一种防治黄萎病的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种防治棉花黄萎病的方法，特别是一种通过农用生物降解地膜与生防菌配合防治黄萎病的方法。
【背景技术】
[0002]棉花黄萎病是土壤中的病原物在条件适宜时从作物的根部或茎部侵害作物而引起的病害，其病原菌主要是通过土壤有机肥料、灌溉水或者自然流水进行传播危害，危害严重的地块可使作物减产30% -50%。
[0003]生物防治是利用农业生态系中自然界有益生物对有害生物的自然控制，植物病害的生物防治由于其安全、有效、低毒、残留少越来越引起人们的重视，采用生物防治无疑成为根治列当的一条较为理想的途径，此外，生物防治可以克服化学农药所带来的弊病，因而成为继农业措施、化学农药防治之后又一重要的防治方法。
[0004]现有技术中已有利用枯草芽孢杆菌进行防治黄萎病的报道，然而，该方法中枯草芽孢杆菌的防治效率有限，且效果持续时间也受到施药方式的限制。而直接合成的化学有效物则由于化学农药的半衰期短，在土壤中有效成分停留时间短，药效期短，也存在使用缺陷。因此，开辟新的防治措施已成为当务之急。
[0005]地膜技术在农业领域的应用被誉为白色革命，随着实现农业现代化进程的不断推进，目前使用地膜已成为确保农业高产稳产的重要手段。地膜覆盖是一项成熟的农业栽培技术，保水保肥、保持湿度，有效地增加和延长作物生长期，确保了农作物产量的提高。然而，塑料属于高分子化合物，极难降解，既不受微生物锓蚀，也不能自行分解，其降解周期一般为200?300年，降解过程中还会溶出有毒物质，随着地膜栽培年限的延长，残留地膜若得不到及时回收，土壤中的残膜量不断增加，造成土壤结构破坏，阻碍作物根系对水肥的吸收和生长发育，降低土壤的肥力水平。甚至引起地下水难于下渗、土壤次生盐碱化，最终导致土壤质量和作物产量下降。长此下去，必然给后人带来难以解决的污染危害，对农业可持续发展构成严重威胁。大量残膜造成的“白色污染”不但严重影响农业生产的进行，而且对农业环境安全也构成了巨大威胁，形成农业面源污染，影响作物正常生产，造成减产欠收。“过去是拨开土地找地膜，现在是拨开地膜找土地。”农用地膜造成的“白色污染”让人触目惊心。
[0006]目前解决塑料造成的“白色污染”主要是有两种方法，其一，是将已使用的塑料回收利用，但这受塑料使用情况、类别以及经济等方面的制约，一般而言可回收的塑料有限，这些塑料大部分以石油为原料制造出的，使用后在大自然条件环境中基本无法降解，并且还可以抵制细菌的侵蚀，所以回收率较低，因而不能彻底而有效的解决“白色污染”；其二，大力推广使用可降解的塑料，这是有效解决“白色污染”问题途径之一。但大部分可降解的塑料基料为聚酯高分子材料，由于聚酯在合成过程中，分子排布为线性排列结构，当制成农用地膜成品时，纵向撕裂强度太低，不能满足正常的铺设地膜的要求，为此在合成时改变分子的分子链排列方式，提高它的支化度，有效地提高分子间的‘绳结’作用，进而提升聚酯高分子材料的物理机械性能，满足作物正常生长所需的铺膜要求。
[0007]—种利用生防菌及可生物降解的聚酯农用地膜防治黄萎病的有效方法，成为了发明人在本领域的研究重点。
【发明内容】
[0008]本发明人发现，采用本发明的可生物降解地膜与生防菌-枯草芽孢杆菌配合的方法可以更有效地对黄萎病进行防治，效率更高，持续的有效时间更长。在构建地膜过程中，通过生物防治法从棉花根围土壤中分离获得枯草芽孢杆菌，以生物降解农用地膜为载体，添加一定量的生防菌，制备出的生物降解地膜在进行生物防治时取得良好的防治黄萎病的效果。
[0009]本发明涉及一种防治棉花黄萎病的方法，该方法包括以下步骤:(I)获得枯草芽孢杆菌的发酵液；(2)步骤(I)所得发酵液经离心、上柱洗脱、浓缩得到枯草芽孢杆菌粉剂；
(3)制备含有上述枯草芽孢杆菌粉剂的生物降解地膜；(4)将经上述制备的一种防治棉花黄萎病的聚酯生物降解地膜，放置在含有两层滤网中间并埋置于土壤下25厘米处，待完全生物降解后取出两层中间的降解剩余物。将此剩余物均匀地洒在长有棉花的田间。
[0010]优选该生物降解地膜中还含有海藻肥。
[0011 ] 优选该生物降解地膜中的海藻肥和枯草芽孢杆菌粉用量相同。
[0012]在本发明中，枯草芽孢菌液或其发酵液及菌粉剂的制备方法如下:从棉花根围土壤中分离获得可防治黄萎病的生防菌-枯草芽孢杆菌。将保存在斜面上的枯草芽孢杆菌在PDA平板上活化，挑取菌块在ro培养基中摇培后收集菌。将收集的枯草芽孢杆菌置于100mL液体NA培养基中，在温度25-28°C、转速400r/min条件下振荡培养40_60h后得到枯草芽孢杆菌发酵液。将枯草芽孢杆菌发酵液在常温下以4800r/min的转速离心35min，取上清液，与30g大孔树脂AmberliteXAD16混合，在28°C、160r/min的转速下振荡4h后，填柱。先用蒸馏水洗柱后，再用丙酮洗脱，收集丙酮洗脱液。将丙酮洗脱液在40°C下旋转蒸发进行浓缩，最后制粉剂，得到枯草芽孢杆菌粉剂。
[0013]在本发明中，用于制备地膜的成分包括:(A) —种能够防治棉花黄萎病的含3%PVP的生防菌菌粉，该菌粉为枯草芽孢杆菌；(B) —种或多种选自脂肪族二元酸、二元醇或芳香族的二元酸，它们的环烷基或它们的酯、酸酐的化合物；(C) 一种或多种选自钛化合物或锡化合物或与金属盐复合的催化剂；(D) —种或多种选自能够改变分子链排布、提高分子支化度、提高分子量的单体；(E) —种或多种选自能够促进分子链扩展、分子量增大的扩链剂；(F) —种或多种选自一些能够抑制或者延缓共聚物和其他有机化合物在空气中热氧化的有机化合物抗氧剂；(G) —种或多种选自能够有效地吸收波长为280-400纳米的紫外光的紫外线吸收剂；(H) —种或多种选自颗粒粒径在2000目以下的无机填料；(I) 一种或多种选自用以降低摩擦副的摩擦阻力、减缓其磨损的润滑介质的润滑剂；
其中，所述制备组分(B)选自芳香族中的二元酸(BI):间苯二甲酸、邻苯二甲酸、联苯二甲酸、4，4_ 二苯醚二甲酸、2，6_萘二甲酸、1，5-萘二甲酸、1，3-环己烷二甲酸；脂肪族的二元酸(B2):丙二酸、丁二酸、己二酸、琥珀酸、戊二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、二甘醇酸、1，3_环己二甲酸、1，4_环己二甲酸；脂肪族的二元醇(B3):乙二醇、聚乙二醇、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、1，4_ 丁二醇、聚丙二醇、1，2-丁二醇、1，4_环己二甲醇、1，5-戊二醇、己二醇、1，8-辛二醇、聚乙二醇醚中、己二酸。所制备单体⑶分别由B1、B2、B3中的一种或多种。
[0014]所述制备组分(C)选自氧化钛、四氯化钛、钛酸四丁酯、钛酸四甲酯、钛酸四异丙酯、钛酸四烷基酯、四苯基钛酸酯、醋酸镁、醋酸锌、氧化二丁锡、氧化甲基苯基锡、四乙基锡、氧化六异二锡、氧化六环己基二锡、氧化双十二烷基锡、氢氧化三乙基锡、乙酸三异丁基锡、二月桂酸二苯基锡、三氯化单丁基锡、氯化三丁基锡、甲基锡酸、乙基锡酸、丁基锡酸中的一种或多种。
[0015]所述制备组分(D)选自马来酸酐、马来酸聚乙二醇单酯、马来酸双聚乙二醇单醚酯、马来酸酐-丙烯酸、磺化苯乙烯-马来酸酐共聚物、烯丙基聚氧乙烯醚基马来酸酐、聚马来酸酐-丙烯酰胺、聚丙烯酸-马来酸酐、苯乙烯-马来酸酐无规共聚物中的一种或多种。
[0016]所述制备组分(E)选自二异氰酸酯类、HD1、MD1、二酸酐、二酰氯、唑啉、双环氧化合物中的一种或多种。
[0017]所述制备组分抗氧剂(F)选自lrganox、抗氧剂 1010、1076、168、622、215、B215、B561、ΒΗΤ、T502、DST0P、维生素E中的一种或多种。
[0018]所述制备组分(G)选自UV-P、UV-0、UV-531、UV-9、UV-327、UV-329、UV-326、UV-328中的一种或多种。
[0019]所述制备组分(H)选自滑石粉、珍珠粉、氧化硅、氧化铝、氢氧化镁、贝壳粉、碳酸钙、蒙脱土、高岭土、粘土、硫酸钡、硅灰石中的一种或多种。
[0020]所述制备组分(I)选自芥酸酰胺、EBS中的一种或两种。
[0021]本发明生物降解农用地膜的制备方法，包括以下步骤:
(1)组分⑶中的(BI):(B2):(B3)的摩尔比为:(20?80): (20?75): (50?180);
(2)将组分(B)、(C)、(D)按照质量比(100?10000): (0.005 ?80): (50 ?300):
比例混合，通过酯化反应斧、预缩聚反应釜、终缩聚反应釜制备分子量高、支化度高的聚酯共聚物；
(3)将制备分子量高的聚酯共聚物与菌粉(A)、扩链剂(E)、抗氧剂(F)、紫外线吸收剂(G)、无机填料(H)、润滑剂(I)中的一种或多种经过双螺杆挤出机造粒得到聚酯共聚酯母粒；
(4)将聚酯共聚物母粒通过吹膜机进行吹制，得到含可根治列当生防菌且可生物降解的适用于新疆棉田地区的聚酯生物降解农用地膜。
[0022]在制备方法中，可以将组分(B)、(C)和⑶物料同时投入酯化缩聚反应釜中进行反应，得到分子量高、支化度高的聚酯共聚物；也可以将聚合单体(B)或(C)同时与(D)在(C)作用下进行反应，得到两种不同的聚酯共聚物，然后再将两种共聚物混合、缩聚，形成嵌段结构的分子量高、支化度高的聚酯共聚物颗粒。可以是分子量高的聚酯共聚物在配有与菌粉(A)、扩链剂(E)、抗氧剂(F)、紫外线吸收剂(G)、无机填料(H)、润滑剂(I)中的一种或多种混合物经过双螺杆挤出机造粒改性得到聚酯共聚物颗粒，输送系统输送至吹膜机组吹制一种含可根治列当生防菌且可生物降解的聚酯农用地膜；该地膜可通过酯化缩聚反应条件、聚酯或聚酯共聚物、菌粉和助剂加料量可以提高对根寄生性杂草列当的致死率，可得到性能优异，便于生产加工、降解周期可控的一类含可防治列当生防菌且可生物降解的聚酯农用地膜。在制备方法中，与可以是可以将组分(B)、(C)、(D)和(F)物料同时投入酯化缩聚反应釜中进行反应，得到超高分子量、支化度高的聚酯共聚物；也可以是超高分子量、支化度高的聚酯共聚物在配有耐热保护剂的菌粉(A)、扩链剂(E)、抗氧剂(F)、紫外线吸收剂(G)、无机填料(H)、润滑剂(I)中的一种或多种混合物均匀后，输送系统输送至吹膜机组吹制一种含生防菌且可生物降解的聚酯农用地膜。
本案中，黄萎病的防