专利名称：一种用基因芯片进行核酸分子杂交的方法
技术领域：
本发明涉及一种用基因芯片进行核酸分子杂交的方法。
目前，一般的基因芯片都是在一(玻璃)介质面上用不同的方法固定一些核酸(称为固相探针)。在使用基因芯片时，把溶于水相的核酸样品(称为液相样品)与固相探针接触，使液相样品中的核酸分子和与之互补的固相探针形成杂交分子，然后依据杂交分子发出信号的位置及信号的强弱判断液相样品核酸分子的结构特征或量的信息。现有的分子杂交过程都是在相对恒温的条件下完成的。一般情况下核酸分子为双链或部分双链结构，在高温下双链分子会分裂成单链的分子，这一过程叫做变性。在进行分子杂交前液相样品首先进行变性处理，以便有足够的液相单链核酸分子与固相的单链探针分子杂交。但在大多情况下经变性处理后液相样品中的互补分子链会相互杂交，因而减少了与固相探针杂交的机会，造成杂交信号弱，检测的灵敏度低。
本发明的目的在于提供一种新型的用基因芯片进行核酸分子杂交的方法，它能克服现有技术的上述不足。
一种用基因芯片进行核酸分子杂交的方法，包括对液相样品进行变性处理，并使之与固相探针进行分子杂交，其特征是液相样品在与固相探针进行杂交过程中，反复进行加热、降温处理，并使之在杂交池与变性池之间流动。
实施用基因芯片进行核酸分子杂交的方法所用的装置，包括基因芯片，该基因芯片有芯片介质片，其特征是该芯片介质片的探针面处于杂交池中，杂交池通过通道与变性池连通，该变性池和杂交池的下方分别设置变温器和恒温器。
本发明的优点是减少液相样品中双链杂交分子的形成，增加固相杂交分子的数量，从而提高信号强度和分子检测的灵敏度。
下面通过实施例和
本发明。
附图为本发明装置的结构示意图。
本发明的装置主要由基因芯片1、变性器7、恒温器6和变温器11所组成。该基因芯片1为密封式，它有芯片介质片2，后者内面有多个固相探针3。在本实施例中它是检测地中海贫血症的DNA固相探针。在该固相探针3的下方设有杂交池4，后者是进行分子杂交的空间也是一条液相样品流动的渠道。基因芯片1是一次性使用产品。变性器7为多次重复使用的器件，它有变性池8、变性池8有气流口10。基因芯片1的杂交池4通过通道5与变性池8的通道9连通，液体可在杂交池4与变性池8之间流通。变温器11是半导体加热装置，位于变性池8的下方，具有加热降温双重作用(由通电方向而定)。恒温器6是个温度控制装置，位于杂交池4下方，也是半导体加热装置。检测地中海贫血症的DNA时，先把核酸从血样中提纯出来，对核酸中的靶分子进行扩增，并用荧光素对靶分子进行标记，把标记后的样品溶于缓冲液中即为液相样品。使用基因芯片1进行分子杂交时，将液相样品从气流口10灌入，灌入液相样品后气流口10再接上一个气动装置(图中未画出)，这时液相样品只在变性池8中，变温器11开始加热至95℃，10分钟后再冷却至45℃，然后再用气动装置加正压将液相样品推至到杂交池4中，使液相样品与固相探针3进行分子杂交，此时恒温器6保持恒温45℃。杂交过程进行15分钟。然后用气动装置吸真空(负压)将液相样品引入到变性池8中，再将液相样品进行加热降温变性处理。不断反复以上过程，2个小时后完成分子杂交。将基因芯片1内的液相样品排除，再灌入缓冲液清洗去非特异性杂交的核酸分子。最后用激光扫描仪检测基因芯片1内的杂交分子信号，并得出诊断结论。
本实施例的杂交池4为一长方体形，也可以为一圆弧体形。
权利要求
1.一种用基因芯片进行核酸分子杂交的方法，包括对液相样品进行变性处理，并使之与固相探针进行分子杂交，其特征是液相样品在与固相探针进行杂交过程中，反复进行加热、降温处理，并使之在杂交池与变性池之间流动。
2.如权利要求1所述的方法所用的装置，包括基因芯片(1)，该基因芯片(1)有芯片介质片(2)，该芯片介质片(2)的探针面处于杂交池(4)中，杂交池(4)通过通道(5)与变性池(8)连通，该变性池(8)和杂交池(4)的下方分别设置变温器(11)和恒温器(6)。
3.如权利要求2所述的装置，其特征是所述的杂交池(4)为长方体形或圆弧体形。
全文摘要
一种用基因芯片进行核酸分子杂交的方法,其特征是液相样品在与固相探针进行杂交过程中,反复进行加热、降温处理,并使之在杂交池与变性池之间流动。所用装置的芯片介质片的探针面处于杂交池中,杂交池通过通道与变性池连通,该变性池和杂交池的下方分别设置变温器和恒温器。本发明的优点是减少液相样品中双链杂交分子的形成,增加固相杂交分子的数量,从而提高信号强渡和分子检测的灵敏度。
文档编号C12Q1/68GK1354260SQ0012934
公开日2002年6月19日 申请日期2000年11月22日 优先权日2000年11月22日
发明者吴昌, 吴明 申请人:吴昌, 吴明