专利名称：脆弱拟杆菌在制备治疗腹泻组合物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及脆弱拟杆菌的用途，具体涉及将脆弱拟杆菌用于制备一种载体和加入食品或药物中来治疗腹泻，属于脆弱拟杆菌的微生物应用技术领域。
背景技术：
腹泻是大肠疾病最常见的症状，主要分为急性腹泻和慢性腹泻，急性腹泻病发时期为广2个星期，而慢性腹泻则在2个月以上，常见的引起腹泻的原因有细菌感染、病毒感染、寄生虫、药物反应、肠道疾病、着凉、饮食等，导致不同程度的腹湾，有时伴有腹痛、恶心、呕吐等症状。目前治疗腹泻的主要办法是口服补液、纠正水电解质紊乱、口服蒙脱石散及抗微生物治疗等。在最近几十年内，益生菌作为治疗胃肠疾病的安全及可利用形式已受到极大关注。在益生菌中是被广泛关注的双歧杆菌和乳酸菌在摄入后对人和动物具有很好作用的菌株，它们的特定菌株能够在肠粘膜上定居，在肠道内建群并且防止有害微生物在其上粘附，是能通过保持肠内自然微生物区系促进生物个体健康的可生长的微生物制剂，帮助维持人和动物的健康。文件CN1350460A公开了一种能够预防腹泻的乳酸菌菌株；文件CN1420781A公开了一种能够预防腹泻的双歧杆菌。脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)作为一种革兰氏染色阴性、杆状、两端钝圆而浓染，有荚膜、无芽胞、无动力的专性厌氧细菌，分产肠毒素型和非产肠毒素型。脆弱拟杆菌作为人及动物肠道正常菌群的一部分，主要存于结肠中，此外，呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道粘膜也可定植生长。研究较多的是脆弱拟杆菌作为一种条件致病菌，当宿主粘膜受损时，可侵犯粘膜下层，引起感染，也可经血液流动，引起身体其它器官如肠道、腹腔、肝、肺、脑组织化脓性感染并伴发脓肿和引起急慢性腹泻等。此外，其对结肠、直肠癌的发生也有促进作用。但是，1991年张季阶发表了《一种无毒脆弱拟杆菌的分离鉴定》，报导了关于1983年9月从一个发育良好的婴儿粪便中分离出量大而又较纯的细菌，经以系列的鉴定、基础试验和临床应用观察，属于脆弱拟杆菌群中的一株无毒菌，是人体的益生菌，定名为BF839菌株。本发明是将脆弱拟杆菌应用于制备治疗腹泻的药物中，效果好，成本低。
发明内容
本发明的目的是提供一种新型微生物脆弱拟杆菌在制备治疗腹泻药物中的应用。为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案是:
脆弱拟杆菌在制备治疗腹泻组合物中的应用。所述的用途指可以应用于制备一种载体，也可以用于制备含有这种微生物的食物或药品的组合物。所述的脆弱拟杆菌在载体中的含量为KTio1tlCfi /mL。
所述的载体是选自奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、奶基发酵产品、冰激凌、发酵谷类产品、奶粉、婴儿食品或宠物食品的食物组合物。所述的食品或药品组合物至少含有能治疗腹泻的脆弱拟杆菌菌株。上述的组合物选自奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、奶基发酵产品、冰激凌、发酵谷类产品、奶粉、婴儿食品或宠物食品、片剂、液体细菌悬浮液、干口服补充剂、湿口服补充剂、干管饲或湿管饲。上述的组合物为片剂、液体细菌悬浮液、干口服补充剂、湿口服补充剂、干管饲或湿管饲的形式。本发明的有益效果是:实验证明脆弱拟杆菌对于治疗腹泻具有很好的效果。
具体实施方式
:
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。实施例1
(O由婴儿粪便中分离脆弱拟杆菌
按“正常菌群检查法”称取0.5克大便，置于先装有4.5ml生理盐水的试管中，以此连续稀释成10_卜10_6，由高稀积度向低稀积度滴到Bd培养基平板上，置于厌氧产气盒中加厌氧产气袋进行厌氧培养。置37°C，2 7天后开罐检查。选单一菌落进行纯培养、染色镜检、培养特性、生理生化检测。(2)脆弱拟杆菌的增菌培养及菌液制备
选取纯化后的单个菌落接种于改良的胰蛋白胨肉汤中进行增菌，所得菌液离心沉淀，转速3000r/min,离心15min,去上清沉淀用生理盐水洗漆,沉淀物用生理盐水稀释,用麦氏比池管做菌数测定，稀释至IO8 cfi /ml, IO9 cfi /ml, IO10 cfi /ml。实施例2 脆弱拟杆菌毒力实验 (O小鼠急性毒力实验
取体重22±2克C57BR/C小鼠(雌雄各半)60只分成高剂量组、低剂量组和对照组，各组20只。高剂量组每只每天灌胃IO12 cfi /ml菌液0.5ml，低剂量组每天灌胃IO9 cfi /ml菌液0.5ml，对照组每天灌胃0.5ml生理盐水。观察14天。实验结果:小鼠正常生长，未见死亡，LD50测不出。(2)大鼠毒力实验
取150±20克SD大鼠30只(雌雄各半)。分为3组:高低剂量组和对照组。高剂量组每只每天灌胃1012cfi/ml菌液2ml,低剂量组每天灌胃109cfi/ml菌液2ml,对照组每天灌胃2ml生理盐水。连续观察14天，14天后抽静脉血测血象、肝肾功。取胃肠肝脾组织做病理切片电镜观察。实验结果:均未见明显异常。(3)恒河猴毒力实验:取恒河猴10只(雌雄各半)。分为2组:高低剂量组和对照组。高剂量组每只每天口服IO12Cf i/ml菌液100ml，低剂量组每天口服109cfi/ml菌液100ml。连续观察60天。14天、30天、45天、60天后抽静脉血测血象、肝肾功，测心电图。取胃肠肝脾组织做病理切片电镜观察。
实验结果:均未见明显异常。实施例3
脆弱拟杆菌对于腹泻的治疗作用
(1)造模前动物禁食给水，随后用氨苄青霉素钠(加生理氯化钠溶液配制)0.2g灌胃，每只0.5ml Bid,引起小鼠腹泻，排水样或糊状便。将腹泻小鼠分别用IO8 cfi /ml, 1O9 cfi /ml, IO10 cfi /ml的菌液灌胃，每次
0.5ml Bid，空白对照组给等体积的生理盐水灌胃，Bid (每组各20只)。
权利要求
1.弱拟杆囷在制备防治腹 与组合物中的应用，其特征在于:脆弱拟杆囷在制备治疗腹泻组合物中的应用。
2.根据权利要求1所述的脆弱拟杆菌在制备防治腹泻组合物中的应用，其特征在于，所述的用途指可以应用于制备一种载体，也可以用于制备含有这种微生物的食物或药品的组合物。
3.根据权利要求1所述的脆弱拟杆菌在制备治疗腹泻组合物中的应用，其特征在于，所述的脆弱拟杆菌在载体中的含量为IO8IOltlCfi /mL。
4.根据权利要求2所述脆弱拟杆菌在制备防治腹泻组合物中的应用，其特征在于:所述的载体是选自奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、奶基发酵产品、冰激凌、发酵谷类产品、奶粉、婴J L食品或宠物食品的食物组合物。
5.有脆弱拟杆菌食品或药品组合物，其特征在于:所述的食品或药品组合物至少含有能治疗腹泻的脆弱拟杆 菌菌株。
6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于:所述的组合物选自奶粉、干酪、凝乳、酸奶酪、奶基发酵产品、冰激凌、发酵谷类产品、奶粉、婴儿食品或宠物食品、片剂、液体细菌悬浮液、干口服补充剂、湿口服补充剂、干管饲或湿管饲。
7.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于:所述的组合物为片剂、液体细菌悬浮液、干口服补充剂、湿口服补充剂、干管饲或湿管饲的形式。
全文摘要
本发明涉及脆弱拟杆菌在制备治疗腹泻组合物中的应用，该应用可以用于制备一种载体，也可以用于制备含有这种微生物的食物或药品的组合物，实验证明脆弱拟杆菌对于腹泻具有很好的治疗作用。
文档编号A23K1/18GK103082294SQ20131002094
公开日2013年5月8日 申请日期2013年1月21日 优先权日2013年1月21日
发明者智发朝, 白杨, 刘洋洋 申请人:广州知光生物科技有限公司