一种提高蛹虫草中活性物质含量的培养种植方法与流程

文档序号:15627871发布日期:2018-10-12 19:51阅读:377来源:国知局
本发明涉及一种提高蛹虫草中活性物质含量的培养种植方法,属于蛹虫草培养种植
技术领域

背景技术
:蛹虫草为子囊菌亚门,麦角菌目,麦角菌科、虫草属的模式种,又名北冬虫夏草、北虫草等。蛹虫草形态特征子座单生或数个一起从寄生蛹体的头部或节部长出,颜色为橘黄或橘红色,全长2~8厘米,蛹体颜色为紫色,长约1.5~2厘米。冬虫夏草与人参、鹿茸齐名为为中国传统的三大补品而驰名中外,国内外许多专家对蛹虫草营养化学成份,药理及临床效果的研究,都基本上和冬虫夏草相同,主要有保肺益肾,止血化痰,调节身体机能,主治肺结核咳血,阳痿遗精,腰膝酸痛,美容护肤,神精衰弱,糖尿病,升白血球,防癌、抗癌,对化疗作用也很大。人工栽培的蛹虫草药用功效与野生虫草的功效相差无几,某些方面的医用表现甚至优于野生虫草。药化、药理和临床实验证明蛹虫草完全可以作为冬虫夏草的代用品。经研究证明,人工培养的蛹虫草医药临床效果,与天然的冬虫夏草相同,同样能够调节全身功能、提高免疫能力、增强巨噬细胞的吞噬功能、促进抗体的形成,主要有保肺益肾养肝、止咳平喘祛痰、润肤防皱抗衰老、抗菌抗炎、镇静、扩张血管、降低血压、降低血糖、抗疲劳、耐缺氧等作用。人工蛹虫草主治:虚痨咳血、腰膝酸痛、阳痿遗精、神经衰弱、心悸失眠、盗汗、心率失常、食欲不振、鼻咽癌、肺气肿、肺结核、气管炎、哮喘症、肝炎、肾炎、肾虚、糖尿病、尿频及放、化疗后白细胞减少等症。目前,现有技术中已有大量蛹虫草培养种植方法的研究,但是仍然存在一些缺陷,如蛹虫草中活性物质含量不够理想等。技术实现要素:发明目的:为了克服现有技术中存在的不足,本发明提供了一种提高蛹虫草中活性物质含量的培养种植方法。技术方案:为实现上述目的,本发明提供了一种提高蛹虫草中活性物质含量的培养种植方法,包括如下步骤:(1)菌种准备:选择待接种的蛹虫草菌株;(2)培养基准备:配制液体培养基,配方组分按重量比为:葡萄糖10~30克,磷酸二氢钾1~5克,硫酸镁1~5克,蛋白胨5~15克,维生素b150毫克,水1000毫升;将配制好的液体培养基分装,封口,灭菌;(3)接种:灭菌后取出培养基,自然冷却至室温,在无菌条件下接入蛹虫草菌种;震荡培养4~10天;然后再向培养液中加入灭菌后的蛹虫草提取物20-40克,葡萄糖10-15克,混匀;(4)菌丝培养:将步骤3)处理后的培养液移入黑暗条件下培养,18℃~24℃条件下培养10~14天,然后光照条件下培养,保持湿度60%~70%,温度20℃~24℃,培养6-10天;(9)采收:待子实体长到6~8厘米时,将子实体取出,干燥,避光保存。所述步骤(1)中蛹虫草菌株为适应性强,见光后转色除草快,性状稳定的蛹虫草菌株。所述步骤(2)中灭菌的方法为:在120℃~130℃条件下灭菌25~35分钟。所述步骤(3)中振荡培养的条件为:15℃~25℃,100~150转/分钟的摇床中震荡培养。所述步骤(3)中蛹虫草提取物的制备方法为:将蛹虫草用6-8倍体积的纯水煮沸提取,每次2-4h,提取3次,合并提取液,浓缩,即得所述水提物。所述步骤(4)中光照的强度600~800勒克斯。有益效果:相对于现有技术,本发明方法工艺简单,成本低,方法中采用特定的培养液添加物,结合其他处理方法,能够显著提高蛹虫草中活性物质的含量,效果显著。具体实施方式下面结合实施例对本发明作更进一步的说明。实施例1(1)菌种准备:选择适应性强,见光后转色除草快,性状稳定的蛹虫草,作为待接种的蛹虫草菌株;(2)培养基准备:配制液体培养基,配方组分按重量比为:葡萄糖10克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁1克,蛋白胨5克,维生素b150毫克,水1000毫升;将配制好的液体培养基分装,封口,在120℃~130℃条件下灭菌25分钟;(3)接种:灭菌后取出培养基,自然冷却至室温,在无菌条件下接入蛹虫草菌种;15℃,150转/分钟的摇床中震荡培养4天;然后再向培养液中加入灭菌后的蛹虫草提取物20克,玉米粉10克,混匀;所述蛹虫草提取物的制备方法为:将人参用6倍体积的纯水煮沸提取,每次4h,提取3次,合并提取液,浓缩,即得所述水提物;(4)菌丝培养:将步骤3)处理后的培养液移入黑暗条件下培养,18℃条件下培养14天,然后600勒克斯光照条件下培养,保持湿度60%~70%,温度20℃~24℃,培养6天;(9)采收:待子实体长到6~8厘米时,将子实体取出,干燥,避光保存。实施例2(1)菌种准备:选择适应性强,见光后转色除草快,性状稳定的蛹虫草,作为待接种的蛹虫草菌株;(2)培养基准备:配制液体培养基,配方组分按重量比为:葡萄糖30克,磷酸二氢钾5克,硫酸镁5克,蛋白胨15克,维生素b150毫克,水1000毫升;将配制好的液体培养基分装,封口,在120℃~130℃条件下灭菌35分钟;(3)接种:灭菌后取出培养基,自然冷却至室温,在无菌条件下接入蛹虫草菌种;25℃,100转/分钟的摇床中震荡培养10天;然后再向培养液中加入灭菌后的蛹虫草提取物40克,玉米粉15克,混匀;所述蛹虫草提取物的制备方法为:将人参8倍体积的纯水煮沸提取,每次2h,提取3次,合并提取液,浓缩,即得所述水提物;(4)菌丝培养:将步骤3)处理后的培养液移入黑暗条件下培养,24℃条件下培养10天,然后800勒克斯光照条件下培养,保持湿度60%~70%,温度20℃~24℃,培养10天;(9)采收:待子实体长到6~8厘米时,将子实体取出,干燥,避光保存。实施例3(1)菌种准备:选择适应性强,见光后转色除草快,性状稳定的蛹虫草,作为待接种的蛹虫草菌株;(2)培养基准备:配制液体培养基,配方组分按重量比为:葡萄糖20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁3克,蛋白胨10克,维生素b150毫克,水1000毫升;将配制好的液体培养基分装,封口,在120℃~130℃条件下灭菌30分钟;(3)接种:灭菌后取出培养基,自然冷却至室温,在无菌条件下接入蛹虫草菌种;20℃,120转/分钟的摇床中震荡培养7天;然后再向培养液中加入灭菌后的蛹虫草提取物30克,玉米粉12克,混匀;所述蛹虫草提取物的制备方法为:将人参用7倍体积的纯水煮沸提取,每次3h,提取3次,合并提取液,浓缩,即得所述水提物;(4)菌丝培养:将步骤3)处理后的培养液移入黑暗条件下培养,21℃条件下培养12天,然后700勒克斯光照条件下培养,保持湿度60%~70%,温度20℃~24℃,培养8天;(9)采收:待子实体长到6~8厘米时,将子实体取出,干燥,避光保存。实施例4(1)菌种准备:选择适应性强,见光后转色除草快,性状稳定的蛹虫草,作为待接种的蛹虫草菌株;(2)培养基准备:配制液体培养基,配方组分按重量比为:葡萄糖15克,磷酸二氢钾2克,硫酸镁2克,蛋白胨8克,维生素b150毫克,水1000毫升;将配制好的液体培养基分装,封口,在120℃~130℃条件下灭菌28分钟;(3)接种:灭菌后取出培养基,自然冷却至室温,在无菌条件下接入蛹虫草菌种;18℃,120转/分钟的摇床中震荡培养5天;然后再向培养液中加入灭菌后的蛹虫草提取物25克,玉米粉12克,混匀;所述蛹虫草提取物的制备方法为:将人参用7倍体积的纯水煮沸提取,每次3h,提取3次,合并提取液,浓缩,即得所述水提物;(4)菌丝培养:将步骤3)处理后的培养液移入黑暗条件下培养,20℃条件下培养11天,然后650勒克斯光照条件下培养,保持湿度60%~70%,温度20℃~24℃,培养7天;(9)采收:待子实体长到6~8厘米时,将子实体取出,干燥,避光保存。实施例5(1)菌种准备:选择适应性强,见光后转色除草快,性状稳定的蛹虫草,作为待接种的蛹虫草菌株;(2)培养基准备:配制液体培养基,配方组分按重量比为:葡萄糖25克,磷酸二氢钾4克,硫酸镁4克,蛋白胨12克,维生素b150毫克,水1000毫升;将配制好的液体培养基分装,封口,在120℃~130℃条件下灭菌32分钟;(3)接种:灭菌后取出培养基,自然冷却至室温,在无菌条件下接入蛹虫草菌种;22℃,140转/分钟的摇床中震荡培养8天;然后再向培养液中加入灭菌后的蛹虫草提取物35克,玉米粉14克,混匀;所述蛹虫草提取物的制备方法为:将人参用7倍体积的纯水煮沸提取,每次3h,提取3次,合并提取液,浓缩,即得所述水提物;(4)菌丝培养:将步骤3)处理后的培养液移入黑暗条件下培养,22℃条件下培养13天,然后750勒克斯光照条件下培养,保持湿度60%~70%,温度20℃~24℃,培养9天;(9)采收:待子实体长到6~8厘米时,将子实体取出,干燥,避光保存。实验例不同种植方法对蛹虫草中活性物质含量的影响取同一批蛹虫草,随机分为四组,分别为实施例3组、实施例4组、实施例5组和对照组;对照组与本发明实施例3相同,不同之处在于步骤(3)培养液中不加入蛹虫草提取物,其他均相同。实施例3组、实施例4组和实施例5组分别按照本发明实施例3、4和5方法进行培养种植。最后比较各组蛹虫草中活性物质含量,结果见下表1。表1各组蛹虫草中活性物质含量组别腺苷多糖(以葡萄糖计)虫草素虫草酸(以甘露醇计)实施例3组0.51%5.2%0.39%3.8%实施例4组0.52%5.8%0.32%3.6%实施例5组0.56%5.4%0.35%3.4%对照组0.32%3.8%0.21%1.9%由上表1可以得出,相比较对照组,即相比较培养液中未加入蛹虫草提取物,本发明培养液中加入蛹虫草提取物,最后培养种植所得蛹虫草,其腺苷、多糖、虫草素和虫草酸含量均显著提高,效果明显。当前第1页12
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