一种枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法_3

文档序号:9673855阅读:来源:国知局
本。
【具体实施方式】
[0026] 实施例1 一种枯草芽孢杆菌可湿性粉剂,由下列重量分组成:枯草芽孢杆菌发酵液60份,填料: 硅藻土28份;润湿剂:Morwet EFW 3份;分散剂= CMC-Na 0.8份;芽孢萌发剂:L-丙氨酸0.4 份,肌苷0.5份,果糖1.2份;紫外保护剂:抗坏血酸1份,卵磷脂0.8份;干燥保护剂:麦芽糖3 份,甲基纤维素0.8份;增效剂:氨基寡糖素1.5份。
[0027] 其中,所述的一种枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法,由以下几步骤组成: 一、 枯草芽孢杆菌发酵液的制备 取出菌种保藏管,用NA固体培养基划平板进行复苏,30°C培养48小时。在平板下挑取单 个菌落接种至茄子瓶中NA固体培养基上,涂满整个茄子瓶,在培养箱中30°C培养48小时,将 IL无菌水将茄子瓶中的菌苔洗下,将洗下的枯草芽孢杆菌接种于装有120L枯草芽孢杆菌 液体培养基的200L种子发酵罐,初始pH值为7.2,温度为30°C,通风1:0.8,开搅拌,转 速为2000r/min;从菌种接种后18h时,菌体生长处于指数生长期,转入2000L的发酵罐的 发酵培养基中,以70%的罐装量,?!1值为7.2,温度为30°(3,开搅拌,转速为16(^/1^11,通 气量为前16小时为每分钟液气比为1:1,其后通气量为1:1.2;培养38小时,检测其芽孢含量 为115亿CFU/ml,结束发酵,作为枯草芽孢杆菌发酵液; 其中,所述NA培养基:蛋白胨IOg,牛肉膏3g,氯化钠5g,水1000 mL,pH7.2,固体培养基中 加入琼脂2%; 其中,所述枯草芽孢杆菌液体培养基:玉米粉20 g/L,豆柏粉30 g/L,鱼粉2 g/L,硫酸 镁0.5 g/L,硫酸锰0.5 g/L,磷酸二氢钾2 g/L,磷酸氢二钾I g/L,碳酸钙2 g/L,pH7.2; 其中,所述的发酵培养基:玉米粉32 g/L,豆柏粉68 g/L,鱼粉5g/L,硫酸镁0.5 g/L, 硫酸锰〇.6g/L,磷酸二氢钾3 g/L,磷酸氢二钾1.5 g/L,碳酸钙5 g/L,pH7.2; 各培养基灭菌的条件为:. 10-0.15MPa,121°C灭菌30分钟; 二、 将枯草芽孢杆菌发酵液60份;填料:硅藻土 28份;紫外保护剂:抗坏血酸1份,卵磷脂 0.8份;干燥保护剂:麦芽糖3份,甲基纤维素0.8份;混匀后喷雾干燥,得到枯草芽孢杆菌粉 剂; 三、 将润湿剂:Morwet EFW 3份;分散剂= CMC-Na 0.8份;芽孢萌发剂:L-丙氨酸0.4份, 肌苷0.5份,果糖1.2份;增效剂:氨基寡糖素1.5份;混匀得到枯草芽孢杆菌的助剂; 四、 将步骤二与步骤三所得到的枯草芽孢杆菌粉剂与助剂混匀并过通过气流粉碎机粉 碎过400目筛,检测其芽孢含量为125亿cfu/g,悬浮率为92%,润湿时间为65s,水分含量为 3.5%,真空包装,即为枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。
[0028] 实施例2 含芽孢萌发剂的枯草芽孢杆菌可湿性粉剂在水稻大田中的试验效果 试验选择在水稻高产区中稻中进行。试验地址选择在湖南省隆回县滩头镇龙竹村一农 户责任田中; 药剂用法与用量:试验组:将含有芽孢萌发剂的枯草芽孢杆菌可湿性粉剂稀释1000倍 在水稻秧苗两叶一心到四叶一心期、移栽后5-7天水稻返青期和破口抽穗期,选择晴天施 药; 对照组一(未加芽孢萌发剂的枯草芽孢杆菌组):将同量的枯草芽孢杆菌的未加芽孢萌 发剂的枯草芽孢杆菌稀释1000倍与试验组同时使用; 对照组二(空白组):将等量的清水进行喷施; 每组使用面积为2亩。施肥水平为纯氮20 kg/667m2,P205 10kg/667m2,K20 20 kg/ 667m2,基:蘖:穗=5:2: 3。喷施器械选用农民通用手动背负式喷雾器,病虫害防治及田间管 理略同大田生产。对照组一与对照组二(空白组)由于在生长过程中有纹枯病,利用常规药 物进行防治了两次。其它管理措施相同。
[0029] 试验结果: 由于本枯草芽孢杆菌是从市场上购买的,具有防治水稻纹枯病,等多种植物病害的样 品中分离得到的,从表1可以看出使用有芽孢萌发剂的枯草芽孢杆菌可湿性粉剂(试验组) 的水稻田中就没有发生纹枯病与稻瘟病,而使用未加芽孢萌发剂的枯草芽孢杆菌可湿性粉 剂(对照组一)的有轻微的稻瘟病,而清水组(对照组二)的田有较严重的纹枯病与稻瘟病的 发生,是用常规药物进行防治。使用含芽孢萌发剂的枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的田增产最 多,增产量达到24.86%,而使用未加芽孢萌发剂的枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的田也有12.7% 的增产,说明加入芽孢萌发剂明确显提高了枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的对病害的防治作 用,同时也增加了其增产与肥效的作用。
[0030] 表1各试验组的水稻产量
【主权项】
1. 一种枯草芽孢杆菌可湿性粉剂,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌可湿性粉剂由下列 重量份组成:枯草芽孢杆菌发酵液40-70份,填料:硅藻土20-30份;润湿剂:MorwetEFW1-4 份;分散剂:CMC-Na0.2-1份;芽孢萌发剂:L-丙氨酸0.1-0.5份,肌苷0.1-0.5份,果糖0.5-1.5份;紫外保护剂:抗坏血酸0.5-2份,卵磷脂0.2-1份;干燥保护剂:麦芽糖1-4份,甲基纤 维素〇.2_1份;增效剂:氨基寡糖素1_2份。2. 根据权利要求1所述的一种枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法,其特征在于,由以 下几步骤组成: 一、枯草芽孢杆菌发酵液的制备 取出菌种保藏管,用NA固体培养基划平板进行复苏,30°C培养48小时,在平板下挑取单 个菌落接种至茄子瓶中NA固体培养基上,涂满整个茄子瓶,在培养箱中30°C培养48小时,将 1L无菌水将茄子瓶中的菌苔洗下,将洗下的枯草芽孢杆菌接种于装有120L枯草芽孢杆菌 液体培养基的200L种子发酵罐,初始pH值为7.2,温度为30°C,通风1:0.8,开搅拌,转 速为200r/min;从菌种接种后18h时,菌体生长处于指数生长期,转入2000L的发酵罐的 发酵培养基中,以70%的罐装量,?!1值为7.2,温度为30°(3,开搅拌,转速为16(^/1^11,通 气量为前16小时为每分钟液气比为1:1,其后通气量为1:1.2;培养32-42小时,检测其芽孢 含量超过100亿CFU/ml,即可结束发酵,作为枯草芽孢杆菌发酵液; 其中,所述NA培养基:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,水1000mL,pH7.2,固体培养基中 加入琼脂2%; 其中,所述枯草芽孢杆菌液体培养基:玉米粉20g/L,豆柏粉30g/L,鱼粉2g/L,硫酸 镁0.5g/L,硫酸锰0.5g/L,磷酸二氢钾2g/L,磷酸氢二钾1g/L,碳酸钙2g/L,pH7.2; 其中,所述的发酵培养基:玉米粉32g/L,豆柏粉68g/L,鱼粉5g/L,硫酸镁0.5g/L, 硫酸锰〇.6g/L,磷酸二氢钾3g/L,磷酸氢二钾1.5g/L,碳酸钙5g/L,pH7.2; 各培养基灭菌的条件为:. 10-0.15MPa,121°C灭菌30分钟; 二、 将枯草芽孢杆菌发酵液40-70份;填料:硅藻土20-30份;紫外保护剂:抗坏血酸0.5-2份,卵磷脂0.2-1份;干燥保护剂:麦芽糖1-4份,甲基纤维素0.2-1份;混匀后喷雾干燥,得 到枯草芽孢杆菌粉剂; 三、 将润湿剂:MorwetEFW1-4份;分散剂:CMC-Na0.2-1份;芽孢萌发剂:L-丙氨酸 0.1-0.5份,肌苷0.1-0.5份,果糖0.5-1.5份;增效剂:氨基寡糖素1-2份;混匀得到枯草芽孢 杆菌的助剂; 四、 将步骤二与步骤三所得到的枯草芽孢杆菌粉剂与助剂混匀并过通过气流粉碎机粉 碎过400目筛,检测其芽孢含量不低于100亿cfu/g,悬浮率不低于85%,润湿时间不高于75s, 水分含量低于5%,真空包装,即为枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。3. 根据权利要求1所述的一种枯草芽孢杆菌可湿性粉剂,其特征,在于所述枯草芽孢杆 菌可湿性粉剂由下列重量份组成:枯草芽孢杆菌发酵液60份,填料:硅藻土28份;润湿剂: MorwetEFW3份;分散剂:CMC-Na0.8份;芽孢萌发剂:L-丙氨酸0.4份,肌苷0.5份,果糖1.2 份;紫外保护剂:抗坏血酸1份,卵磷脂0.8份;干燥保护剂:麦芽糖3份,甲基纤维素0.8份;增 效剂:氨基寡糖素1.5份。
【专利摘要】本发明涉及生物农药与微生物肥料领域,具体公开的是一种含有芽孢萌发剂的枯草芽孢杆菌的可湿性粉剂及其制备方法,该可湿性粉剂的原料由下列重量组份组成:枯草芽孢杆菌发酵液40-70份,填料:硅藻土20-30份;润湿剂:Morwet?EFW?1-4份;分散剂:CMC-Na?0.2-1份;芽孢萌发剂:L-丙氨酸0.1-0.5份,肌苷0.1-0.5份,果糖0.5-1.5份;紫外保护剂:抗坏血酸0.5-2份,卵磷脂0.2-1份;干燥保护剂:麦芽糖1-4份,甲基纤维素0.2-1份;增效剂:氨基寡糖素1-2份;本发明制备的枯草芽孢杆菌可湿性粉剂施入大田后芽孢萌发速度快,萌发率高,可明显提高其肥效与对植物病害防治效果,减少芽孢的用量,降低成本。
【IPC分类】A01N25/00, A01N63/00, A01N25/14, A01N43/16, A01P3/00
【公开号】CN105432667
【申请号】CN201510951092
【发明人】胡艳晖
【申请人】佛山市艳晖生物科技有限公司
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年12月19日
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