酸残基，R1是氢。
11.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是(L-)氨基酸残基，R1是氢。
12.如权利要求10所述的化合物，其特征在于，所述氨基酸残基选自丙氨酸、精氨酸、 天门冬氨酰胺、天门冬氨酸、胱氨酸、甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、 赖氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、色氨酸、苏氨酸、酪氨酸和缬氨酸残基。
13.如权利要求11所述的化合物，其特征在于，所述(L-)氨基酸残基选自丙氨酸、精氨酸、天门冬氨酰胺、天门冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、色氨酸、苏氨酸、酪氨酸和缬氨酸残基。
14.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是甘氨酸的氨基酸残基，R1是氢。
15.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是赖氨酸的氨基酸残基，R1是氢。
16.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是丙氨酸的氨基酸残基，R1是氢。
17.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，&是(c)，R3选自乙基、苄基、异丁基、 十二烷基、乙基己基、三氯乙基和正丁基，R2是氢。
18.—种药物组合物，它包含治疗有效量的权利要求1所述的化合物。
19.如权利要求18所述的药物组合物，其特征在于，所述化合物的治疗有效量比非偶联非那吡啶治疗有效量低50%。
20.一种治疗个体的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。
21.如权利要求20所述的方法，其特征在于，所述化合物的治疗有效量比非偶联非那吡啶治疗有效量低50%。
22.如权利要求20所述的方法，其特征在于，该方法可治疗尿道疼痛、烧伤、刺激、不适；或因尿道感染、手术、损伤或器械检查引起的尿频和尿急。
23.如权利要求20所述的方法，其特征在于，给予所述化合物的副作用严重程序比给予非偶联非那吡啶的副作用低。
全文摘要
本发明涉及式I所示的取代的非那吡啶类化合物。本发明也涉及以下发现，即式I化合物的生物利用度比非偶联非那吡啶提高。
文档编号A01N43/04GK102256486SQ200980151914
公开日2011年11月23日 申请日期2009年12月21日 优先权日2008年12月19日
发明者G·博纳维尔, N·E·法赫米, S·D·罗伊, S·赫克特 申请人:巅峰医药品股份有限公司