本发明涉及植物生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种白英的组织培养技术。
背景技术：
白英别名：白毛藤、蜀羊泉、毛葫芦。全国大部份地区有分布。多年生草本，夏秋季采全草，洗净，切段，晒干。气味甘、辛、苦，性微寒。具有清热解毒，祛风利湿的功用。长期以来供不应求，加上人为的掠夺式砍伐导致白英野生资源枯竭，因此有必要对其资源进行保护。近年来，白英资源开发有了一定的规模，在我国南北各省建立了gap种植基地，对白英野生资源保护工作起到了一定的促进作用。目前白英主要通过种子进行种苗繁殖，但由于种子繁殖后代性状发生分离，不利于优质种质资源保护，制约了优质白英的推广种植。因此，有必要建立白英的组织培养技术，为其良种快速繁殖提供技术支撑和保障，也为满足我国对白英种苗的需求，加速其资源扩充具有重要的现实意义。对比文件1，申请号：cn201010570851，发明名称：一种双水相萃取白英中总皂苷的方法，将白英药材粉碎，加入溶剂，固液浸提，过滤除杂后得到白英粗提液；取上述白英粗提液，浓缩至原来体积的1/5，加入无水乙醇/硫酸铵形成的双水相系统，加水使系统总量为一定值，混匀，静置后分为上下两相；取出含有大量白英总皂苷的无水乙醇相，对其进行减压浓缩，得到白英总苷提取物。本案与对比文件不相同。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供出一种白英的组织培养技术，本发明以白英带芽茎段为外植体，经过外植体消毒、丛生芽诱导、生根培养、炼苗移栽等过程从而建立了白英组织培养快速繁殖体系，从而实现了本发明的目的。
本发明的一种白英的组织培养技术，包括以下的步骤：
步骤1，丛生芽诱导：选取生长健壮无病虫的幼树当年生的带芽茎段作为外植体,用洗洁精水溶液浸泡16min，然后用自来水冲洗36min，擦干表面水分后备用,在超净工作台中以70%～80%乙醇浸泡16s，0.1%升汞溶液消毒26min，再用无菌水清洗11次，擦干后切成长度为2.2cm的茎段接种到诱导培养基上,先在25~28℃条件下全暗培养28天，然后置于每天光照15小时，光照强度为2000lx，培养温度为23℃条件下培养，直至诱导形成丛生芽；诱导培养基为：ms+8mg/l6-ba+11mg/lnaa+6.5mmol/lla(no3)2+9.5%蔗糖+6.5%琼脂+0.61%活性炭，ph值为5.2;
步骤2，增殖培养：将步骤1所得的丛生芽转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在23℃条件下全暗培养直至叶腋处萌生一个侧芽，然后置于每天光照21小时，光照强度为1900lx，培养温度为23℃的条件下培养直至各丛生芽伸长到6cm；增殖培养基为：ms+8mg/l6-ba+6.5mg/lnaa+9.5%蔗糖+6.5%琼脂+6.1%活性炭，ph值为5.2;
步骤3，生根培养：将步骤1或步骤2所获得的高度约为4cm的丛生芽芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在23℃条件下全暗培养10天，然后置于每天光照17小时，光照强度为2900lx，培养温度为23℃的条件下培养至生根；生根培养基为：1/2ms+9mg/lnaa+9.2%蔗糖+6.5%琼脂+6.1%活性炭，ph值为5.2;
步骤4，炼苗移栽：白英瓶内生根36天后，置于自然光照下炼苗11天后，洗净根部培养基，移栽由黄心土：河沙=3：2混合成的基质中。
与现有技术相比本发明的优点是：本发明通过离体快繁技术获得优质种苗的育苗方法。以白英带芽茎段为外植体，经过外植体消毒、丛生芽诱导、生根培养、炼苗移栽等过程从而建立了白英组织培养快速繁殖体系，加速白英良种的推广和资源开发利用具有重要的现实意义。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。
实施例1：
（1）丛生芽诱导：选取生长健壮无病虫的幼树当年生的带芽茎段作为外植体,用洗洁精水溶液浸泡11min，然后用自来水冲洗16min，擦干表面水分后备用。在超净工作台中以75%乙醇浸泡11s，0.1%升汞溶液消毒14min，再用无菌水清洗9次，擦干后切成长度为6.2cm的茎段接种到诱导培养基上,先在26℃条件下全暗培养21天，然后置于每天光照16小时，光照强度为1600x，培养温度为26℃条件下培养44天即可诱导形成丛生芽，诱导率为69%。所述诱导培养基为ms+8mg/l6-ba+6.5mg/lnaa+6.5mmol/lla(no3)2+6.0%蔗糖+0.80%琼脂+0.11%活性炭，ph值为5.6。
（2）增殖培养：将步骤（1）所得的丛生芽转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在26℃条件下全暗培养直至叶腋处萌生一个侧芽，然后置于每天光照19小时，光照强度为1600lx，培养温度为26℃的条件下培养36天各丛生芽即可伸长到8cm，增殖率为4.69。所述增殖培养基为ms+7mg/l6-ba+0.7mg/lnaa+3.57%蔗糖+0.65%琼脂+0.5%活性炭，ph值为5.6。
（3）生根培养：将步骤（1）或步骤（2）所获得的高度约为8cm的丛生芽芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在26℃条件下全暗培养9天，然后置于每天光照16小时，光照强度为2500lx，培养温度为26℃的条件下培养44天即可生根，生根率为74%。
（4）炼苗移栽：白英瓶内生根25天后，置于自然光照下炼苗10天后，洗净根部培养基，移栽由黄心土：河沙=2：2混合成的基质中。移栽成活率为89%。
实施例2：
（1）丛生芽诱导：选取生长健壮无病虫的幼树当年生的带芽茎段作为外植体,用洗洁精水溶液浸泡13min，然后用自来水冲洗20min，擦干表面水分后备用。在超净工作台中以75%乙醇浸泡16s，0.1%升汞溶液消毒17min，再用无菌水清洗7次，擦干后切成长度为1.8cm的茎段接种到诱导培养基上,先在27℃条件下全暗培养23天，然后置于每天光照18小时，光照强度为1600x，培养温度为27℃条件下培养32天即可诱导形成丛生芽，诱导率为79.9%。所述诱导培养基为ms+9mg/l6-ba+1.2mg/lnaa+0.6mmol/lla(no3)2+4.0%蔗糖+0.4%琼脂+0.5%活性炭，ph值为5.6。
（2）增殖培养：将步骤（1）所得的丛生芽转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在28℃条件下全暗培养直至叶腋处萌生一个侧芽，然后置于每天光照18小时，光照强度为1900lx，培养温度为27℃的条件下培养32天各丛生芽即可伸长到4cm，增殖率为5.5。所述增殖培养基为ms+1.8mg/l6-ba+0.8mg/lnaa+2.8%蔗糖+0.65%琼脂+0.3%活性炭，ph值为5.6。
（3）生根培养：将步骤（1）或步骤（2）所获得的高度约为8cm的丛生芽芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在27℃条件下全暗培养12天，然后置于每天光照14小时，光照强度为2200lx，培养温度为27℃的条件下培养36天即可生根，生根率为81%。
（4）炼苗移栽：白英瓶内生根23天后，置于自然光照下炼苗8天后，洗净根部培养基，移栽由黄心土：河沙=2：2混合成的基质中。移栽成活率为93%。