一种对溃疡性结肠炎具有治疗作用的败酱草提取物的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种对溃疡性结肠炎具有治疗作用的败酱草提取物的制备方法及由 该方法制备的败酱草提取物的应用。
【背景技术】
[0002] 败酱草为败酱科多年生草本植物黄花败酱、白花败酱的根茎或带根全草，是一味 古老而常用的中药。败酱草具有清热解毒、排脓破瘀、活血化瘀之功效。临床常用于慢性胃 炎、胃食管反流、放射性直肠炎等。败酱草提取物的抑菌、抗病毒、降血脂及中枢抑制等作用 已有现代药理研究报道，但未见单独使用败酱草对溃疡性结肠炎治疗方面的报道。
[0003] 现有的中药提取物，普遍缺乏科学的提取方法，依然以传统的水煎、乙醇提取等常 规方法进行提取，药物中的杂质含量多，甚至含有对人体有害的成分，这严重影响了中药提 取物的疗效。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种对溃疡性结肠炎具有治疗作用的败酱草提取物的制 备方法。
[0005] 本发明所采取的技术方案是： 一种败酱草提取物的制备方法，包括如下步骤： 1) 将败酱草粉碎，加水浸提，将浸提液浓缩，得浓缩液； 2) 将浓缩液用水饱和正丁醇萃取，将萃取液合并，去除溶剂，得残渣； 3) 将残渣用水溶解，将溶液用聚酰胺树脂吸附，用水洗脱，收集水洗液，干燥，得干粉； 4) 将干粉溶解，将溶液用大孔吸附树脂吸附，用水洗脱，弃水洗液，再以30~95%乙醇 洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥即得败酱草提取物。
[0006] 作为上述制备方法的进一步改进，浓缩液的制备操作为：将败酱草粉碎，加药材体 积2~5倍量的水浸泡，浸泡时间0. 5~2h，再用药材质量6~14倍量的水提取1~3次， 每次提取0. 5~2小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成浓度为0. 5~Ig原药/mL的浓缩液。
[0007] 作为上述制备方法的进一步改进，残渣的制备操作为：取浓缩液用1~3倍体积的 水饱和正丁醇反复萃取1~3次，合并正丁醇萃取液，回收溶剂至干。
[0008] 作为上述制备方法的进一步改进，残渣与聚酰胺树脂的用量比为：Ig原药八1~ 3) g聚酰胺树脂。
[0009] 作为上述制备方法的进一步改进，干粉与大孔吸附树脂的用量比为：lg原药/ (1~3) g大孔吸附树脂。
[0010] 作为上述制备方法的进一步改进，大孔吸附树脂的型号为D101、D140、D141、AB-8 中的一种。
[0011] 作为上述制备方法的进一步改进，制备方法包括如下步骤： 1) 将败酱草粉碎，加药材体积2~3倍量的水浸泡，浸泡时间0. 5~2h，再用药材质量 8~12倍量的水提取1~2次，每次提取1~1. 5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成浓度 为0. 6~0. 9原药g/mL的浓缩液； 2) 取浓缩液用1~2倍体积的水饱和正丁醇反复萃取1~3次，合并正丁醇萃取液，回 收溶剂至干，得残渣； 3) 取残渣用水溶解成0. 6~0. 9g原药/mL的溶液，将溶液用聚酰胺树脂吸附，用水洗 脱，收集水洗液，干燥，得干粉； 4) 将干粉溶解成0. 6~0. 9g原药/mL的溶液，将溶液用大孔吸附树脂吸附，用水洗脱， 弃水洗液，再以55~75v/v%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥即得败酱草提取物。
[0012] -种治疗溃疡性结肠炎的组合物，其活性成分为败酱草提取物，败酱草提取物的 制备方法如上所述。
[0013] 优选的，组合物的剂型为口服制剂。
[0014] 优选的，口服制剂选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂。
[0015] 本发明的有益效果是： 本发明方法提取得到的败酱草提取物，主要含有黄花败酱皂苷A、黄花败酱皂苷B、黄 花败酱皂苷C、齐墩果酸、α-常春藤皂苷、常春藤皂苷等皂苷类成分，且这些有效成分 的总含量在50%到100%之间。该败酱草提取物作为唯一的活性成分，可升高溃疡性结肠 炎大鼠 SOD值，降低MDA值，降低MPO活性，从而清除氧自由基，减少过氧化脂质生成，减少 中性粒细胞浸润，改善或减轻结肠炎症状。同时能降低TNF-a、IL-I β水平，从而对TNBS 或乙醇法诱导的大鼠结肠炎有明显的改善作用，是现有技术所无法实现的，扩大了败酱草 使用范围。有望开发为新型的高效溃疡性结肠炎治疗药物。
【具体实施方式】
[0016] 下面结合实施例，进一步说明本发明的技术方案。
[0017] 以下实施例中所使用的败酱草药材购自广州市清平药材市场。
[0018] 实施例1 1) 将败酱草粉碎，加药材体积2倍量的水浸泡，浸泡时间0. 5h，再用药材质量12倍量 的水提取1次，提取1小时，滤过，滤液浓缩成浓度为〇. 6g/mL(相当于原药材）浓度的溶 液； 2) 取上述溶液用1倍体积的水饱和正丁醇萃取1次，收集正丁醇萃取液，回收溶剂至 干，得残渣； 3) 取残渣用水溶解成0. 6g/mL(相当于原药材）浓度的溶液，将该溶液用聚酰胺树脂以 水洗脱，收集水洗液，减压浓缩至干，得干粉； 4) 取干粉用水溶解成0.6g/mL(相当于原药材）浓度的溶液，用DlOl大孔吸附树脂以 水洗脱，弃去水洗液，再以55%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，稠膏干燥即得败酱草 提取物。
[0019] 利用紫外-可见分光光度法（以黄花败酱皂苷C为对照品）测得本实施例制得败 酱草提取物中皂苷类成分的总含量为67%。
[0020] 实施例2 1) 将败酱草粉碎，加药材体积3倍量的水浸泡，浸泡时间lh，再用药材质量8倍量的水 提取2次，每次提取1. 5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成浓度为0. 8g/mL(相当于原药 材）浓度的溶液； 2) 取上述溶液用2倍体积的水饱和正丁醇反复萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收溶剂 至干，得残渣； 3) 取残渣用水溶解成0. 8g/mL(相当于原药材）浓度的溶液，将该溶液用聚酰胺树脂以 水洗脱，收集水洗液，减压浓缩至干，得干粉； 4) 取干粉用水溶解成0.8g/mL(相当于原药材）浓度的溶液，用AB-8大孔吸附树脂以 水洗脱，弃去水洗液，再以75%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，稠膏干燥即得败酱草 提取物。
[0021] 利用紫外-可见分光光度法（以黄花败酱皂苷C为对照品）测得本实施例制得败 酱草提取物中皂苷类成分的总含量为54%。
[0022] 实施例3 1) 将败酱草粉碎，加药材体积2倍量的水浸泡，浸泡时间2h，再用药材质量9倍量的水 提取2次，每次提取1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成浓度为0. 9g/mL (相当于原药材） 浓度的溶液； 2) 取上述溶液用1倍体积的水饱和正丁醇反复萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收溶剂 至干，得残渣； 3) 取残渣用水溶解成0.9g/mL(相当于原药材）浓度的溶液。将该溶液用聚酰胺树脂 以水洗脱，收集水洗液，减压浓缩至干，得干粉； 4) 取干粉用水溶解成0.9g/mL(相当于原药材）浓度的溶液，用D140大孔吸附树脂以 水洗脱，弃去水洗液，再以65%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，稠膏干燥即得败酱草 提取物。
[0023] 利用紫外-可见分光光度法（以黄花败酱皂苷C为对照品）测得本实施例制得败 酱草提取物中皂苷类成分的总含量为72%。
[0024] 对比例1 1) 将败酱草粉碎，加药材体积2倍量的水浸泡，浸泡时间0. 5h，再用药材质量12倍量 的水提取1次，提取1小时，滤过，滤液浓缩成浓度为〇. 6g/mL(相当于原药材）浓度的溶 液； 2) 取上述溶液用1倍体积的水饱和正丁醇萃取1次，收集正丁醇萃取液，回收溶剂，稠 膏干燥即得败酱草提取物。
[0025] 利用紫外-可见分光光度法（以黄花败酱皂苷C为对照品）测得本实施例制得败 酱草提取物中皂苷类成分的总含量为18% (含量不到50% )。
[0026] 对比例2 将败酱草粉碎，加药材体积3倍量的水浸泡，浸泡时间lh，再用药材质量8倍量的水提 取2次，每次提取1. 5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩成稠膏，干燥、粉碎得败酱草提取 物。
[0027] 利用紫外-可见分光光度法（以黄花败酱皂苷C为对照品）测得本实施例制得败 酱草提取物中皂苷类成分的总含量为12% (含量不到50% )。
[0028] 对比例3 将败酱草粉碎，加药材体积2倍量的95%乙醇浸泡，浸泡时间2h，再