专利名称：一种富硒北冬虫夏草的培育方法
技术领域：
本发明涉及一种在药食用菌中添加微量元素硒的培育方法，是富硒北冬虫夏草的培育方法。
背景技术：
北冬虫夏草又名北虫草、蛹虫草，它与青海冬虫夏草同属于真菌门虫草属，但为不同的种。冬虫夏草在世界上广泛分布，它能够寄生在多种鳞翅目昆虫的幼虫及其蛹体上，在我国各地分布较广，主要分布剥蚀丘陵地带、海拔50-400米之间、气候属于北温带、半湿润大陆性气候、每年只有林区在郁闭、避风的地段才能有北虫草集中发生。经研究表明，北虫草食用和药用价值可与传统的冬虫夏草媲美，它不仅在药效成分种类上与传统冬虫夏草相近外，而且是在已报道的350余种虫草菌中唯一能大量形成虫草素的种，因此它与传统冬虫夏草一样，能滋补人体，而且能有效地抑制肿瘤和病毒，并具有多种药理功能，是传统冬虫夏草的最理想代用品，但野生的北冬虫夏草与传统的冬虫夏草一样，在自然界中稀少，价格昂贵，因此，人工培育具有自然形态的北冬虫夏草子实体，有利于造福百姓，具有现实意义。
人工培养的北虫草的虫草素含量高于传统冬虫夏草几十倍，而传统冬虫夏草仅含微量虫草素，虫草素有抑菌作用，抗肿瘤、抑制病毒、抗缺氧、增加心肌营养血液量及降低血清胆固醇和β脂蛋白的作用等等，此外，临床研究也证实了虫草素具有补精髓、止血化痰、强壮、收敛、镇静等作用。对高血压、血胆脂醇过多、甲状腺机能减退及传染性肝炎的预防和缓解都有显著的疗效，自1997年以来，发现虫草素具有特殊的选择性杀死白血病癌细胞的作用。
北虫草中的虫草酸的含量为4.11％。虫草酸是止咳平喘的药效成分之一，有扩张气管，镇静，抗多种细菌的作用。
北虫草的SOD酶活为184.4u/ml，比活为42.4u/mg，而传统的冬虫夏草低于它，酶活为149.4u/ml，比活为10.3u/mg。SOD酶抗类风湿，红斑狼疮，皮肌炎，抗癌，防辐射，并具有抗衰老和美容的作用。
北冬虫夏草含有虫草多糖12.8mg/100g，而传统的冬虫夏草仅为7mg/100g。虫草多糖能提高人体的免疫力，起扶正固本作用，对老年慢性病支气管炎，肺原性心脏病有显著的疗效，能提高肝脏的解毒能力，起护肝作用。
人工栽培的北冬虫夏草的蛋白质、氨基酸、维生素和微量元素的含量均达到或超过传统冬虫夏草的水平。
据不完全统计，全世界有42个国家和地区缺硒，我国有三分之二的地区约7亿人口处于缺硒状态。因此，利用富硒资源开发生产天然富硒食品，尤其是开发天然有机硒保健食品，已成为目前我国富硒保健食品的重点。人体中硒主要从日常饮食中获得，因此，食物中硒的含量直接影响了人们日常硒的摄入量。食物硒含量受地理因素影响很大，土壤硒的不同造成各地食品中硒含量的极大差异。中国营养学会对我国13个省市做过一项调查表明，成人日平均硒摄入为26-32微克，离中国营养学会推荐的最低限度50微克相差甚远。
对于缺硒地区的居民和患有各种缺硒疾病的人群，适量补硒是完全必要的，是对生命的爱护。根据国内外大量资料统计和临床实践证明，人体缺硒就会造成重要器官的机能失调，导致许多严重疾病的发生。如恶性肿瘤、心脑血管病等。此外，硒还有增强人体免疫功能、增强解毒性、抗衰老性等作用，科学补硒与人体健康有直接关系。硒对人体健康的作用可以归纳为以下几点1、防癌、抗癌2、增强免疫力3、防止糖尿病4、防止白内障5、防止心脑血管疾病6、防止克山病、大骨节病、关节炎7、对抗重金属元素解毒、排毒8、防治肝病、保护肝脏。经科学实验研究证明，大部分粮食、蔬菜等农作物对硒元素的吸收是有限的，甚至是不能吸收，而真菌植物对硒元素的吸收则比较好。
发明内容
本发明的目的是提供一种富硒北冬虫夏草的培育方法，该方法以北冬虫夏草为载体，人为添加一定微量的硒元素，通过菌丝的吸收转化成为容易被人体吸收的有机硒，从而获得一种富含人体必需的微量元素硒的保健型食品。
为实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现一种富硒北冬虫夏草的培育方法，其特征在于该方法包括以下步骤第一步菌种分离；将新鲜的野生北冬虫夏草清洗后迅速用75％的酒精棉球对其进行灭菌处理，2～3次后用无菌水清除虫草表面的酒精后待用；第二步斜面菌种培养；1、培养基成分构成马铃薯200克、葡萄糖10～20克、琼脂17～20克、磷酸二氢钾1克；亚硒酸钠盐30毫克；2、配制方法将洗净去皮的马铃薯切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾1克，亚硒酸钠盐30毫克后，将用水量补足1000毫升，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热用6～8层纱布过滤后迅速分装在试管内，每个试管装7～9毫升，用棉塞塞紧封口后开始灭菌，灭菌器是手提式高压灭菌锅；温度达到121℃～123℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成30°斜面，培养液不得接触棉塞；冷却后斜面成固体状，将备用的野生冬虫草子座或菌核部分用接种刀取下小部分0.5～1克置于培养基表面，然后将试管放入20℃的恒温箱中培养10天左右，得到富硒北冬虫夏草母种；第三步富硒北冬虫夏草液体菌种的制作；1、配方粉状葡萄糖20克、黄豆粉10克、维生素B1 50毫克、硫酸镁2克、磷酸二氢钾3克，食用味精1克，食盐2克，亚硒酸钠盐30毫克，水1000毫升；2、制作方法将配方所列原材料放入沸水中煮10分钟，如水量不足加至1000毫升，然后将溶液倒入量杯中，沉淀10分钟后，将滤除渣子的溶液装入输液瓶中，容量以350毫升～400毫升为度，瓶口用棉塞塞紧后开始灭菌，灭菌器是手提式高压灭菌锅；温度达到121℃～123℃时保压30分钟出锅，冷却后将母种一同放入经严格灭菌消毒的灭菌箱中，准备转接；转接过程中严格遵守无菌作业规程，所有接种用品用具及操作者本人都必须经无菌化处理方可操作，转接过程是将斜面试管中已长成的富硒北冬虫夏草母种转接到液体培养液中，然后放入无光黑暗处，在18°～22°的环境里培养5～7天，待液体菌种培养液表面长满白色菌丝体后，供栽培富硒北冬虫夏草的液体栽培种便制成了；第四步富硒北冬虫夏草栽培；1、培养基配方
大米30克/瓶、小玉米碴1克/瓶、土豆10克/瓶、柞蚕蛹浆5克/瓶、胡萝卜汁1克/瓶、维生素B1 0.01克/瓶、矿泉水50毫升/瓶；2、操作程序按实际计划制作的数量，依照上述所列配方比例混合搅拌均匀分别装入洗净消毒的培养瓶中，放入灭菌锅，在120℃的高温下蒸40分钟灭菌后降温，放入经严格消毒灭菌的接种箱中，将液体富硒北冬虫夏草菌种接种在培养瓶中的培养基上，然后送入经过灭菌处理的培养室中的培养架上培养，在18℃～20℃的温度中避光培养10天左右，待白色菌丝体在培养基表面全部长满后见光培养，但要避免直射光照射，此时培养室温度应在18℃～22℃，湿度应为80～90％，在培养瓶封口膜上用针扎孔透气，排除瓶内在虫草生长过程中产生的二氧化碳气体，经50～60天子实体成熟并形成孢子便可采收。
采收后的富硒北冬虫夏草可在自然通风的条件下阴干，也可在40℃以下的温室中烘干，含水量必须保持在8％以下方可储存，最好装在真空密封的塑料袋中保存。
本发明的新颖性和创造性表现在在北冬虫夏草的母种驯化过程中便添加硒元素使其适应，并在菌丝体和子实体形成的过程中，在分解、吸收、转化和积累各种养分的同时吸收硒元素以增加北冬虫夏草的含硒量，依据本发明培育的北冬虫夏草子实体的含硒量比普通办法培育的北冬虫夏草含硒量增加30～40倍，实验证明，富硒北冬虫夏草比普通北冬虫夏草生长周期短，产量有所提高，成活率可达98％以上，富硒北冬虫夏草能有效地抑制肿瘤和病毒，具有多种药理功能。
具体实施例方式
一种富硒北冬虫夏草的培育方法，该方法包括以下步骤第一步菌种分离；将新鲜的野生北冬虫夏草清洗后迅速用75％的酒精棉球对其进行灭菌处理，2～3次后用无菌水清除虫草表面的酒精后待用；第二步斜面菌种培养；1、培养基成分构成马铃薯200克、葡萄糖10～20克、琼脂17～20克、磷酸二氢钾1克；亚硒酸钠盐30毫克；2、配制方法将洗净去皮的马铃薯切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾1克，亚硒酸钠盐30毫克后，将用水量补足1000毫升，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热用6～8层纱布过滤后迅速分装在试管内，每个试管装7～9毫升，用棉塞塞紧封口后开始灭菌，灭菌器是手提式高压灭菌锅；温度达到121℃～123℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成30°斜面，培养液不得接触棉塞；冷却后斜面成固体状，将备用的野生冬虫草子座或菌核部分用接种刀取下小部分0.5～1克置于培养基表面，然后将试管放入20℃的恒温箱中培养10天左右，得到富硒北冬虫夏草母种；第三步富硒北冬虫夏草液体菌种的制作；1、配方粉状葡萄糖20克、黄豆粉10克、维生素B1 50毫克、硫酸镁2克、磷酸二氢钾3克，食用味精1克，食盐2克，亚硒酸钠盐30毫克，水1000毫升；2、制作方法将配方所列原材料放入沸水中煮10分钟，如水量不足加至1000毫升，然后将溶液倒入量杯中，沉淀10分钟后，将滤除渣子的溶液装入输液瓶中，容量以350毫升～400毫升为度，瓶口用棉塞塞紧后开始灭菌，灭菌器是手提式高压灭菌锅；温度达到121℃～123℃时保压30分钟出锅，冷却后将母种一同放入经严格灭菌消毒的灭菌箱中，准备转接；转接过程中严格遵守无菌作业规程，所有接种用品用具及操作者本人都必须经无菌化处理方可操作，转接过程是将斜面试管中已长成的富硒北冬虫夏草母种转接到液体培养液中，然后放入无光黑暗处，在18°～22°的环境里培养5～7天，待液体菌种培养液表面长满白色菌丝体后，供栽培富硒北冬虫夏草的液体栽培种便制成了；第四步富硒北冬虫夏草栽培；1、培养基配方大米30克/瓶、小玉米碴1克/瓶、土豆10克/瓶、柞蚕蛹浆5克/瓶、胡萝卜汁1克/瓶、维生素B1 0.01克/瓶、矿泉水50毫升/瓶；2、操作程序按实际计划制作的数量，依照上述所列配方比例混合搅拌均匀分别装入洗净消毒的培养瓶中，放入灭菌锅，在120℃的高温下蒸40分钟灭菌后降温，放入经严格消毒灭菌的接种箱中，将液体富硒北冬虫夏草菌种接种在培养瓶中的培养基上，然后送入经过灭菌处理的培养室中的培养架上培养，在18℃～20℃的温度中避光培养10天左右，待白色菌丝体在培养基表面全部长满后见光培养，但要避免直射光照射，此时培养室温度应在18℃～22℃，湿度应为80～90％，在培养瓶封口膜上用针扎孔透气，排除瓶内在虫草生长过程中产生的二氧化碳气体，经50～60天子实体成熟并形成孢子便可采收。
采收后的富硒北冬虫夏草可在自然通风的条件下阴干，也可在40℃以下的温室中烘干，含水量必须保持在8％以下方可储存，最好装在真空密封的塑料袋中保存。
权利要求
1.一种富硒北冬虫夏草的培育方法，其特征在于该方法包括以下步骤第一步菌种分离；将新鲜的野生北冬虫夏草清洗后迅速用75％的酒精棉球对其进行灭菌处理，2～3次后用无菌水清除虫草表面的酒精后待用；第二步斜面菌种培养；1、培养基成分构成马铃薯200克、葡萄糖10～20克、琼脂17～20克、磷酸二氢钾1克；亚硒酸钠盐30毫克；2、配制方法将洗净去皮的马铃薯切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾1克，亚硒酸钠盐30毫克后，将用水量补足1000毫升，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热用6～8层纱布过滤后迅速分装在试管内，每个试管装7～9毫升，用棉塞塞紧封口后开始灭菌，灭菌器是手提式高压灭菌锅；温度达到121℃～123℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成30°斜面，培养液不得接触棉塞；冷却后斜面成固体状，将备用的野生冬虫草子座或菌核部分用接种刀取下小部分0.5～1克置于培养基表面，然后将试管放入20℃的恒温箱中培养10天左右，得到富硒北冬虫夏草母种；第三步富硒北冬虫夏草液体菌种的制作；1、配方粉状葡萄糖20克、黄豆粉10克、维生素B1 50毫克、硫酸镁2克、磷酸二氢钾3克，食用味精1克，食盐2克，亚硒酸钠盐30毫克，水1000毫升；2、制作方法将配方所列原材料放入沸水中煮10分钟，如水量不足加至1000毫升，然后将溶液倒入量杯中，沉淀10分钟后，将滤除渣子的溶液装入输液瓶中，容量以350毫升～400毫升为度，瓶口用棉塞塞紧后开始灭菌，灭菌器是手提式高压灭菌锅；温度达到121℃～123℃时保压30分钟出锅，冷却后将母种一同放入经严格灭菌消毒的灭菌箱中，准备转接；转接过程中严格遵守无菌作业规程，所有接种用品用具及操作者本人都必须经无菌化处理方可操作，转接过程是将斜面试管中已长成的富硒北冬虫夏草母种转接到液体培养液中，然后放入无光黑暗处，在18°～22°的环境里培养5～7天，待液体菌种培养液表面长满白色菌丝体后，供栽培富硒北冬虫夏草的液体栽培种便制成了；第四步富硒北冬虫夏草栽培；1、培养基配方大米30克/瓶、小玉米碴1克/瓶、土豆10克/瓶、柞蚕蛹浆5克/瓶、胡萝卜汁1克/瓶、维生素B1 0.01克/瓶、矿泉水50毫升/瓶；2、操作程序按实际计划制作的数量，依照上述所列配方比例混合搅拌均匀分别装入洗净消毒的培养瓶中，放入灭菌锅，在120℃的高温下蒸40分钟灭菌后降温，放入经严格消毒灭菌的接种箱中，将液体富硒北冬虫夏草菌种接种在培养瓶中的培养基上，然后送入经过灭菌处理的培养室中的培养架上培养，在18℃～20℃的温度中避光培养10天左右，待白色菌丝体在培养基表面全部长满后见光培养，但要避免直射光照射，此时培养室温度应在18℃～22℃，湿度应为80～90％，在培养瓶封口膜上用针扎孔透气，排除瓶内在虫草生长过程中产生的二氧化碳气体，经50～60天子实体成熟并形成孢子采收。
全文摘要
本发明涉及一种富硒北冬虫夏草的培育方法，该方法以北冬虫夏草为载体，人为添加一定微量的硒元素，通过菌丝的吸收转化成为容易被人体吸收的有机硒，从而获得一种富含人体必需的微量元素硒的保健型食品。栽培培养基配方大米30克/瓶、小玉米碴1克/瓶、土豆10克/瓶、柞蚕蛹浆5克/瓶、胡萝卜汁1克/瓶、维生素B1 0.01克/瓶、矿泉水50毫升/瓶；依据本发明培育的北冬虫夏草子实体的含硒量比普通办法培育的北冬虫夏草含硒量增加30～40倍，实验证明，富硒北冬虫夏草比普通北冬虫夏草生长周期短，产量有所提高，成活率可达98％以上，富硒北冬虫夏草能有效地抑制肿瘤和病毒，具有多种药理功能。
文档编号C12N1/14GK101050426SQ200710010750
公开日2007年10月10日 申请日期2007年3月28日 优先权日2007年3月28日
发明者邹玉华, 张寿禄, 谷安廷, 安宇 申请人:邹玉华