专利名称：一种含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法
技术领域：
本发明涉及畜禽饲料领域，尤其涉及一种含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法。
背景技术：
奶牛隐性乳房炎是一种常见的、复杂的、可以造成奶牛业严重损失的严重疾病，不仅严重影响乳牛的利用年限、产乳数量和乳品质量，而且有害于食品卫生和人类健康。长期以来，养牛户大多采用向奶牛长期喂食抗生素的方式来预防奶牛隐性乳房炎。抗生素具有杀灭细菌和抑制致病微生物的作用，因此这种喂养方式在实际生产中起到了一定的预防奶牛隐性乳房炎的效果。但是，这些抗生素会随着人们食用牛奶以及各种牛奶制品进入人体，这就间接导致了抗生素的滥用，有可能引发多种药源性疾病，甚至会产生新的“超级耐药菌”，因而这种喂养方式严重威胁着人类的生命健康。为了避免或减少在奶牛喂养过程中长期使用抗生素，奶牛用微生态饲料添加剂应运而生。所谓奶牛用微生态饲料添加剂是将对奶牛有益无害的活性益生菌经过特殊工艺制成的活性益生菌制剂。奶牛用微生态饲料添加剂作为一种功能性牛饲料添加辅料，实现了在无毒副作用、无耐药性、无病原性的前提下预防奶牛隐性乳房炎，不仅可以调节奶牛肠道微生态平衡、提高奶牛生长率、提高饲料利用率、而且可以抑制肠道有害微生物的繁殖、提高奶牛健康水平、增强奶牛免疫力。目前，在现有的奶牛养殖中，常见的奶牛用微生态饲料添加剂的种类有乳酸菌制剂(包括嗜酸乳酸菌、双歧乳杆菌、粪链球菌等)、芽孢杆菌制剂 (包括枯草杆菌、蜡样芽孢杆菌、地衣杆菌等)、真菌制剂(包括米曲霉菌等)、酵母菌制剂 (包括啤酒酵母等)等近百种。在现有的牛用微生态饲料添加剂生产过程中，大多仅使用蛋白质类物质和/或糖类物质作为活性益生菌的培养基，虽然菌株数量上可以满足需求，但大多数菌株的活性不高，在肠道中的定植性能较弱，因此活性益生菌作为奶牛饲料所应发挥的作用受到很大的限制；同时，活性益生菌仅能在一定程度上增强奶牛的体质，其治疗和预防奶牛隐性乳房炎的效果并不十分明显，因此，现有的奶牛微生态饲料添加剂并不能完全取代抗生素的使用。
发明内容
本发明实施例提供了一种含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法，以便于大幅提高奶牛饲料添加剂中活性益生菌的菌株活性和在肠道中的定植性能，并且使制得的奶牛饲料添加剂富含中药成分，还能使中药成分中起到药理作用的活性成分充分发挥， 从而提高奶牛饲料添加剂的强体治病性能和促生长性能，有效治疗和预防奶牛隐性乳房炎，进而完全取代抗生素的使用。本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法，包括步骤A 选取相等菌株数量的多种奶牛用活性益生菌的原菌株，并分别对每种奶牛用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种奶牛用活性益生菌的一级种子液；其中，所述的多种奶牛用活性益生菌包括枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、啤酒酵母、产朊假丝酵母、黑曲霉、米根霉、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌中的至少两种；步骤B 将相等重量的每种奶牛用活性益生菌的一级种子液进行混合，从而获得多菌种混合一级种子液；步骤C 将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养， 从而获得多菌种混合二级种子液；步骤D 将多菌种混合二级种子液接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵， 从而获得多菌种混合中药发酵液；其中，所述的中药液体培养基包括5 % 8 %的红糖、2 % 3 %的中药组分、 0. 2% 0. 3%的磷酸二氢钾、0. 3% 0. 5%的酵母膏和余量的水；所述的中药组分由黄芪、党参、蒲公英、黄芩、川穹、王不留行、路路通、柴胡、当归、益母草、昆布和甘草组成，其各成分占中药组分总量的重量份数为黄芪60 80份，党参60 80份，蒲公英60 80份，黄芩40 60份，川穹10 20份，王不留行40 60份，路路通40 60份，柴胡50 80份，当归40 60份，益母草50 80份，昆布80-120份，甘草30 50份步骤E 将多菌种混合中药发酵液与等重量的玉米芯粉混合制成固态发酵种子；步骤F:将固态发酵种子接种到中药固体培养基中进行二次中药发酵，从而制得含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂。由上述本发明提供的技术方案可以看出，本发明实施例提供的含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法采用多味中药来培养对奶牛生长和抗病能力有良好促进作用的活性益生菌，从而使中药中的活性成分充分发挥药理作用，并且使所培养出的活性益生菌的活性远高于普通培养基培养出的活性益生菌，同时还增强了活性益生菌在肠道中的定植能力；由于中药和活性益生菌对免疫系统有协同作用，因此将以中药繁殖出的活性益生菌作为奶牛用饲料添加剂，可以大大增强奶牛的免疫能力。我们通过将现代微生态学原理同中医相结合，用中药组分培养活性益生菌，从而生产出一种完全取代抗生素的无药残、 防病促生长、成本低廉的奶牛用饲料添加剂。
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域的普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动行的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。图1为本发明实施例所提供的含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法的流程示意图。
具体实施方式
下面面结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。首先，需要说明的是，本申请文件中所称的份均是指重量份，下面对本发明实施例所提供的含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法作一详细描述。如图1所示，一种含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法，具体可以包括以下步骤步骤A 选取相等菌株数量的多种奶牛用活性益生菌的原菌株，并分别对每种奶牛用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种奶牛用活性益生菌的一级种子液；其中，所述的多种奶牛用活性益生菌包括枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、啤酒酵母、产朊假丝酵母、黑曲霉、米根霉、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌中的至少两种；具体地，相应的选取相等菌株数量的多种奶牛用活性益生菌的原菌株，并分别对每种奶牛用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种奶牛用活性益生菌的一级种子液可以包括(1)将分离提纯后的枯草芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到枯草芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养M小时，从而获得枯草芽孢杆菌的一级种子液；枯草芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水；其中， 该培养基的PH值应当在7. 0 7. 2的范围内才能进行接种，以保证菌株活性和菌株生存状态不会遭到破坏。需要说明的是，枯草芽孢杆菌的接种比例为每500mL的枯草芽孢杆菌培养基中接种IOOmL的枯草芽孢杆菌。和/ 或，(2)将分离提纯后的纳豆芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到纳豆芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养M小时，从而获得纳豆芽孢杆菌的一级种子液；纳豆芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水；该培养基的PH值应当在7. 0 7. 2的范围内才能进行接种，以保证菌株活性和菌株生存状态不会遭到破坏。需要说明的是，纳豆芽孢杆菌的接种比例为每500mL的纳豆芽孢杆菌培养基中接种IOOmL的纳豆芽孢杆菌。和/ 或，(3)将分离提纯后的地衣芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到地衣芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养M小时，从而获得地衣芽孢杆菌的一级种子液；地衣芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水；该培养基的PH值应当在7. 0 7. 2的范围内才能进行接种，以保证菌株活性和菌株生存状态不会遭到破坏。需要说明的是，地衣芽孢杆菌的接种比例为每500mL的地衣芽孢杆菌培养基中接种IOOmL的地衣芽孢杆菌。和/ 或，(4)将分离提纯后的啤酒酵母的原菌株种子斜面接种到啤酒酵母培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得啤酒酵母的一级种子液；啤酒酵母培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1. 5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水。需要说明的是，啤酒酵母的接种比例为每500mL的啤酒酵母培养基中接种IOOmL的啤酒酵母。和/ 或，(5)将分离提纯后的产朊假丝酵母的原菌株种子斜面接种到产朊假丝酵母培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得产朊假丝酵母的一级种子液；产朊假丝酵母培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1. 5份的硫酸镁、20份的琼脂和 1000份的水。需要说明的是，产朊假丝酵母的接种比例为每500mL的产朊假丝酵母培养基中接种IOOmL的产朊假丝酵母。和/ 或，(6)将分离提纯后的黑曲霉的原菌株种子斜面接种到黑曲霉培养基的三角瓶中， 并振荡培养48小时，从而获得黑曲霉的一级种子液；黑曲霉培养基包括200份的土豆、20 份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1. 5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水。需要说明的是， 黑曲霉的接种比例为每500mL的黑曲霉培养基中接种IOOmL的黑曲霉。和/ 或，(7)将分离提纯后的米根霉的原菌株种子斜面接种到米根霉培养基的三角瓶中， 并振荡培养48小时，从而获得米根霉的一级种子液；米根霉培养基包括200份的土豆、20 份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1. 5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水。需要说明的是， 米根霉的接种比例为每500mL的米根霉培养基中接种IOOmL的米根霉。禾口/ 或，(8)将分离提纯后的干酪乳杆菌的原菌株种子斜面接种到干酪乳杆菌培养基的克氏瓶中，并在37°C下培养48小时，从而获得干酪乳杆菌的一级种子液；干酪乳杆菌培养基包括20份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0. 2份的七水硫酸镁、0. 25份的四水硫酸锰、1份的吐温80(吐温80的分子式是C. 64. H. 124 . 0. 26.，英文名称是P0LYS0RBATE 80，中文同义词是聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯或乳化剂T80，易溶于水、乙醇、甲醇和醋酸乙酯，主要用于做注射液及口服液的增溶剂或乳化剂，胶囊剂的分散剂，软膏剂的乳化剂和基质，栓剂的基质或是食品工业中的乳化剂)和1000份的水；该培养基的PH值应当在6. 2 6. 4的范围内才能进行接种，从而保证菌株能够具有较大的活性，并且保证菌株存活状态不会遭到破坏。需要说明的是，干酪乳杆菌的接种比例为每500mL的干酪乳杆菌培养基中接种IOOmL的干酪乳杆菌。和/ 或，(9)将分离提纯后的嗜酸乳杆菌的原菌株种子斜面接种到嗜酸乳杆菌培养基的克氏瓶中，并在37°C下培养48小时，从而获得嗜酸乳杆菌的一级种子液；嗜酸乳杆菌培养基包括20份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0. 2份的七水硫酸镁、0. 25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和 1000份的水；该培养基的PH值应当在6. 2 6. 4的范围内才能进行接种，从而保证菌株能够具有较大的活性，并且保证菌株存活状态不会遭到破坏。需要说明的是，嗜酸乳杆菌的接种比例为每500mL的嗜酸乳杆菌培养基中接种IOOmL的嗜酸乳杆菌。禾口/ 或，
(10)将分离提纯后的双歧杆菌的原菌株种子斜面接种到双歧杆菌培养基的克氏瓶中，并在37°C下培养48小时，从而获得双歧杆菌的一级种子液；双歧杆菌培养基包括20 份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0. 2份的七水硫酸镁、0. 25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和1000份的水；该培养基的PH值应当在6. 2 6. 4的范围内才能进行接种，从而保证菌株能够具有较大的活性，并且保证菌株存活状态不会遭到破坏。需要说明的是，双歧杆菌的接种比例为每 500mL的双歧杆菌培养基中接种IOOmL的双歧杆菌。步骤B 将相等重量的每种奶牛用活性益生菌的一级种子液进行混合，从而获得多菌种混合一级种子液；具体地，在实际应用中，最好从步骤A所述的10种奶牛用活性益生菌的一级种子液中均选取出相同重量一级种子液，然后进行混合，从而使最终制得的奶牛饲料添加剂兼具有这10种益生菌。步骤C 将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养， 从而获得多菌种混合二级种子液；其中，相应的种子罐培养基包括3 % 8 %的红糖、0. 2 % 0. 5 %的磷酸二氢钾、 0. 3% 0. 5%的酵母膏、0. 2% 0. 5%的蛋白胨和余量的水，此处描述的种子罐培养基的各组分含量均为质量百分数；具体地，在实际生产使用中，为了综合制作成本和使用性能等多方面因素，该种子罐培养基的各成分占总的质量比可选用如下表1中的方案，其中该表中的实施例一为最优选方案表1:
实施例红糖磷酸二氢钾酵母膏蛋白胨水实施例一8%0. 22%0. 5%0. 3%余量实施例二6%0. 2%0.4%0. 4%余量实施例三7%0. 250. 4%0. 4%余量实施例四5%0. 3%0. 5%0. 2%余量进一步地，相应的将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，从而获得多菌种混合二级种子液可以包括以下步骤步骤Cl 制备种子罐培养基；步骤C2 在115°C 121°C下对种子罐培养基灭菌25分钟，再冷却至30°C ；具体地，在实际应用中，最好选用在121°C下对种子罐培养基灭菌25分钟，以保证种子罐培养基中的有害菌能完全被杀灭。步骤C3 将多菌种混合一级种子液按照3% 5%的接种比例接种到种子罐培养基中(此处的按照3% 5%的接种比例是指每100个单位体积的种子罐培养基中接种3至5个单位体积的多菌种混合一级种子液)；步骤C4 对接种完的种子罐培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min， 发酵温度为32°C，直至种子罐培养基中的PH值达到4. 8时发酵完成，即获得多菌种混合二级种子液。一般情况下，种子罐培养基的厌氧发酵一般可以在48 72小时内完成，发酵完成后，活性益生菌的数目可以达到每毫升15亿株。步骤D 将多菌种混合二级种子液接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵， 从而获得多菌种混合中药发酵液；其中，所述的中药液体培养基包括5 % 8 %的红糖、2 % 3 %的中药组分、 0. 2% 0. 3%的磷酸二氢钾、0. 3% 0. 5%的酵母膏和余量的水，此处描述的中药液体培养基的各组分含量均为质量百分数；所述的中药组分由黄芪、党参、蒲公英、黄芩、川穹、王不留行、路路通、柴胡、当归、益母草、昆布和甘草组成，其各成分占中药组分总量的重量份数为黄芪60 80份，党参60 80份，蒲公英60 80份，黄芩40 60份，川穹10 20份，王不留行40 60份，路路通40 60份，柴胡50 80份，当归40 60份，益母草50 80份，昆布80-120份，甘草30 50份。具体地，在实际生产使用中，为了综合制作成本和使用性能等多方面因素，该中药液体培养基的各成分占总的质量比可选用如下表2中的优选方案，其中该表中的实施例1 为最优选实施方案表 2
权利要求
1.一种含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法，其特征在于，包括步骤A 选取相等菌株数量的多种奶牛用活性益生菌的原菌株，并分别对每种奶牛用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种奶牛用活性益生菌的一级种子液；其中，所述的多种奶牛用活性益生菌包括枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、啤酒酵母、产朊假丝酵母、黑曲霉、米根霉、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌中的至少两种；步骤B 将相等重量的每种奶牛用活性益生菌的一级种子液进行混合，从而获得多菌种混合一级种子液；步骤C 将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，从而获得多菌种混合二级种子液；步骤D 将多菌种混合二级种子液接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵，从而获得多菌种混合中药发酵液；其中，所述的中药液体培养基包括5 % 8 %的红糖、2 % 3 %的中药组分、0. 2 % 0. 3%的磷酸二氢钾、0. 3% 0. 5%的酵母膏和余量的水；所述的中药组分由黄芪、党参、 蒲公英、黄芩、川穹、王不留行、路路通、柴胡、当归、益母草、昆布和甘草组成，其各成分占中药组分总量的重量份数为黄芪60 80份，党参60 80份，蒲公英60 80份，黄芩40 60份， 川穹10 20份，王不留行40 60份，路路通40 60份，柴胡50 80份， 当归40 60份，益母草50 80份，昆布80-120份，甘草30 50份； 步骤E 将多菌种混合中药发酵液与等重量的玉米芯粉混合制成固态发酵种子； 步骤F:将固态发酵种子接种到中药固体培养基中进行二次中药发酵，从而制得含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂。
2.根据权利要求1所述的含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法，其特征在于，所述的选取相等菌株数量的多种奶牛用活性益生菌的原菌株，并分别对每种奶牛用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养，从而获得每种奶牛用活性益生菌的一级种子液包括将分离提纯后的枯草芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到枯草芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养M小时，从而获得枯草芽孢杆菌的一级种子液；枯草芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水； 和/或，将分离提纯后的纳豆芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到纳豆芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养M小时，从而获得纳豆芽孢杆菌的一级种子液；纳豆芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水； 和/或，将分离提纯后的地衣芽孢杆菌的原菌株种子斜面接种到地衣芽孢杆菌培养基的三角瓶中，并振荡培养M小时，从而获得地衣芽孢杆菌的一级种子液；地衣芽孢杆菌培养基包括3份的牛肉膏、10份的蛋白胨、5份的氯化钠、20份的琼脂和1000份的水； 和/或，将分离提纯后的啤酒酵母的原菌株种子斜面接种到啤酒酵母培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得啤酒酵母的一级种子液；啤酒酵母培养基包括200份的土豆、20 份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1. 5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水；和/或，将分离提纯后的产朊假丝酵母的原菌株种子斜面接种到产朊假丝酵母培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得产朊假丝酵母的一级种子液；产朊假丝酵母培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、3份的磷酸二氢钾、1. 5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水；和/或，将分离提纯后的黑曲霉的原菌株种子斜面接种到黑曲霉培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得黑曲霉的一级种子液；黑曲霉培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、 3份的磷酸二氢钾、1. 5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水；和/或，将分离提纯后的米根霉的原菌株种子斜面接种到米根霉培养基的三角瓶中，并振荡培养48小时，从而获得米根霉的一级种子液；米根霉培养基包括200份的土豆、20份的蔗糖、 3份的磷酸二氢钾、1. 5份的硫酸镁、20份的琼脂和1000份的水；和/或，将分离提纯后的干酪乳杆菌的原菌株种子斜面接种到干酪乳杆菌培养基的克氏瓶中， 并在37°C下培养48小时，从而获得干酪乳杆菌的一级种子液；干酪乳杆菌培养基包括20 份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0. 2份的七水硫酸镁、0. 25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和1000份的水；和/或，将分离提纯后的嗜酸乳杆菌的原菌株种子斜面接种到嗜酸乳杆菌培养基的克氏瓶中， 并在37°C下培养48小时，从而获得嗜酸乳杆菌的一级种子液；嗜酸乳杆菌培养基包括20 份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0. 2份的七水硫酸镁、0. 25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和1000份的水；和/或，将分离提纯后的双歧杆菌的原菌株种子斜面接种到双歧杆菌培养基的克氏瓶中，并在 37°C下培养48小时，从而获得双歧杆菌的一级种子液；双歧杆菌培养基包括20份的葡萄糖、10份的蛋白胨、10份的牛肉膏、5份的酵母膏、5份的柠檬酸钠、2份的磷酸二氢钠、5份的乙酸钠、0. 2份的七水硫酸镁、0. 25份的四水硫酸锰、1份的吐温80和1000份的水。
3.根据权利要求1和2所述的含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法，其特征在于，所述的将多菌种混合一级种子液接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，从而获得多菌种混合二级种子液包括以下步骤步骤Cl 制备种子罐培养基；其中，所述的种子罐培养基包括3 % 8 %的红糖、0. 2 % 0. 5 %的磷酸二氢钾、 0. 3% 0. 5%的酵母膏、0. 2% 0. 5%的蛋白胨和余量的水；步骤C2 在115°C 121°C下对种子罐培养基灭菌25分钟，再冷却至30°C ；步骤C3 将多菌种混合一级种子液按照3% 5%的接种比例接种到种子罐培养基中；步骤C4 对接种完的种子罐培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min，发酵温度为32°C，直至种子罐培养基中的PH值达到4. 8时发酵完成，即获得多菌种混合二级种子液。
4.根据权利要求1或2所述的含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法，其特征在于，所述的将多菌种混合二级种子液接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵，从而获得多菌种混合中药发酵液包括以下步骤步骤Dl 制备中药液体培养基；步骤D2 在115°C 121°C下对中药液体培养基灭菌20分钟，再冷却至30°C ； 步骤D3 将多菌种混合二级种子液按照5% 10%的接种比例接种到中药液体培养基中；步骤D4 对接种完的中药液体培养基进行厌氧发酵，发酵装置的转速为180r/min，发酵温度为32°C，直至中药液体培养基中的PH值达到5. 0时发酵完成，即获得多菌种混合中药发酵液。
5.根据权利要求1或2所述的含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法，其特征在于，所述的将固态发酵种子接种到中药固体培养基中进行二次中药发酵，从而制得含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂包括以下步骤步骤Fl 制备中药固体培养基；其中，所述的中药固体培养基由60 70份的麦麸，15 20份豆粕，10 15份的玉米粉，2 3份的红糖，2 3份的中药组分，2 4份的轻质碳酸钙，0. 5 0. 8份的酵母膏， 1 2份的海带，0. 2 0. 5份的黄腐酸组成；所述的中药组分包括黄芪、党参、蒲公英、黄芩、川穹、王不留行、路路通、柴胡、当归、益母草、昆布和甘草，其各成分占中药组分总量的重量份数为黄芪60 80份，党参60 80份，蒲公英60 80份，黄芩40 60份， 川穹10 20份，王不留行40 60份，路路通40 60份，柴胡50 80份， 当归40 60份，益母草50 80份，昆布80-120份，甘草30 50份； 步骤F2 在115°C 121°C下对中药固体培养基灭菌20分钟，再冷却至30°C ； 步骤F3 将固态发酵种子液按照20% 30%的接种比例接种到中药固体培养基中； 步骤F4 将接种完的中药固体培养基置于37°C下进行密封发酵，当中药固体培养基的温度达到40°C时将中药固体培养基进行翻转；持续发酵，直至中药固体培养基的温度不再上升时发酵完成，即获得含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂。
全文摘要
本发明公开了一种含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法，包括分别对奶牛用活性益生菌的原菌株进行单菌种菌株数量扩充培养；将相等重量的每种奶牛用活性益生菌的一级种子液进行混合，并接种到种子罐培养基中进行多菌种混合培养，然后接种到中药液体培养基中进行首次中药发酵；将多菌种混合中药发酵液与等体积的玉米芯粉混合制成固态发酵种子，再接种到中药固体培养基中进行二次中药发酵。本发明实施例的实施能够大幅提高奶牛饲料添加剂中活性益生菌的菌株活性和在肠道中的定植性能，并且使制得的奶牛饲料添加剂富含中药成分，还能使中药成分中起到药理作用的活性成分充分发挥，从而提高奶牛饲料添加剂的强体治病性能和促生长性能，进而完全取代抗生素的使用。
文档编号A23K1/16GK102366023SQ201110276378
公开日2012年3月7日 申请日期2011年9月16日 优先权日2011年9月16日
发明者李羽, 汪松林 申请人:汪松林