专利名称：普洱茶的提取物及提取方法
技术领域：
本发明涉及一种中药提取物及其制备，特别涉及普洱茶的提取物及其制备。
背景技术：
普洱茶是云南特有的地方名茶。是以云南原产地的大叶种晒青茶及其再加工而成 两个系列直接再加工为成品的生普和经过人工速成发酵后再加工而成的熟普，型制上又 分散茶和紧压茶两类；成品后都还持续进行着自然陈化过程，具有越陈越香的独特品质。普 洱茶是用优良品种云南大叶种的鲜叶制成，也叫作普洱散茶。其外形条索粗壮肥大，色泽乌 润或褐红，俗称象猪肝色。滋味醇厚回甘，具有独特的陈香味儿，有“美容茶”之声誉。普洱茶是惟一的后发酵型的茶，它的茶碱、茶多酚等对人体有害的物质在长期的 发酵过程中被分化掉了，因此品性温和，对人体不刺激，还能够促进新陈代谢，加速身体内 脂肪、毒素的消解和转化，现在困扰都市人的肥胖、三脂高等问题，普洱茶都能够起到很好 的缓解作用，如排毒、养胃、消炎、降低胆固醇、消脂去腻、美容减肥。普洱茶提取物属茶制品。为暗红褐色，溶于水，不溶于乙醇、甲醇、及三氯甲烷；普 洱茶提取物的主要化学组分，以干基或干物率计为茶多糖，茶褐素类，蛋白质，其余为极少 量的茶叶自身的物质如茶红素、茶黄素及水溶性果胶等。普洱茶提取物营养价值高，生理活 性物质丰富。中国专利200510010871公开了一种普洱茶提取物制备过程如下a.称取一定量的普洱茶，粉碎至20目，加入5-10倍体积的温度为80 90°C的蒸 馏水，加盖保温浸泡40分钟后过滤；b.滤渣用3-5倍体积的温度为80 90°C的蒸馏水浸泡30分钟后过滤；c.滤渣再用3倍体积的温度为80 90°C的蒸馏水浸泡30分钟后过滤；d.合并三次过滤的滤液，加入无水乙醇至乙醇浓度为50% 90%的范围进行沉 淀，静置24小时后进行过滤，收集沉淀物，进行真空低温干燥，真空低温为50 60°C，干 燥至水分含量约为5 11%即得普洱茶提取物。普洱茶中含有茶多糖15-45%，茶褐素 50-70%，蛋白质 4. 7-14. 0%等。以上普洱茶提取物制备方法耗醇量大，设备占用大，提取液直接过滤耗能又耗时， 本发明人在对普洱茶提取物进行研究过程中，采用新的分离技术，试验出一组新的普洱茶 提取物及其制备方法，这些普洱茶提取物具有疗效高，吸收好，质量稳定，同时制备方法分 离效果佳，工艺简单，操作方便，成本低廉，适合工业化生产。
发明内容
本发明提供一种普洱茶提取物。所述提取物含有的主要活性成分为茶多酚，茶多糖，茶褐素，咖啡因。各组分占提取物总重量的重量百分比为
5
茶多酚19-41%，茶多糖15-45%，茶褐素16-25%，咖啡因4_13%，其中四者重量 百分比之和小于100%。本发明的普洱茶提取物，制备方法如下取普洱茶超微粉碎粉，加水于75-98°C浸提1-4次，加水倍数8_30倍，浸提时间 1-3小时；提取和放料过程中连续搅拌，每次的提取浆料用离心机离心，合并离心液，离心 液自然或换热降温至30-55°C，10-30万分子量膜过滤，得膜过滤液和膜截留液；将膜截留 液浓缩至固含量为5-30%的浓缩液，浓缩液一次离心，一次离心液二次离心，将膜过滤液和 二次离心液单独或合并浓缩至比重1. 0-1. 4/55-65°C，浓缩膏干燥。优选的制备方法如下取普洱茶超微粉碎粉，加水于75-98°C浸提2-3次，加水倍数12_18倍，浸提时间 1-3小时；提取和放料过程中连续搅拌，每次的提取浆料用三足离心机离心，合并离心液， 离心液自然或换热降温至30-55°C，10-30万分子量膜过滤，得膜过滤液和膜截留液；温度 (70°C，将膜截留液减压浓缩至固含量为5-30%的浓缩液，浓缩液用三足离心机离心一 次，一次离心液用管式离心机离心二次离心，温度< 70°C，将膜过滤液和二次离心液单独或 合并浓缩至比重1. 13-1. 15/55-65°C，浓缩膏微波干燥、真空带式干燥，或喷雾干燥即可。本发明最优选的制备方法在本发明实施例中。本发明还包括用本发明的普洱茶提取物制备的药物组合物，所述药物组合物是用 上述普洱茶作为药物活性成分制备成的药物制剂。本发明的药物组合物，根据需要可以含有药物可接受的载体，其中普洱茶作为药 物活性成分，其在制剂中所占重量百分比可以是0. 1-99.9%，其余为药物可接受的载体。本 发明的药物制剂组合物，以单位剂量形式存在，所述单位剂量形式是指制剂的单位，如片剂 的每片，胶囊的每粒胶囊，口服液的每瓶，颗粒剂每袋，注射剂的每支等。本发明的药物组合物可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括片剂、糖衣片剂、 薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸 剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴 剂、贴剂。本发明的药物组合物，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充 剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。适用的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂。适宜的崩解剂包 括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠。适宜的润滑剂包括，例如硬 脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。可通过混合，填充，压片等常用的方法制备固体口服组合物。进行反复混合可使活 性物质分布在整个使用大量填充剂的那些组合物中。口服液体制剂的形式例如可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂， 或者可以是一种在使用前可用水或其它适宜的载体复配的干燥产品。这种液体制剂可含 有常规的添加剂，诸如悬浮剂，例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基 纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪，乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇一油酸酯或阿拉 伯胶；非水性载体(它们可以包括食用油)，例如杏仁油、分馏椰子油、诸如甘油的酯的油性 酯、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需
6要，可含有常规的香味剂或着色剂。对于注射剂，制备的液体单位剂型含有本发明的活性物质和无菌载体。根据载体 和浓度，可以将此化合物悬浮或者溶解。溶液的制备通常是通过将活性物质溶解在一种载 体中，在将其装入一种适宜的小瓶或安瓿前过滤消毒，然后密封。辅料例如一种局部麻醉 齐U、防腐剂和缓冲剂也可以溶解在这种载体中。为了提高其稳定性，可在装入小瓶以后将这 种组合物冰冻，并在真空下将水除去。本发明的药物组合物，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载 体，所述药物可接受的载体选自甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐 酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA 二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋 酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、 麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及 其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性 剂、聚乙二醇、环糊精、β -环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。本发明的药物组合物在使用时根据病人的情况确定用法用量，可每日服三次，每 次1-20剂，如1-20袋或粒或片，每剂Img-IOOOmgo 以下通过实验数据说明本发明的有益效果。普洱茶降糖、减肥功能考察实验1、试验材料1. 1试验动物=KKAy小鼠40只，雌性，7-8周龄，级别SPF级，体重33. 5士 1. 9g，由 中国医学科学院实验动物所提供。1. 2试剂与药品普洱茶提取物(简称茶粉)本发明实施例1，深褐色粉末，溶于水，溶解度好，避光。阳性药马来酸罗格列酮片1. 3实验仪器BI0SEN5030型血糖/乳酸分析仪日立7080全自动生化仪2.1实验方法2. 1空腹血糖测定方法所有动物均于商务九点开始禁食，禁食4h后取血，取血前Ih各组动物灌胃给药， 取血时剪尾取末梢血10ul，用BI0SEN5030型血糖/乳糖分析仪测定空腹血糖。2. 2分组及给药动物适应性喂养一周后按照2. 1方法测定空腹血糖，按照测定的空腹血糖值分层 随机分组。40只KKAy按照空腹血糖值分层随机分组，分成4组，模型组，阳性对照组，实验组。人群使用方案，人群拟使用剂量为3g/人/日，S卩0. 05g/kg/d,使用途径冲泡饮用。阳性对照组，每日给药1次，给药剂量1. 33mg/kg/日，口服灌胃给药。试验组动物供试品饮用量达到1. 5g/kgBff的剂量要求，并以此浓度的普洱茶代 替每日饮用水，连续给予4周。
2. 3试验步骤2. 3. 1动物体重及进食情况，粪便变化情况观察动物精神、活动、毛色、进食量、 饮水量及体重变化2. 3. 2空腹血糖测定给药前及给药后每周固定时间按照2. 1方法测定空腹血糖。2. 3. 3糖耐量实验实验第21天，动物按照2. 1方法测定空腹血糖后，灌服葡萄糖2. 5g/kg，分别于 0. 5h，lh、2h采血测定血糖值，计算曲线下面积(AUC)AUC = 0. 5X空腹血糖+0. 5h血糖 +1.5Xlh血糖+2h血糖。2. 3. 4血清电解质测定实验第22天时，动物禁食16h后摘眼球取血，分离血清，用XD685电解质分析仪测 测定血清K离子、Na离子、Ca离子浓度。2. 3. 5甘油三酯、总胆固醇测定；实验第29天时，动物禁食16h后摘眼球取血，分离血清，用全自动生化仪测定血清 甘油三酯、总胆固醇含量。3、试验结果3. 1动物体重，进食量变化试验结果实验期间试验动物状态良好，进食量、饮水量稳定。实验组按照给药量1. 5g/kg/日，连续自由饮用两周，进食量及体重均变化不大， 各组动物体重，进食量变化结果见表1，表2。表1动物体重变化情况(g)
权利要求
一种普洱茶提取物，其特征在于，所述提取物含有的主要活性成分为茶多酚，茶多糖，茶褐素，咖啡因，各组分占提取物总重量的重量百分比为茶多酚19 41％，茶多糖15 45％，茶褐素16 25％，咖啡因4 13％，其中四者重量百分比之和小于100％。
2.权利要求1的提取物，其特征在于，制备方法如下取普洱茶超微粉碎粉，加水于75-98°C浸提1-4次，加水倍数8-30倍，浸提时间1_3小 时；提取和放料过程中连续搅拌，每次的提取浆料用离心机离心，合并离心液，离心液自然 或换热降温至30-55°C，10-30万分子量膜过滤，得膜过滤液和膜截留液；将膜截留液浓缩 至固含量为5-30%的浓缩液，浓缩液一次离心，一次离心液二次离心，将膜过滤液和二次离 心液单独或合并浓缩至比重1. 01-1. 4/55-65°C，浓缩膏干燥。
3.权利要求1的提取物，其特征在于，制备方法如下取普洱茶超微粉碎粉，加水于75-98°C浸提2-3次，加水倍数12-18倍，浸提时间1_3小 时；提取和放料过程中连续搅拌，每次的提取浆料用三足离心机离心，合并离心液，离心液 自然或换热降温至30-55°C，10-30万分子量膜过滤，得膜过滤液和膜截留液；温度<70°C， 将膜截留液减压浓缩至固含量为5-30 %的浓缩液，浓缩液用三足离心机离心一次，一次离 心液用管式离心机离心二次离心，温度< 70°C，将膜过滤液和二次离心液单独或合并浓缩 至比重1. 13-1. 15/55-65°C，浓缩膏微波干燥、真空带式干燥，或喷雾干燥即可。
4.权利要求1的提取物，其特征在于，制备方法如下取普洱茶超微粉碎粉，加水于95°C浸提3次，加水倍数14倍，浸提时间2小时；提取 和放料过程中连续搅拌，每次的提取浆料用三足离心机离心，合并离心液，离心液自然至 50°C，20万分子量膜过滤，得膜过滤液和膜截留液；温度< 70°C，将膜截留液减压浓缩至固 含量为10%的浓缩液，浓缩液用三足离心机离心一次，一次离心液用管式离心机离心二次 离心，温度< 70°C，将膜过滤液和二次离心液合并浓缩至比重1. 14/60°C，浓缩膏微波干燥 即可。
5.含有权利要求1的提取物的药物组合物。
6.权利要求5的药物组合物，根据需要可以含有药物可接受的载体，其中普洱茶提取 物作为药物活性成分，其在制剂中所占重量百分比可以是0. 1-99.9%，其余为药物可接受 的载体。
7.权利要求5的药物组合物，是任何可药用的剂型。
8.权利要求1的提取物和权利要求5的组合物在制备治疗糖尿病的和减肥药物中的应用。
9.权利要求1的普洱茶提取物中有效成分的含量测定方法，步骤如下茶多酚含量测定方法酒石酸铁溶液称取硫酸亚铁1. 0g，酒石酸钾钠5. 0g，加水溶解并定容至IL， PH7. 5的磷酸缓冲液a液l/15mol/L的磷酸氢二钠溶液称取磷酸氢二钠23. 877g，加水溶解并稀释至IL ； b液l/15mol/L的磷酸二氢钾溶液称取经110°C烘干2h的磷酸二氢钾9. 078g，加水 溶解至IL ；取a液85mL和b液15mL混勻，即得ρΗ7· 5的缓汁液； 标准溶液的配制精确称取没食子酸乙酯250mg，溶于IOOmL水中作为母液，分别吸取母液2，4，6，8，IOmL 于IOmL容量瓶中，用不定容配制成IOOmL中含没食子酸乙酯50，100，150，200，250mg五种 不同浓度的标准溶液； 标准工作曲线的制作准确吸取的不同浓度的没食子酸乙酯标准溶液ImL和酒石酸铁试剂5mL，置于一系列 25mL的容量瓶中，用pH7. 5的缓冲液定容；用水代替没食子酸乙酯作为对照，用Icm的比色 杯，在540nm处测定吸光度；所测的吸光度与对应的没食子酸乙酯浓度绘制成标准工作曲 线.一入 ，供试液的制备与测定制备精确称取茶提取物200mg样品置于IOOmL烧杯中，加20 30mL90°C以上的沸水 溶解，冷却，移入IOOmL容量瓶中，定容、过滤，弃去最初的滤液约20mL，所剩滤液为供试液； 测定准确吸取供试液ImL，置25mL容量瓶中，加酒石酸铁溶液5ml，充分混勻，用 PH7. 5的磷酸缓冲液定容；以试剂空白液作参比，于540nm处测定吸光度； 结果计算根据标准工作曲线，求出相当于试样吸光度的没食子酸乙酯相应含量；茶多糖检验方法供试品溶液的制备取本品粉末约0. 2g，置IOml量瓶中，加水适量，超声20分钟溶解，冷却并加水至刻度， 摇勻；精密量取1ml，置IOOml量瓶中，加水稀释至刻度，摇勻，作为供试品溶液； 对照品溶液的制备取D-无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每Iml中含0. 2mg的溶 液，作为对照品溶液； 标准曲线的绘制分别精密吸取对照品溶液0. 0,0. 1,0. 2,0. 3,0. 4,0. 5ml分别置IOml具塞试管中，分别 加水至1. Oml，各精密加入5 %的苯酚溶液1. Oml，振摇混勻，加5. Oml硫酸，用微型漩涡混合 仪迅速振摇混勻，室温下放置30分钟，以第1管为空白，照紫外-可见分光光度法，在487nm 波长处测定吸光度；以吸光度(Y)和质量(X)作标准曲线，回归方程为 供试品溶液的测定精密吸取Iml供试品溶液，按照标准曲线的绘制项下，自“精密加入5%的苯酚溶液 1. 0ml”起，同法操作，在487nm处分别测定吸光度；计算含量；茶黄素、茶红素和茶褐素含量测定方法供试液制备准确称取0. 05-lg粉末，加入沸水125ml，摇勻后在沸水浴中浸提10分 钟，浸提中摇瓶一次，浸提完毕后，取出摇勻，趁热用棉花过滤于干燥的三角烧瓶中，滤液浸 放在冷水中冷至室温后，即可进行萃取和分光光度测定；萃取摇勻供试液，吸取25ml放在60ml分液漏斗中，加入25ml醋酸乙酯，以大致每秒钟二次的速度振摇5分钟，静止分层，分别放出水层而将醋酸乙酯层倒入具塞三角瓶中待 用；吸取醋酸乙酯层溶液2ml，放在25ml容量瓶中，加入95 %乙醇稀释至25ml，摇勻为溶 液A ；吸取醋酸乙酯层溶液IOml放在30ml分液漏斗中，加入2. 5% NaHC03水溶液10ml，振 摇30秒钟；静置分层后，立即放出NaHC03水层溶液并弃去，小心地把醋酸乙酯层溶液倒入 具塞试管中，取该醋酸乙酯层溶液4ml，放在25ml容量瓶中，加95%乙醇稀释至25ml，摇勻 为溶液C ；吸取第一次用醋酸乙酯萃取所分出的水层溶液2ml，放在25ml容量瓶中，加入2ml饱和 草酸溶液和6ml蒸馏水，并用95%乙醇稀释至25ml，摇勻后溶液D ；吸取茶汤供试液IOml，放在30ml分液漏斗中，加入IOml正丁醇，振摇3分钟，静置慢慢 分层后，放出下面的水层；吸取该水层溶液2ml，放在25ml容量瓶中，加入2ml饱和草酸和 6ml蒸馏水，并用95%乙醇稀释至25ml，摇勻为溶液B ；比色测定选择380nm波长，用Icm比色杯，以95%乙醇作空白对照，分别测定A、B、C、D溶液的光 密度E ；计算含量。
10.权利要求1的普洱茶提取物的制备方法，步骤如下取普洱茶超微粉碎粉，加水于95°c浸提3次，加水倍数14倍，浸提时间2小时；提取 和放料过程中连续搅拌，每次的提取浆料用三足离心机离心，合并离心液，离心液自然至 4030万分子量膜过滤，得膜过滤液和膜截留液；温度< 70°C，将膜截留液减压浓缩至固 含量为10%的浓缩液，浓缩液用三足离心机离心一次，一次离心液用管式离心机离心二次 离心，温度< 70°c，将膜过滤液和二次离心液合并浓缩至比重1. 13/55°c，浓缩膏微波干燥 即可。
全文摘要
本发明涉及一种中药提取物及其制备，特别涉及普洱茶的提取物及其制备，其中制备方法包括水提取，膜过滤，离心，浓缩和过滤等技术手段。
文档编号G01N21/31GK101961426SQ20091006987
公开日2011年2月2日 申请日期2009年7月24日 优先权日2009年7月24日
发明者刘顺航, 范开, 闫希军, 马继忠, 黄松 申请人:天津天士力现代中药资源有限公司