一种南瓜单倍体植株的诱导方法及用于该诱导方法的培养基与流程

文档序号:17917839发布日期:2019-06-14 23:54

技术特征:

1.一种南瓜单倍体植株的诱导方法,包括如下步骤:将南瓜未受精子房进行表面消毒,切除子房纵向两端无胚珠的部分和子房外皮,然后将其横切成厚度为1mm-2mm的子房薄片,将所述子房薄片消毒后接种到诱导培养基中进行诱导培养,待得到的胚状体具有明显的形态学上端和形态学下端时转移到成苗培养基中进行成苗培养,直至得到再生植株,通过倍性鉴定筛选出南瓜单倍体植株。

2.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于,所述南瓜未受精子房是通过以下方法得到:在南瓜雌花开花前一天对其进行套袋处理,在开花当天上午7:00-8:00取带有子房的未受精雌花,用冰盒带回后在流水下冲洗2-3min,去花后得到所述的南瓜未受精子房。

3.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于,所述表面消毒的具体操作包括如下步骤:用体积分数为75%的酒精对所述南瓜未受精子房进行表面消毒30s-1min,然后用无菌水冲洗1-3次。

4.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于,所述子房薄片消毒的具体操作包括如下步骤:用质量分数为2-3%的次氯酸钠溶液对所述子房薄片进行消毒5-7min,然后用无菌水冲洗4-6次。

5.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于,所述诱导培养的具体操作包括如下步骤:将消毒后的所述子房薄片在34-36℃全黑暗条件下热激处理4-5d,待观察到胚珠膨大后将其转到温度24-26℃、光照强度2000Lx-2500Lx、光照时间14h/d的条件下进行光暗培养。

6.根据权利要求1所述的诱导方法,其特征在于,所述倍性鉴定采用的方法为流式细胞检测法。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的诱导方法,其特征在于,所述诱导培养基在MS培养基的基础上添加6-苄氨基腺嘌呤或噻苯隆,所述6-苄氨基腺嘌呤在诱导培养基中的浓度为0.2-2mg/L,所述噻苯隆在诱导培养基中的浓度为0.02-0.04mg/L。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的诱导方法,其特征在于,所述成苗培养基为MS培养基。

9.一种诱导培养基,其特征在于,所述诱导培养基在MS培养基的基础上添加6-苄氨基腺嘌呤或噻苯隆,所述6-苄氨基腺嘌呤在诱导培养基中的浓度为0.2-2mg/L,所述噻苯隆在诱导培养基中的浓度为0.02-0.04mg/L。

10.根据权利要求9所述的诱导培养基,其特征在于,所述诱导培养基在MS培养基的基础上添加6-苄氨基腺嘌呤,所述6-苄氨基腺嘌呤在诱导培养基中的浓度为1mg/L。

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