一种基于led光源的花烛组织培养方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种基于LED光源的花烛组织培养方法，属于植物组织培养技术领 域。
【背景技术】
[0002] 花烛又名花烛，为天南星科花烛属多年生常绿草本植物。花烛花色艳丽，花茎挺 拔，其叶型翠绿美观，是世界著名的切花和盆栽花卉之一。花烛的繁殖方式主要有扦插、分 株、人工种子和组织培养等。但由于分株繁殖难以扩大生产，播种繁殖需经人工授粉才能获 得种子，故组织培养是目前花烛种苗生产的主要途径和有效方法。虽然，组织培养的应用 大大降低了花烛种苗生产成本，但在花烛的组织培养及快速繁殖过程中仍存在繁殖系数偏 低、培养周期偏长等突出问题。
[0003] 在植物的组织培养过程中，光照是十分重要的环境因子。不同波长的光质对再生 体系建立的影响不同。一些学者研究了光质对草莓、菊花、番木瓜、马铃薯愈伤组织分化的 影响，证实了光质对组培植物的生物学效应。本研究采用LED精确调制光谱能量分布，研究 光质对花烛愈伤组织分化、试管苗和移栽苗生长的影响，得出了相关结果。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于在花烛愈伤组织不定芽分化至移栽驯化期间采用LED光源的 光质处理，以缩短花烛组织培养繁殖时间，获得高质量的花烛组培苗。
[0005] 为了达到上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的： 一种基于LED光源的花烛组织培养方法，包括以下步骤： (1)外植体的选择和消毒：选择完全展开的花烛幼嫩叶片(保留中脉)，先置75%乙醇中 30s，无菌水洗5次，再置于5%次氯酸钠中灭菌15min，无菌水洗5次，用无菌吸水纸吸干水 分； (2) 愈伤组织的诱导：取灭菌的叶片，切割成lcm2方块，接种于愈伤组织诱导培养基中， 每个培养皿接种4个叶片外植体，封口膜封口，置于黑暗培养； (3) 愈伤组织不定芽分化：将叶片诱导生成的愈伤组织接种于培养皿中，每瓶接种愈伤 组织0. 3g左右。然后将接种后的培养皿置于LED红/蓝（1:1)光下处理； (4) 不定芽生根壮苗：将诱导出的不定芽接种至不定芽增殖培养基中置于日光灯下进 行复壮培养，然后将进行过复壮培养的花烛接种至生根壮苗培养基中，每瓶4株，置于LED 光源红/蓝（1:1)光下培养； (5)驯化移栽：将生根的花烛苗移栽到水苔基质中，附加营养液为1/2 MS。在荧光灯培 养箱内预培养3天后，置于LED光源红/蓝（7:1)光下培养。
[0006] 本发明提出的花烛组织培养技术，利用LED光源在花烛愈伤不定芽分化、生根壮 苗和驯化移栽阶段采用不同光质LED光源照射，操作简单，形成的愈伤组织不定芽分化率 高、移栽的花烛苗环境适应能力强、成活率高。
【具体实施方式】
[0007]以下结合具体实施例对本发明作具体的介绍，所用方法如无特别说明均为常规方 法。
[0008]-种基于LED光源的花烛组织培养方法： (1)外植体的选择和消毒：选择完全展开的花烛幼嫩叶片(保留中脉)，先置75%乙醇中 30s，无菌水洗5次，再置于5%次氯酸钠中灭菌15min，无菌水洗5次，用无菌吸水纸吸干水 分； (2) 愈伤组织的诱导：取灭菌的叶片，切割成1 cm2方块，接种于愈伤组织诱导培养基 中，每个培养皿接种4个叶片外植体，Parafilm封口，置于黑暗培养； (3) 愈伤组织不定芽分化：将叶片诱导生成的愈伤组织接种于培养皿中，每瓶接种 愈伤组织〇.3g左右，然后将接种后的培养皿置于荧光灯（F)、红光（R)、蓝光（B)、红/蓝 (1:1)下培养28天，记录愈伤组织不定芽分化率（％)=(分化出不定芽的愈伤数/接种愈伤 数）X 100%，结果如表1 ; 表1光质对花烛愈伤组织不定芽分化率的影响
【主权项】
1. 一种基于LED光源的花烛组织培养方法，该方法步骤如下： (1) 外植体的选择和消毒：选择完全展开的花烛幼嫩叶片(保留中脉)，先置75%乙醇中 30s，无菌水洗5次，再置于5%次氯酸钠中灭菌15min，无菌水洗5次，用无菌吸水纸吸干水 分； (2) 愈伤组织的诱导：取灭菌的叶片，切割成1 cm2方块，接种于愈伤组织诱导培养基 中，每个培养皿接种4个叶片外植体，Parafilm封口，置于黑暗培养； (3) 愈伤组织不定芽分化：将叶片诱导生成的愈伤组织接种于培养皿中，每瓶接种愈伤 组织0. 3g左右，然后将接种后的培养皿置于LED红/蓝（1:1)光下处理； (4) 不定芽生根壮苗：将诱导出的不定芽接种至不定芽增殖培养基中置于日光灯下进 行复壮培养，然后将进行过复壮培养的花烛接种至生根壮苗培养基中，每瓶4株，置于LED 光源红/蓝（1:1)光下培养； (5) 驯化移栽：将生根的花烛苗移栽到水苔基质中，附加营养液为1/2 MS，在荧光灯培 养箱内预培养3天后，置于LED光源红/蓝（7:1)光下培养。
2. 根据权利要求1所述方法，其特征在于：愈伤组织诱导培养基为MS (1/4 NH4N03) + 2, 4-D 0? lmg ? I71 + TDZ 0? 4 mg ? I71;不定芽分化培养基为 1/2MS + BA 0? 2mg ?厂1 + KT 0? 5mg ? L_S不定芽增殖培养基为1/2 MS + BAO. 2 mg ? L-1 + KT 0? 5 mg ? L_S生根壮苗培 养基为 1/2 MS + BA 0? 2 mg ? I71 + IBA 0? 2 mg ? I71 + KT 0? 5 mg ? L'
3. 根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述LED光源红蓝比为光强比；蓝光峰值波 长为460nm，波长半宽为5nm ;红光峰值波长为658nm，波长半宽为5nm。
4. 根据权利要求1所述方法，其特征在于：花烛培养环境光照强度为50 ii mol ?nT2 左右，光照时间12 h^cf1，相对湿度为（75±5)%，温度为（25 ±2) °C。
【专利摘要】花烛为天南星科花烛属多年生常绿草本植物，在全球热带花卉中，花烛仅次于热带兰花而名列第二。本发明涉及一种基于LED光源的花烛愈伤组织不定芽分化方法，属于植物组织培养技术领域。该方法在花烛愈伤组织不定芽分化、生根壮苗和驯化移栽期间采用不同光质的LED光源处理，以期缩短花烛组培快繁时间，获得高质量的花烛苗。
【IPC分类】A01H4-00
【公开号】CN104521749
【申请号】CN201410612910
【发明人】崔瑾, 章锐
【申请人】南京七色光农业科技有限公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年11月5日