专利名称：检测残留农药的速测卡的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种生物工程技术领域的速测卡，具体是一种检测残留农药的速测卡。
背景技术：
我国是世界第一农药使用大国和生产大国，其中有机磷和氨基甲酸酯类农药占高 毒品种的70%。我国主要蔬菜、水果等农产品中农药残留状况十分严重。同时，这些高毒农 药因使用不当、飘移流失，对水体、土壤等生态环境造成了严重污染。因此，我国食品安全监 管和环境监控中迫切需要快速、灵敏、准确的农药残留和污染的检测方法和配套产品。以酶 抑制法为原理的试纸条检测方法已作为我国国家法定检测标准(GB/T 5009. 199)，在蔬菜、 水果等农产品中农药残留快速检测中广泛应用。但未见针对环境中农药污染的快速检测试 纸条的报道。 经对现有技术的文献和专利检索发现，Nagatani等在《Food Control》(食品控 制)2007， 18 :914 920上发表的《快速、灵敏、可见的一次性芯片用于农药残留快速检测》 一文，文中披露了如下内容利用膜作为载体基质，固定酶、显色剂等后，制备出的快速检测 膜芯片。然而，现有技术中，检测农药残留的试纸条、速测卡和膜芯片等存在需要较为精 确的温度控制、依赖人工折叠酶片和底物片、反应不充分、检测灵敏度低等缺陷，无法真正 实现快速、灵敏、简便、准确的检测。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种检测残留农药的速测卡。本发 明的检测卡适用范围广，检测灵敏，可快速、简便地应用于蔬菜、水果等农产品中农药残留 以及水体、土壤等环境中农药污染的检测。
本发明是通过以下技术方案实现的， 本发明包括两层塑料板；其中一个塑料板上有两个孔，一为加样孔，一为观察孔，
在该塑料板的一面粘贴有吸水纸和固定有黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶的酶条，吸水纸与加样孔
相对，酶条与观察孔相对，吸水纸与酶条连接；另一塑料板上与酶条相应的位置粘贴有固定
吲哚酚乙酸酯的底物片，底物片与酶条与之间有一挡板；所述酶条固定的黑腹果蝇乙酰胆
碱酯酶的量为3 5U。 所述孔的直径为0. 5 lcm。所述吸水纸的尺寸为长20mmX宽20mm。 所述酶条的尺寸为长20mmX宽12mm。 所述底物片固定的吲哚酚乙酸酯的量为5 10mg。所述底物片的尺寸为长20mmX宽8mm。 所述挡板为油性蜡纸。 所述粘贴具体为使用质量分数为0. 4 1. 2%的明胶进行粘贴。
本发明在使用时，首先在加样孔中加入待测样品溶液，反应；然后抽取挡板，观察酶条的颜色，若酶条为天蓝色，则样品溶液中无农药残留，若酶条为无色，则样品溶液中有农药残留。 与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果本发明的检测卡适用范围广，检测灵敏，可快速、简便地应用于蔬菜、水果等农产品中农药残留以及水体、土壤等环境中农药污染的检测，检测时间在10min左右；同时，本发明的速测卡对食品和环境样品中复杂基质具有较好的抗干扰能力。
图1为实施例1速测卡的结构示意图。
具体实施例方式
以下实例将结合附图对本发明作进一步说明。本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。 实施例1 图1为本实施例的速测卡的结构示意图，由图1可知， 本实施例的速测卡的结构为该速测卡包括两层塑料板；其中一个塑料板7上有两个孔，一为加样孔l，一为观察孔2，孔的直径均为0. 5cm ; 在该塑料板的一面粘贴有吸水纸5和固定有黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶的酶条4，吸水纸的尺寸为长20mmX宽20mm，酶条的尺寸为长20mmX宽12mm，酶条固定的黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶的量为3U，使用质量分数为0. 4 1. 2%的明胶(将明胶溶于水配制而成)进行粘贴；吸水纸5与加样孔1相对，酶条4与观察孔2相对，吸水纸5与酶条4连接；
另一塑料板8上与酶条相应的位置粘贴有固定吲哚酚乙酸酯的底物片6，底物片6的尺寸为长20mmX宽8mm，底物片固定的吲哚酚乙酸酯的量为5mg ;底物片与酶条与之间有一油性蜡纸3。 使用检测卡检测样品中残留农药的过程如下 步骤一，制备空白样品液，所述空白样品液为O. lmol/L PBK，其具体配制过程如下取12. 48g磷酸氢二钾，3. 85g磷酸二氢钾，双蒸水溶解定容至1L，调节pH值为7. 2，得1L的0. lmol/L PBK ; 步骤二，向加样孔中加入0. 5mL空白样品液，室温条件下反应6分钟，抽去挡板，5分钟后在结果观察孔中观察显色结果。结果表明，观察孔中呈现明显的天蓝色，即样品液中无农药残留； 步骤三，向加样孔中加入0. 5mL 0. 3mg/L敌敌畏(稀释采用的是步骤一的PBK溶液)，室温条件下反应6分钟，抽去挡板，5分钟后在结果观察孔中观察显色结果。结果表明，观察孔中呈现无色，即样品液中有农药残留。
实施例2 本实施例的速测卡与实施例具有相同的构造，不同之处在于加样孔和观察孔的直径均为0. 7cm ;酶条固定的黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶的量为4U ;底物片固定的吲哚酚乙酸
酯的量为8mg ;粘贴是使用0. 7%的明胶进行的。
使用检测卡检测样品中残留农药的过程如下 步骤一，制备空白样品液，所述空白样品液为O. lmol/L PBK，其具体配制过程如下取12. 48g磷酸氢二钾，3. 85g磷酸二氢钾，双蒸水溶解定容至1L，调节pH值为7. 2，得1L的0. lmol/L PBK ; 步骤二，向加样孔中加入0. 5mL空白样品液，室温条件下反应6分钟，抽去挡板，5分钟后在结果观察孔中观察显色结果。结果表明，观察孔中呈现明显的天蓝色，即样品液中无农药残留； 步骤三，向加样孔中加入0. 5mL 0. 5mg/L敌百虫(稀释采用的是步骤一的PBK溶液)，室温条件下反应6分钟，抽去挡板，5分钟后在结果观察孔中观察显色结果。结果表明，观察孔中呈现无色，即样品液中有农药残留。
实施例3 本实施例的速测卡与实施例具有相同的构造，不同之处在于加样孔和观察孔的直径均为lcm ;酶条固定的黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶的量为5U ;底物片固定的吲哚酚乙酸酯的量为10mg ;粘贴是使用1. 2%的明胶进行的。
使用检测卡检测样品中残留农药的过程如下 步骤一，制备空白样品液，所述空白样品液为O. lmol/L PBK，其具体配制过程如下取12. 48g磷酸氢二钾，3. 85g磷酸二氢钾，双蒸水溶解定容至1L，调节pH值为7. 2，得1L的0. lmol/L PBK ; 步骤二，向加样孔中加入0. 5mL空白样品液，室温条件下反应6分钟，抽去挡板，5分钟后在结果观察孔中观察显色结果。结果表明，观察孔中呈现明显的天蓝色，即样品液中无农药残留； 步骤三，向加样孔中加入0. 5mL 0. 8mg/L氧化乐果(稀释采用的是步骤一的PBK溶液)，室温条件下反应6分钟，抽去挡板，5分钟后在结果观察孔中观察显色结果。结果表明，观察孔中呈现无色，即样品液中有农药残留。
权利要求
一种检测残留农药的速测卡，其特征在于，该速测卡包括两层塑料板；其中一个塑料板上有两个孔，一为加样孔，一为观察孔，在该塑料板的一面粘贴有吸水纸和固定有黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶的酶条，吸水纸与加样孔相对，酶条与观察孔相对，吸水纸与酶条连接；另一塑料板上与酶条相应的位置粘贴有固定吲哚酚乙酸酯的底物片，底物片与酶条与之间有一挡板；所述酶条固定的黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶的量为3～5U。
2. 根据权利要求1所述的检测残留农药的速测卡，其特征是，所述孔的直径为0. 5 lcm。
3. 根据权利要求l所述的检测残留农药的速测卡，其特征是，所述吸水纸的尺寸为长20mmX宽20mm。
4. 根据权利要求1所述的检测残留农药的速测卡，其特征是，所述酶条的尺寸为长 20mmX宽12mm。
5. 根据权利要求l所述的检测残留农药的速测卡，其特征是，所述底物片的尺寸为长20mmX宽8mm。
6. 根据权利要求1所述的检测残留农药的速测卡，其特征是，所述底物片固定的吲哚 酚乙酸酯的量为5 10mg。
7. 根据权利要求1所述的检测残留农药的速测卡，其特征是，所述挡板为油性蜡纸。
8. 根据权利要求l所述的检测残留农药的速测卡，其特征是，所述粘贴具体为使用质 量分数为0. 4 1. 2%的明胶进行粘贴。
全文摘要
一种生物工程技术领域的检测残留农药的速测卡，包括两层塑料板；其中一个塑料板上有两个孔，一为加样孔，一为观察孔，在该塑料板的一面粘贴有吸水纸和固定有黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶的酶条，吸水纸与加样孔相对，酶条与观察孔相对，吸水纸与酶条连接；另一塑料板上与酶条相应的位置粘贴有固定吲哚酚乙酸酯的底物片，底物片与酶条与之间有一挡板；使用时，待样品与酶条中的黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶预反应后，将挡板抽出，使酶条与底物片接触。本发明的检测卡适用范围广，检测灵敏，快速简便。
文档编号C12Q1/44GK101693916SQ200910309308
公开日2010年4月14日 申请日期2009年11月5日 优先权日2009年11月5日
发明者张大兵, 武爱波, 池陈森 申请人:上海交通大学;