马铃薯脱毒瓶苗培养基及其制备方法
【专利摘要】本发明具体涉及一种新型马铃薯脱毒瓶苗培养基，属于组织培养材料【技术领域】；所要解决的技术问题是提供一种用于瓶培马铃薯脱毒苗的培养基；马铃薯脱毒瓶苗培养基，以1L培养基计算含有：磷酸二氢钾320-365mg，硫酸铵1500-1850mg，硝酸钙800-1100mg，硫酸镁4500-5000mg，硝酸钾1000-1080mg，硝酸铵150-300mg，碘化钾0.6-0.75mg，硫酸锌8-9mg，硫酸亚铁3-7mg，吲哚乙酸0.1-0.3mg，N-二甲胺基琥珀酰胺8-11mg，1-氨基环丙烷-1-羧酸0.1-0.3mg；乳糖4-5g，琼脂0.8-1g，甘氨酸1.57-1.66mg；余量为水。
【专利说明】马铃薯脱毒瓶苗培养基及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明具体涉及一种新型马铃薯脱毒瓶苗培养基，属于组织培养材料【技术领域】。【背景技术】
[0002]植物组织培养是指在无菌的条件下，将离体的植物(根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织(形成层、花药组织、胚乳、皮层等)、细胞(体细胞和生殖细胞)以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株。由于培养物是脱离植物母体，在玻璃瓶中进行培养，所以也叫做离体培养。
[0003]目前采用组织培养脱病毒快繁及离体快繁生产株苗的技术已发展相当成熟。脱毒株苗具有无杂菌、适应能力较强、繁育较快、质量优、抗性好、分蘖性强、繁殖系数高、大批量生产、周年供应、便于运输等优点，已得到有关专家的鉴定及高度评价和种植试验区、种植产区果农的认可。例如脱毒马铃薯、脱毒红薯、脱毒生姜、脱毒大蒜、脱毒草莓、脱毒苗木、脱毒花卉等等，已成为现代农民致富的新宠。
[0004]植物组织培养脱毒快繁是人工在无菌条件下利用植物体的一部分，在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物，脱除病毒得到无毒苗株，继而在大田快速繁殖的技术。脱毒及离体快繁，这是目前植物组织培养应用最多、最广泛和是有效的一个方面。主要是进行茎尖培养脱除病毒。
[0005]马铃薯在种植过程中易感染病毒，当条件适合时，就会在植株体内增殖，转运和积累于所结薯块中，并且世代传递，逐年加重。病毒的增殖与植物正常代谢极为密切，目前尚没有发现既能杀死病毒又不损伤植物的药剂，病毒危害一度成为马铃薯的不治之症。
[0006]科学研究结果证明，侵染马铃薯的病毒有20多种。这些病毒一旦侵入马铃薯植株和块茎，就会引起马铃薯退化，出现各种各样的病态，造成不同程度的减产。研究的结果还证明，病毒在植物组织中分布是不均匀的，并且受一定环境条件影响，在靠近马铃薯茎的顶端病毒浓度很低或不含病毒。根据这一特点，通过茎尖培养可以获得马铃薯无病毒苗。
[0007]茎尖培养的关键是奖脱毒后的茎尖透导生成带有完整根、茎、的植株，因此选择适合的培养基十分重要。对于马铃薯的茎尖培养来说，需要较多的N03—、NH4+营养，其常用培养基为MS和Miller基本培养基。
【发明内容】
[0008]本发明克服现有技术的不足，所要解决的技术问题是提供一种用于瓶培马铃薯脱
毒苗的培养基。 [0009]为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为:马铃薯脱毒瓶苗培养基，以IL培养基计算含有:磷酸二氢钾320-365mg，硫酸铵1500_1850mg，硝酸钙800-1 IOOmgjt酸镁 4500-5000mg，硝酸钾 1000-1080mg，硝酸铵 150_300mg，碘化钾 0.6-0.75mg,硫酸锌8-9mg,硫酸亚铁3-7mg,吲哚乙酸0.1-0.3mg, N- 二甲胺基琥拍酰胺8_llmg, 1-氨基环丙烷-1-羧酸0.1-0.3mg ;乳糖4-5g，琼脂0.8-lg,甘氨酸1.57-1.66mg ;余量为水。[0010]作为优选的马铃薯脱毒瓶苗培养基，以IL培养基计算含有:磷酸二氢钾345mg，硫酸铵1700mg,硝酸韩1050mg,硫酸镁4680mg,硝酸钾1030mg,硝酸铵220mg,碘化钾0.65mg,硫酸锌8.5mg,硫酸亚铁4.3mg,吲哚乙酸0.15mg, N- 二甲胺基琥拍酰胺IOmg, 1-氨基环丙烧-1-羧酸0.2mg ;乳糖5g,琼脂Ig,甘氨酸1.62mg ;余量为水。
[0011]马铃薯脱毒瓶苗培养基的制备方法，包括如下步骤:按制备IL培养基计，
1)将所述磷酸二氢钾、硫酸铵、硝酸钙、硫酸镁、硝酸钾、硝酸铵按质量份称取后加水制成200mL溶液A ;将所述碘化钾、硫酸锌、硫酸亚铁、N-二甲胺基琥珀酰胺按质量份称取后加水制成200mL溶液B ;将所述吲哚乙酸、1-氨基环丙烷_1_羧酸、甘氨酸按质量份称取后加水制成IOOmL溶液C ；
2)量取300mL水加热溶解所述琼脂，然后一次加入溶液C、溶液B和溶液A，混合均匀后，加入乳糖，煮沸IOmin,放凉后定溶至IL ；
3)调节pH值为5.6，装瓶灭菌即可。
[0012]与现有技术相比本发明具有以下有益效果。
[0013]1、本发明能够支持马铃薯在高密度培养条件下的健壮快速生长；适用于大规模培养马铃薯脱毒芽尖。
[0014]2、本发明提供的制备方法步骤简单、操作方便、安全可靠，减少了手工劳动强度和必要劳动时间。 [0015]3、本发明具有培养密度高、单位面积产量高、生产规模大的特点，能够实现大规模、集约化、工厂化生产。
【具体实施方式】
[0016]以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。
[0017]实施例1
马铃薯脱毒瓶苗培养基，以IL培养基计算含有:磷酸二氢钾320mg，硫酸铵1500mg，硝酸钙800mg,硫酸镁5000mg,硝酸钾1000mg,硝酸铵150mg,碘化钾0.6mg,硫酸锌8mg,硫酸亚铁3mg,吲哚乙酸0.1mg, N- 二甲胺基琥拍酰胺8mg, 1-氨基环丙烷_1_羧酸0.1mg ;乳糖4g，琼脂0.8g，甘氨酸1.57mg ;余量为水。
[0018]实施例2
马铃薯脱毒瓶苗培养基，以IL培养基计算含有:磷酸二氢钾345mg，硫酸铵1700mg，硝酸钙1050mg，硫酸镁4680mg，硝酸钾1030mg，硝酸铵220mg，碘化钾0.65mg，硫酸锌8.5mg，硫酸亚铁4.3mg,吲哚乙酸0.15mg, N- 二甲胺基琥拍酰胺IOmg, 1-氨基环丙烷_1_羧酸
0.2mg ;乳糖5g,琼脂Ig,甘氨酸1.62mg ;余量为水。
[0019]实施例3
马铃薯脱毒瓶苗培养基，以IL培养基计算含有:磷酸二氢钾330mg，硫酸铵1600mg，硝酸钙950mg,硫酸镁4500mg,硝酸钾1050mg,硝酸铵180mg,碘化钾0.7mg,硫酸锌8.5mg,硫酸亚铁5mg,吲哚乙酸0.2mg, N- 二甲胺基琥拍酰胺9mg, 1-氨基环丙烷_1_羧酸0.2mg ;乳糖4.5g，琼脂0.9g，甘氨酸1.6mg ;余量为水。
[0020]实施例4
马铃薯脱毒瓶苗培养基，以IL培养基计算含有:磷酸二氢钾365mg，硫酸铵1850mg，硝酸钙IlOOmg,硫酸镁4800mg,硝酸钾1080mg,硝酸铵300mg,碘化钾0.75mg,硫酸锌9mg,硫酸亚铁7mg,吲哚乙酸0.3mg, N-二甲胺基琥拍酰胺Ilmg, 1-氨基环丙烷-1-羧酸0.3mg ;乳糖4-5g，琼脂Ig,甘氨酸1.66mg ;余量为水。
[0021]实施例5
实施例1-4的培养基方案，按照如下步骤制备:按制备IL培养基计，
1)将所述磷酸二氢钾、硫酸铵、硝酸钙、硫酸镁、硝酸钾、硝酸铵按质量份称取后加水制成200mL溶液A ;将所述碘化钾、硫酸锌、硫酸亚铁、N-二甲胺基琥珀酰胺按质量份称取后加水制成200mL溶液B ;将所述吲哚乙酸、1-氨基环丙烷_1_羧酸、甘氨酸按质量份称取后加水制成IOOmL溶液C ； 2)量取300mL水加热溶解所述琼脂，然后一次加入溶液C、溶液B和溶液A，混合均匀后，加入乳糖，煮沸IOmin,放凉后定溶至IL ；
3)调节pH值为5.6，装瓶灭菌即可。
[0022]本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。因此，无论从哪一点来看，本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不能限制发明，权利要求书指出了本发明的范围，而上述的说明并未指出本发明的范围，因此，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何变化，都应认为是包括在权利要求书的范围内。
【权利要求】
1.马铃薯脱毒瓶苗培养基，其特征在于，以IL培养基计算含有:磷酸二氢钾320-365mg,硫酸铵 1500_1850mg,硝酸钙 800-1 IOOmg,硫酸镁 4500-5000mg,硝酸钾1000-1080mg,硝酸铵150_300mg，碘化钾0.6-0.75mg,硫酸锌8_9mg，硫酸亚铁3_7mg，吲哚乙酸0.1-0.3mg, N- 二甲胺基琥拍酰胺8-llmg, 1-氨基环丙烷-1-羧酸0.1-0.3mg ;乳糖4_5g，琼脂0.8-lg，甘氨酸1.57-1.66mg ;余量为水。
2.根据权利要求1所述的马铃薯脱毒瓶苗培养基，其特征在于，以IL培养基计算含有:磷酸二氢钾345mg,硫酸铵1700mg,硝酸韩1050mg,硫酸镁4680mg,硝酸钾1030mg,硝酸铵220mg,碘化钾0.65mg,硫酸锌8.5mg,硫酸亚铁4.3mg,吲哚乙酸0.15mg, N- 二甲胺基琥拍酰胺IOmg, 1-氨基环丙烷-1-羧酸0.2mg ;乳糖5g,琼脂Ig,甘氨酸1.62mg ;余量为水。
3.根据权利要求1或2所述的马铃薯脱毒瓶苗培养基的制备方法，其特征在于包括如下步骤:按制备IL培养基计， 1)将所述磷酸二氢钾、硫酸铵、硝酸钙、硫酸镁、硝酸钾、硝酸铵按质量份称取后加水制成200mL溶液A ;将所述碘化钾、硫酸锌、硫酸亚铁、N-二甲胺基琥珀酰胺按质量份称取后加水制成200mL溶液B ;将所述吲哚乙酸、1-氨基环丙烷_1_羧酸、甘氨酸按质量份称取后加水制成IOOmL溶液C ； 2)量取300mL水加热溶解所述琼脂，然后一次加入溶液C、溶液B和溶液A，混合均匀后，加入乳糖，煮沸IOmin,放凉后定溶至IL ； 3)调节pH值为5.6，装 瓶灭菌即可。
【文档编号】A01H4/00GK103947552SQ201410171045
【公开日】2014年7月30日 申请日期:2014年4月28日 优先权日:2014年4月28日
【发明者】孟义川 申请人:内蒙古嘉恒农业科技有限责任公司