护肤用口服组合物的制作方法

专利名称：护肤用口服组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种护肤用口服组合物，以及该组合物的作为食品和药品的用途。
背景技术：
如今，社会上对于美白或美肤的关心正在提高，随之而来，各种以美白/美肤等为目的的护肤用制品正在被开发。这些护肤用制品大多是被直接用于皮肤。
但是，当外用于皮肤时，护肤的效果只能在已涂布的局部部分有所体现，对于需要进行全身护肤的人而言不适合。进而，在向美容上特别关注的脸等部分实施护肤时，出汗或物理摩擦等会引起护肤效果的降低或消失，所以需要每隔一段短时间就重复涂布，这很不方便。所以，作为美容食品、保健食品或功能性食品，通过口服来进行护肤的制品也正在被开发。
开菲乳粒(也被称为酸乳酒曲)是一种被称为开菲乳(Kefir)的高加索地区等传统发酵乳的种菌(引子(starter))。近年来，开发了利用该开菲乳的化妆品。例如，在专利文献1中，记载了一种具有皮肤美白效果和活性氧清除效果的化妆品，其特征在于，配合了从开菲乳粒分离的乳乳杆菌(ラクトバチルス属乳酸菌)的菌体提取物。另外，在专利文献2中，记载了一种具有皮肤美白效果而且安全的化妆品，其特征在于，接种从开菲乳(Kefir)粒分离的酵母(Saccharomyces)属酵母并进行培养，从得到的培养液除去酵母，由此调制发酵液，配合如此制成的发酵液而成。在专利文献3中，记载了一种除去斑痕、雀斑、黑痣等的化妆品，其特征在于，配合开菲乳粒的培养上清。
但是，这些化妆品直接应用于皮肤，通过口服开菲乳是否可以达到良好的护肤效果还不清楚。
专利文献1特开平5-163134号公报专利文献2特开平7-10734号公报专利文献3国际公开第01/019324号手册发明内容本发明的目的在于，提供一种护肤措施，该护肤措施即使通过口服经常使用也无副作用，可以发挥全身效果，而且出汗或摩擦不会使效果降低。
本发明人等进行了潜心研究，结果发现通过口服开菲乳菌发酵乳可以发挥美白/美肤效果，从而完成了本发明。
即，本发明涉及一种含有开菲乳菌发酵乳的护肤用口服组合物、以及该组合物作为食品和药品的用途。
另外，本发明还涉及一种为了护肤而使用上述口服组合物的方法。
进而，本发明还涉及一种为了制造护肤用口服组合物的、使用开菲乳发酵乳的方法。
通过本发明，可以得到护肤用口服组合物。本发明使用的开菲乳菌发酵乳由于是天然来源品，在本质上是食用的，所以可以通过口服安全地经常使用。另外，本发明的组合物由于可以口服使用，所以可以得到全身效果，且出汗或摩擦不会使其效果降低。
具体实施例方式
在本发明中使用的开菲乳菌发酵乳是指开菲乳和开菲乳样发酵乳、以及它们的混合物。在本发明中使用的开菲乳菌发酵乳优选为开菲乳。
在本发明中使用的开菲乳是指将开菲乳粒作为种菌使用而得到的发酵乳。
开菲乳粒是指乳酸菌与酵母共生的块菌、即天然的固定化微生物共生体。共生是指异种生物在位置/地理方面保持稳定的紧密关系而生活的现象。
就在本发明中使用的开菲乳粒而言，只要是被用作开菲乳的种菌的开菲乳粒，就没有特别限制。例如，使用在高加索地区被广泛饮食的开菲乳的种菌即可。
在本发明中使用的开菲乳粒是乳酸菌和酵母的共生体，在这一点上，与乳酸菌和酵母简单地混合在一起的情况不同。
本发明的开菲乳粒除了菌以外，例如还可以含有粘性多糖类(酸乳酒胞外多糖等)且其含量为开菲乳粒的总量的50～55％。
另外，在开菲乳粒内共生的菌通过受到彼此向对方分泌的细菌素等物质的作用等，与单独或混合在一起的同种菌相比，生命力和有效成分分泌能力优良。
可以通过下述方法，区别在本发明的开菲乳粒内共生的菌、与乳酸菌和酵母混合在一起的菌。
在适用了通常用于对乳中的抗生素进行检测的盘(disc)法或杯封(cup)法等的试验中，与简单地混合在一起的乳酸菌和酵母相比，在本发明的开菲乳粒内共生的菌相对大肠杆菌群等显示出优良的抗菌活性。上述的盘法例如被记载于McGroarty，J.A.和Reid，G.1988.Detection of alactobacillus substance that inhibits Escherichia coli.Can.J.Microbiol，34974-978中。
在本发明中使用的开菲乳粒，例如可以从ライセンスイントルグ公司(俄罗斯)等得到。在本发明中，例如优选使用依据特开昭62-83842中记载的方法而活化的开菲乳粒。
另外，在本发明中，也可以将利用常用的方法从开菲乳分离得到的例如培养粉(culture powder)用作开菲乳粒。这样的培养粉等在ウイズバイ公司(德国)、リョ一サン公司(加拿大)和ロ一ゼル公司(加拿大)等有售。
本发明的开菲乳，可以使用日本Kefir公司出售的开菲乳。或者，开菲乳也可以按照常用的方法例如特开昭62-83842号公报和特开2000-166467号公报中记载的方法来制作。例如，可以将开菲乳粒用作种菌，使动物乳、豆乳或米乳或它们的混合物，或者它们的脱脂乳、加工乳、调配乳或乳制品等在25℃下发酵24小时得到。
在上述开菲乳的制造中，作为动物乳，例如可以使用将牛、水牛、马、羊或山羊等的乳，作为豆乳，例如可以使用大豆等的发酵产物或乳化物，作为米乳，例如可以使用白米乳或粗米乳等。
另外，本发明也可以使用在豆乳中添加发酵助剂例如酪蛋白的酶分解物和来源于乳的矿物质再使其发酵而成的开菲乳。或者，通过如下所示的方法得到的发酵产物也优选作为本发明的开菲乳。
工序1)相对已杀菌的豆乳配合物100g，接种开菲乳粒0.15～15g(优选为0.3～10g，更优选为0.5～4.5g)；工序2)使其在5～30℃(优选为15～25℃，更优选为18℃～23℃)下发酵8～27小时，和/或直至酸度达到0.55～1.50(优选为0.60～1.20，更优选为0.65～0.90)。
其中，在该发酵中，也可以使用以如下所述的方式处理开菲乳粒而得到的种菌。
工序a)相对已杀菌的牛乳100g，接种0.15～15g(优选为0.3～10g，更优选为0.5～4.5g)的开菲乳粒；工序b)在5～30℃(优选为15～25℃，更优选为18℃～23℃)下培养，调制种菌。
在本说明书中称“酸度”时，除了特殊情况以外，是指乳酸酸度。该乳酸酸度可以通过将1％酚酞溶液作为指示剂，用1/10N NaOH进行中和滴定，由需要的1/10NNaOH将食品中含有的酸换算成乳酸量而求得。
如果经过必要的时间或者达到必要的酸度，则冷却至5～2℃，停止发酵的进行。
除了豆乳或已加水的豆乳以外，在上述工序1中使用的豆乳配合物也包括发酵助剂。通过该助剂，使豆乳配合物的组成接近牛乳的组成为好。作为在本发明中使用的助剂，可以单独或组合使用市售的发酵助剂例如在制造酸乳酪(yogurt)、干酪等时使用的发酵助剂，优选含有从Ca、P、Fe、Na、K、Mg、Cl、磷酸盐和乳糖中选择的成分的1或2种以上，更优选至少含有P、Fe、K、Cl和乳糖或者全部含有这7种成分。各成分的添加量可以依据豆乳配合物的成分、用于发酵的菌种类等，在各种范围内进行设定，而豆乳配合物100g中的优选大概含量(g)分别为Ca 0.005以上，更优选为0.5以下；P(作为无机磷)0.009以上，更优选为0.9以下；Fe 0.001以上，更优选为1以下；Na 0.006以上，更优选为0.6以下；K0.001以上，更优选为1以下；Mg 0.0007以上，更优选为0.07以下；Cl 0.008以上，更优选为0.8以下；乳糖0.01以上，更优选为50以下。
可以用于本发明的助剂，也可以含有乳清(whey)(例如在制造干酪时产生的乳清)浓缩物。表1表示发酵助剂的例子。
表1.
发酵助剂的例子

豆乳配合物根据需要可以含有动物性蛋白质，优选胨；蛋白质水解低分子混合物。作为动物性蛋白质和胨，可以使用市售的物质。
在本发明中使用的开菲乳样发酵乳可以将乳酸菌和酵母混合在一起的产物用作种菌，来代替开菲乳粒，通过与上述开菲乳粒相同的方法来制造。该乳酸菌和酵母可以从开菲乳粒离析/培养而得到，也可以使用不是来源于开菲乳粒的乳酸菌和酵母。
就本发明的开菲乳菌发酵乳而言，作为种菌，也可以使用使上述开菲乳粒，和非来源于开菲乳粒的乳酸菌、酵母或乙酸菌进行混合的产物。
在本发明中，开菲乳菌发酵乳在形态上没有特别限制，可以使用液状的发酵乳，但也可以使用固体特别是粉末。尤其在是粉末的情况下，用常用的冷冻干燥制法得到的开菲乳，是在直接维持发酵乳的组成的情况下被浓缩，所以是有利的。
作为上述乳酸菌，例如可以举出乳酸杆菌(Lactobacillus)或乳酸球菌等。
作为乳酸杆菌，例如可以举出马乳酒样乳杆菌(Lactobacilluskefiranofaciens)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、高加索酸奶乳杆菌(Lactobacillus kefiri)、或者短乳杆菌(Lactobacillus brevis)等。
另外，作为乳酸球菌，例如可以举出乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)，粪肠球菌(Enterococcus faecalis)，乳链球菌(Streptococcus lactis)，乳脂链球菌(Streptococcus cremoris)，双乙酰乳链球菌(Streptococcusdiacetylactis)，肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)、特别是肠膜明串珠菌葡聚糖亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp dextranicum)，或者肠膜明串珠菌乳脂亚种(Leuconostoc cremoris)等。
作为上述酵母，例如可以举出乳糖发酵性酵母或乳糖非发酵性酵母。
作为乳糖发酵性酵母，例如可以举出马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)、特别是马克斯克鲁维酵母马克斯变种(Kluyveromyces marxianus var.marxianus)或者马克斯克鲁维酵母乳酸变种(Kluyveromyces marxianus var.Lactis)，乳酒假丝酵母(Candita kefyr)，或者Brettanomyces anomalus等。
另外，作为乳糖非发酵性酵母，例如可以举出单孢酵母(Saccharomyces uniporous)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、霍氏假丝酵母(Candita holmii)、或者Saccharomyces unisporaqs等。
在本发明中的开菲乳粒或制造用于开菲乳样发酵乳时的种菌，可以以任意组合含有上述菌，优选含有乳酸菌10～15种和酵母6～10种，更优选含有乳酸杆菌7种和酵母10种。本发明的开菲乳粒或制造开菲乳样发酵乳时的种菌，可以进一步含有乳酸球菌7种。
酒本发明的开菲乳粒或制造开菲乳样发酵乳时的种菌而言，作为乳酸菌，优选含有马乳酒样乳杆菌、高加索酸奶乳杆菌、短乳杆菌和肠膜明串珠菌4种；作为酵母，含有乳酒假丝酵母、霍氏假丝酵母或者Saccharomycesunisporaqs中的1种以上、特别是3种。
本发明的开菲乳粒或制造开菲乳样发酵乳时的种菌，可以根据情况进一步含有乙酸菌。
在用于本发明的开菲乳菌发酵乳中含有的上述菌，可以是活菌，也可以是死菌。另外，本发明的开菲乳菌发酵乳也可以含有活菌和死菌双方。
本发明的组合物可以含有能够用于护肤的成分，例如植物油、类胡萝卜素、抗氧化物质、维生素、氨基酸、矿物质、胶原、软骨素、硫酸软骨素、弹性蛋白、透明质酸、葡糖胺、寡糖、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、亚油酸、亚麻酸、熊果苷、曲酸、胎盘(placenta)、Rucinol、糅花酸、植物性神经酰胺和角鲨烯等磷脂，以及抗炎药等。优选为胶原、软骨素、透明质酸、胎盘以及植物性神经酰胺和角鲨烯等磷脂。
这些成分可以是合成品或者天然来源品，另外，在是天然来源时，可以是粗提取物，也可以为精制物。
另外，在本发明中，可以单独使用上述所示的成分，也可以并用2种以上。
本发明中使用的植物油，可以通过压榨等从植物的种子得到。例如鳄梨油、亚麻仁油、扁桃油、紫苏油、橄榄油、红花油、小麦胚芽油、芝麻油、米糠油、紫苏子油、芝麻油、大豆油、玉米油、杏仁油、棕榈油、葵花子油、荷荷芭油、棉籽油、葡萄籽油以及月见草油等。优选为红花油、小麦胚芽油和大豆油等。在本发明中，对植物油的提取方法和精制方法没有特别限定。另外，本发明的植物油可以为粗提取物，也可以为精制物。进而，在本发明中，上述植物油可以单独使用，也可以并用2种以上。
作为可以用于本发明的类胡萝卜素，例如可以举出类胡萝卜素烃、以及胡萝卜醇(叶黄素类)等。
上述类胡萝卜素烃例如为β-胡萝卜素和菌脂色素(番茄红素)等，优选为β-胡萝卜素。另外，上述胡萝卜醇例如为叶黄素、玉米黄质、隐黄素、角黄素、辣椒黄素、α-皮黄素(α-ドラデキサンチン)、海胆紫酮、甲壳黄素和tunaxanthin(ツナキサンチン)等，优选为叶黄素、玉米黄质，特别优选为叶黄素。
另外，这些类胡萝卜素优选为天然来源品。例如优选含有叶黄素的万寿菊提取物、特别优选为来自于万寿菊的花瓣的提取物。
在本发明中，这些类胡萝卜素可以单独使用，也可以并用两种以上，例如可以并用β-胡萝卜素和叶黄素。
作为上述抗氧化物质，可以举出维生素C、维生素E、花色素苷和聚苯酚等。优选为维生素C和维生素E。
这些抗氧化物优选为天然来源品。例如优选含有维生素E的大豆提取物，特别优选是含有维生素E的大豆油。
在本发明中，这些抗氧化物可以单独使用，也可以并用两种以上。
作为上述维生素，例如可以举出维生素A油、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酰胺、泛酸钙、维生素C、维生素D2、维生素E和维生素K等，优选为维生素B2等。本发明的组合物可以单独含有这些维生素，也可以含有两种以上。
作为上述矿物质，可以举出铜、锌、硒、钙、锰、钾和铁等。本发明的组合物可以单独含有这些维生素，也可以含有两种以上。
作为上述氨基酸，可以举出色氨酸、苏氨酸和蛋氨酸等。本发明的组合物可以单独含有这些维生素，也可以含有两种以上。
就本发明的组合物而言，只要不损坏本发明的效果，也可以含有赋形剂、甜调味品、酸调味品、增粘剂、香料、色素、乳化剂和其它在食品中通常使用的原料。
就本发明的组合物而言，作为护肤用，可以用于肌肤的修整。例如可以用于美白用和美肤用等。
美白用例如是指为了使肌肤变美变白，具体地说，为了没有色斑即没有斑痕、雀斑，不灰暗、肤色美好而使用。因而，本发明的组合物例如可以用于烧伤的防止/改善或者斑痕/雀斑的预防/治疗等。
美肤用例如是指为了给皮肤带来张力、光泽、柔软、光滑、透明感，使肌理细致而且齐整而使用。因而，就本发明的组合物而言，例如可以用于防止/改善由老化、紫外线暴露、内分泌平衡的变化和活性氧损伤等导致产生的皱纹或松弛，提高皮肤弹性，皮肤保湿，防止/改善粉刺或小疙瘩，另外还用于防止/改善皮肤变粗糙等。
在本发明中，也可以通过将用于上述护肤用途的内容显示在本发明的口服组合物的主体、包装、说明书或宣传物等中，与以往的开菲乳菌发酵乳进行区别。在这里，主体是指将本发明的口服组合物直接装入的容器，包装是指包裹该容器的纸或箱子等，说明书是指说明本发明的口服组合物的文书，宣传物是指用于促销本发明的口服组合物的文书。
本发明中的组合物可以用作食品，特别是可以用作以护肤等为目的的保健食品、功能性食品、健康辅助食品、特定保健用食品、美容食品和营养辅助食品(补充)。这些食品例如可以为茶和汁液等饮料水；冰激凌、果冻、饴糖、巧克力和口香糖等形式。另外，也可以为液剂、粉剂、粒剂、胶囊剂或片剂等形式。
另外，本发明中的组合物可以用作医药，例如可以用于预防或治疗斑痕/雀斑。这些药品例如以片剂、包衣片、糖衣片、硬或软明胶胶囊剂、液剂、乳胶剂或悬浮剂的形式经口给药。
对本发明中的组合物的摄取量没有特别限制，可以根据剂型以及使用者或患者的年龄、体重和症状适当选择。例如作为成人每日有效成分量为开菲乳0.3g～9g，优选为2～6g，更优选为4g～6g的经口摄取。另外，摄取期间可以根据使用者或患者的年龄、症状任意决定。
下面显示本发明的实施例，但本发明不被这些实施例所限定。
实施例针对大肠杆菌群的抗菌活性使用含有马乳酒样乳杆菌、高加索酸奶乳杆菌、短乳杆菌、马克斯克鲁维酵母、乳酒假丝酵母、霍氏假丝酵母和Saccharomyces unisporaqs的开菲乳粒(从日本Kefir公司购入)。
按照在McGroarty，J.A.和Reid，G 1988.Detection of a lactobacillussubstance that inhibits Escherichia coli.Can.J.Microbiol，34974-978中记载的方法，比较开菲乳粒中生存的菌与非开菲乳来源的菌相对大肠杆菌群的抗菌活性。首先，使用灭菌药签(swab)在BYE板培养基上均一地播种模式种(Escherichia coli)的18小时培养液的1白金圈量。接着，使检验抗菌活性的对象的菌培养液5μl渗入到滤纸盘(直径6mm)中。将该盘放在上述BYE板培养基上的大致中央部。接着，通过在4℃下孵育该BYE板培养基3小时，使已渗入到盘中的菌培养液扩散到培养基中。接着，在37℃下培养18小时之后，检验盘周边的阻止带。
结果可见，在开菲乳粒中共生的菌与非开菲乳粒来源的同种菌相比，更强烈地抑制大肠杆菌群的生育，显示出出色的抗菌活性。
开菲乳MSL的调制对在牛乳中添加脱脂奶粉调配而成的调配乳进行杀菌，然后冷却，将上述开菲乳粒作为种菌接种到其中，在25℃下使其发酵24小时，得到发酵乳。将该发酵乳冷冻干燥，得到开菲乳MSL的粉体。
开菲乳MSD的调制除了在冷冻干燥之后进行杀菌处理以外，与上述的开菲乳MSL一样，得到开菲乳MSD的粉体。
就上述开菲乳MSL和开菲乳MSD而言，总全固体成分均为96～98％，蛋白质为22～25％、脂质为9.0～11％、糖为54～55％、灰分为5.2～5.8％、能量为390～417kcal。另外，在开菲乳MSL中含有的活菌数中，乳酸菌为108个/g以上，酵母为105个/g以上。
豆乳发酵产物调制例1在达到80℃的温度下对豆乳(マルサン公司制)1013g进行杀菌。在其中接种开菲乳粒(从日本Kefir公司购买)50g，在20℃下培养。在接种19小时后形成柔软的卡片，酸度为0.40。接种24小时后，酸度为0.50。
豆乳发酵产物调制例2(1)使用开菲乳粒的种菌的调制在90℃达温杀菌的牛乳中，接种高加索地区的开菲乳粒(从日本Kefir公司购买)1.5％(重量比)，在20℃下培养20小时，得到种菌。
(2)豆乳发酵物的调制在达到70℃的温度下对豆乳(日本Beans公司制)900g进行杀菌，冷却(10℃)。另一方面，对将表1的组成的助剂34g、胨2g溶解于水64g而成的产物进行杀菌，杀菌后加到豆乳中。接种上述调制得到的种菌1.5％(重量比)，在20℃下培养。
接种14小时后，形成非常坚硬的卡片。接种22小时后冷却。表2显示酸度的变化。
表2

豆乳发酵产物调制例3(1)种菌的调制向90℃达温杀菌之后的各牛乳160g中，分别接种2.5g开菲乳粒(从日本Kefir公司购买)，在20℃下培养20小时。良好地形成卡片。接种24小时后冷却。
(2)豆乳发酵物的调制在75℃下对以表3、4的比例加水后的豆乳(日本ビ一ンズ公司制；BX 13.1)进行杀菌5分钟。另一方面，对助剂(组成与表1相同)和市售的胨分别进行杀菌，添加到水化豆乳中，在17℃下接种上述调制而成的种菌各1.5％(重量比)，在20℃下培养。
表3配合A总量2kg份量

表4配合B总量2kg份量

接种19小时后，各自都形成卡片，但均比在豆乳发酵产物调制例3中得到的卡片软。接种24小时后冷却。表5表示各酸度。
表5

豆乳发酵产物调制例4以通常的方法对含有表6的豆乳(マルサン公司制未调制、BX 10.6)的配合物进行杀菌处理。
表6配合物(BX 11.0)

接种与豆乳发酵产物调制例3一样进行调制而成的种菌1.5％，在21℃下培养。
在接种19小时后，形成柔软而良好的卡片。此时酸度为0.75。
对得到的发酵产物进行加热，在加热过程中，四面八方的液面上升，隆起到液量的约1.5倍，发生凝固。但是，与乳蛋白质的凝固不同，会通过冷却而消失。液面也恢复。即使不是另外对水化豆乳和助剂液进行杀菌，也没问题。
豆乳发酵产物调制例5(豆乳发酵物180kg的制造)(1)种菌的调制1)向已90℃达温杀菌的牛乳接种高加索地区的开菲乳粒(从日本Kefir公司购买)1.5％(重量比)。
2)在20℃下培养20小时(酸度0.78)。
(2)豆乳发酵物的调制1)向豆乳(日本ビ一ンズ公司制BX12.8)150kg中加水20kg(BX11.1)。在80℃下杀菌5分钟。
2)另一方面，对将表1的助剂1.9kg(终浓度1.1％)、胨0.36kg(终浓度0.2％)溶解于水10kg而成的产物进行80℃杀菌5分钟。
3)在使豆乳/水-混合物冷却到25℃之后，加入助剂/胨/水-混合物，进而接种上述调制成的种菌3kg，开始培养(24℃)。
4)接种18小时后(23.5℃)，形成良好的卡片。这比在豆乳发酵产物调制例4中形成的卡片略硬。搅拌(22℃)。
接种19小时之后，酸度为0.60，接种20小时之后，酸度为0.72。对得到的发酵产物进行85℃杀菌5分钟。
通过通常的方法冷冻干燥发酵产物，得到淡黄色的粉末。在粉末中完全感觉不到豆乳独特的味道。
试验食物1的调制按照如表7所示的组成调制试验食物1和2。
表7

对人的皮肤的效果试验1.被试验者被试验者为31～40岁的健康女性10名，作为自觉症状，皮肤干燥和皮肤变粗糙、或有粉刺肌肤。在试验期间，被试验者没有使用过试验食物1和2以外的对肌肤有效果的药品、外用药、保健食品。
2.试验方法(1)试验食物的摄取方法使被试验者与水一起同时摄取试验食物1或试验食物2中的任意一种，试验食物1次2g、1天3次、摄取28天。
(2)紫外线诱导色素沉着的检测首先，向被试验者的一个上臂部内侧照射最小红斑量的紫外线，其14天后和28天后用Megusa(メグザ)meter和色差计测定黑色素值、红斑(erythema)值和L值。接着，开始摄取试验食物，并持续摄取28天。在试验食物摄取开始时，向与上次照射紫外线不同的上臂部内侧照射与上次相同的最小红斑量的紫外线，在其14天后和28天后用Megusameter和色差计测定黑色素值、红斑值和L值。
此外，紫外线的照射量即使相同，由于红斑的出现形式因人而异，所以在试验开始前一天照射紫外线，在第二天的试验开始时判定被试验者出红斑的照射量，将其1.5倍量设为上述的最小红斑量。
(3)皱纹的测定在摄取试验食物之前，将外眼角上的皱纹作为复制物(replica)，接着，开始摄取试验食物，持续摄取28天，在其第28天再次将外眼角上的皱纹作为复制物。从一定方向(30℃)向该复制物照射并行光，对产生的阴影进行图像处理，由此算出阴影面积和其长度。同样从标准尺度(scale)算出阴影面积和其长度，补正外眼角皱纹复制物的数值。从这些数值算出皱纹面积率、最大皱纹平均深度和最大皱纹最大深度。
作为上述标准尺度，使用从0.2mm、0.4mm、0.6mm、0.8mm、1.0mm的各深度的铸模制作的复制物。
(4)皮肤的粘弹性(皮肤隆起力学特性)的测定在试验食物摄取前，使Cutometer的探头密合于前臂部内侧的皮肤表面，通过施加一定的负压，以被吸引到探头内的皮肤的变化测定皮肤的粘弹性。接着，开始摄取试验食物，持续摄取28天，在其第28天再次如上所述地测定皮肤的粘弹性。
(5)角质水分量的测定在摄取试验食物之前，通过使Comeometer的探头密合于前臂部内侧的皮肤表面，装置内的微处理器读取探头内的开关信息和电的流动的测定时间，用登录了这些信息的校正数据进行评价，从而来测定角质水分量。接着，开始摄取试验食物，持续摄取28天，在其第28天再次如上所述地测定角质水分量。
(6)肠内细菌检查在试验食物的摄取前和摄取结束之后(开始摄取的第28天)，按照通常的方法测定大便中的双歧杆菌的菌数。
(7)调查方法在试验开始时对被试验者进行关于生活习惯的调查，接着，在开始摄取试验食物之前、摄取后第14天和摄取后第28天进行关于肌肤的调查。
(8)日志对被试验者，将在摄取试验食物期间的每日的饮食、身体状况和试验食物的摄取等记入到日志中。
(9)测定条件上述测定全部是在一定的室内条件(温度20℃、湿度60％以下)下、洗脸后约1小时后进行的。
3.结果
(1)美白效果(紫外线诱导色素沉着的抑制效果)将结果显示于表8。
黑色素关于在摄取试验食物之前和摄取中的各期间的、将紫外线照射前的黑色素值设为100时的黑色素INDEX值(10例被试验者的平均值±标准差)，在第14天，摄取试验食物之前的期间显示101.74±1.33％，摄取试验食物中的期间显示99.74±1.40％，由于摄取试验食物而降低了2.0％。在第28天，摄取试验食物之前的期间显示101.24±1.02％，摄取试验食物中的期间显示99.21±1.02％，由于摄取试验食物而降低2.03％，有显著差异(p＜0.01、t检验)。
红斑关于在摄取试验食物之前和摄取中的各期间的、将紫外线照射前的红斑值设为100时的红斑INDEX值(10例被试验者的平均值±标准差)，在第14天，摄取试验食物之前的期间显示102.39±1.52％，摄取试验食物中的期间显示101.50±1.52％，由于摄取试验食物而降低了0.89％。在第28天，摄取试验食物之前的期间显示102.64±3.02％，摄取试验食物中的期间显示101.51±1.89％，由于摄取试验食物而降低1.13％。
L值关于在摄取试验食物之前和摄取中的各期间的、将紫外线照射前的L值设为100时的L-INDEX值(10例被试验者的平均值±标准差)，在第14天，摄取试验食物之前的期间显示97.74±1.97％，摄取试验食物中的期间显示113.69±3.51％，由于摄取试验食物而增加15.95％，有显著差异(p＜0.01、t检验)。在第28天，摄取试验食物之前的期间显示97.23±2.57％，摄取试验食物中的期间显示102.00±3.33％，由于摄取试验食物而增加4.77％，有显著差异(p＜0.01、t检验)。
表8

测定值表示10例被试验者的平均值±标准差。
**表示p＜0.01。
(2)抗皱效果皱纹面积率皱纹面积率在10例被试验者中有3例可见通过摄取试验食物而降低3.2～11.8％，平均降低7.83％。
最大皱纹平均深度就最大皱纹平均深度而言，由于难以测定小皱纹之类的皱纹，所以能够测定的只有10例被试验者中的6例。其中的4例可见摄取试验食物引起的改善，最大改善135.3μm，平均改善47.7μm。
最大皱纹最大深度在可以测定最大皱纹平均深度的6例中的5例，可见摄取试验食物引起的改善，最大改善为70.7μm，平均改善45.98μm。
(3)皮肤的粘弹性提高效果脸部比较摄取试验食物之前和摄取之后，可见改善的是10例被试验者中的4例。
臂部比较摄取试验食物之前和摄取之后，可见改善的是10例被试验者中的4例。
(4)保湿效果(角质层水分量测定的结果)脸部
比较摄取试验食物之前和摄取之后，可见改善的是10例被试验者中的7例。就10例的角质层水分量(平均值±标准差)而言，相对于摄取之前的51.83±63.87μs，摄取后为63.87±10.68μs，改善了12.04μs，上升有意义(p＜0.05、t检验)。
臂部比较摄取试验食物之前和摄取之后，可见改善的是10例被试验者中的10例，就10例的角质层水分量(平均值±标准差)而言，相对于摄取之前的33.93±6.76μs，摄取后为40.33±7.64μs，改善了6.4μs，上升有意义(p＜0.01、t检验)。
(5)肠内细菌检查的结果大便中双歧杆菌(Bifidobacterium spp.)比较摄取试验食物之前和摄取之后，在10例被试验者中有5例可见双歧杆菌菌的增加，最大从6.0×108增加到4.1×109个/g大便，增加6.8倍，10例的菌数(平均值±标准差)从3.4×109增加到6.4×109个/g大便，增加2.12倍。
(6)调查的结果根据被试验者本人的自我感觉，对和润泽、张力、弹性、肌理、透明感和皱纹有关的肌肤的状态进行评价。将不能自我感觉各状态的情况以-5～-1分之间的分数进行评价，将能够自我感觉的各状态的情况以1～5分之间的分数进行评价。表9表示10例被试验者的平均值。在用10例的平均值来观察时，在任何状态下与摄取试验食物之前进行比较，摄取后第14天和第28天的分数都增加，肌肤的润泽(摄取之前和摄取之后第28天)、张力(摄取之前和摄取之后第14天)、肌理(摄取之前和摄取之后第14天)、透明感(摄取之前和摄取之后第14天、摄取之前和摄取之后第28天)存在显著差异(p＜0.05，符号检验)。
表9基于本人的自我感觉的肌肤的状态的分数

*表示p＜0.05(符号检验)。
(7)饮用后的普查被试验者在摄取后的感受包括“干燥的肌肤出现润泽”、“大便变得非常通畅，腹胀的感觉消失了”、“女儿说我的肌肤有了光泽”、“大便的次数增加了”、“与摄取之前相比，肌肤的状态变好了”等。
4．总结对于试验食物1和2的美白效果，可见色素沉着的抑制/早期改善，也可见皱纹的改善。对于皮肤的粘弹性，脸部可见改善。对于保湿功能(角质层水分量)，脸部、臂部均可见改善。特别是保湿效果出色。
另外，对于肠内细菌，可见被称为有益菌的双歧杆菌的增加。
在试验食物1中，可见出色的美白效果和皱纹改善效果。另一方面，在试验食物2中，可见出色的保湿效果。
另外，上述调制而成的豆乳发酵产物也可见美白效果、皮肤的粘弹性方面的改善效果、保湿功能(角质层水分量)方面的改善效果、双歧杆菌菌增加效果。
权利要求
1.一种护肤用口服组合物，其中，含有开菲乳菌发酵乳。
2.根据权利要求1所述的口服组合物，其中开菲乳菌发酵乳是将开菲乳粒作为种菌使用而得到的发酵乳。
3.根据权利要求2所述的口服组合物，其中开菲乳粒是乳酸菌与酵母共生的菌块。
4.根据权利要求2或3所述的口服组合物，其中，开菲乳粒含有粘性多糖类。
5.根据权利要求4所述的口服组合物，其中，含有粘性多糖类为总量的50～55％。
6.根据权利要求4或5所述的口服组合物，其中，粘性多糖类为酸乳酒胞外多糖。
7.根据权利要求1所述的口服组合物，其中，开菲乳菌发酵乳是将乳酸菌与酵母混合在一起而成的产物用作种菌得到的发酵乳。
8.根据权利要求3～7中任意一项所述的口服组合物，其中，乳酸菌是从乳酸杆菌和乳酸球菌中选择的1种以上的菌。
9.根据权利要求8所述的口服组合物，其中，乳酸杆菌是从马乳酒样乳杆菌、干酪乳杆菌、高加索酸奶乳杆菌、和短乳杆菌中选择的一种以上的菌。
10.根据权利要求8或9所述的口服组合物，其中，乳酸球菌是从乳酸乳球菌、粪肠球菌、乳链球菌、乳脂链球菌、双乙酰乳链球菌、肠膜明串珠菌、和肠膜明串珠菌乳脂亚种中选择的一种以上的菌。
11.根据权利要求3～10中任意一项所述的口服组合物，其中，酵母是从乳糖发酵性酵母和乳糖非发酵性酵母中选择的一种以上的菌。
12.根据权利要求11所述的口服组合物，其中，乳糖发酵性酵母是从马克斯克鲁维酵母、乳酒假丝酵母、和Brettanomyces anomalus中选择的一种以上的菌。
13.根据权利要求11或12所述的口服组合物，其中，乳糖非发酵性酵母是从单孢酵母、酿酒酵母、霍氏假丝酵母、或者Saccharomyces unisporaqs中选择的一种以上的菌。
14.根据权利要求3～7中任意一项所述的口服组合物，其中，乳酸菌是马乳酒样乳杆菌、高加索酸奶乳杆菌、短乳杆菌、肠膜明串珠菌4种菌，酵母是从乳酒假丝酵母、霍氏假丝酵母和Saccharomycesunisporaqs中选择的一种以上的菌。
15.根据权利要求1～14中任意一项所述的口服组合物，其中，进一步使用乙酸菌作为种菌。
16.根据权利要求1～15中任意一项所述的口服组合物，其中，开菲乳菌发酵乳是使豆乳发酵得到的发酵乳。
17.根据权利要求1～15中任意一项所述的口服组合物，其中，开菲乳菌发酵乳是使牛乳发酵得到的发酵乳。
全文摘要
本发明的目的在于，提供一种护肤措施，该护肤措施即使经常口服也不会产生副作用，能够发挥全身效果，而且效果不会因出汗或摩擦而降低。本发明还提供一种含有开菲乳菌发酵乳的护肤用口服组合物，以及含有该组合物的食品或药品。
文档编号A23C9/123GK1842340SQ20048002442
公开日2006年10月4日 申请日期2004年8月25日 优先权日2003年8月26日
发明者德丸千之助, 德丸浩一郎, 崎山彻太郎 申请人:日本克非尔株式会社