专利名称：一种高油脂小球藻培养液及其培养方法
技术领域：
本发明属 于生物技术领域，具体涉及一种高油脂小球藻培养液及其培养方法。
背景技术：
微藻生物技术属于生命科学研究领域的一个重要分支，是目前国内外的研究热点 和前沿。微藻中的小球藻是一种具有重要经济价值的生物资源，有着巨大的应用和开发 潜力。小球藻是人类最早分离培养的一种绿藻，属于具有真核细胞的最简单光合作用有机 体，它富含蛋白质、不饱和脂肪酸、类胡萝卜素、叶黄素、虾青素和多种维生素，具有极高的 营养价值和提高免疫力的功能。另外小球藻还含有一种非常重要的成分——小球藻生长因 子，它既具有诱发干扰素、激发人体防御和免疫组织中的巨噬细胞、τ细胞和B细胞的功 能，又具有促进人体对环境污染有害物质解毒和排泄的作用。它的生长速度快，光合作用 效率是一般高等植物的10倍左右，因此有望成为减排CO2的先锋物种。小球藻要吸收二氧 化碳通过光合作用合成有机物，但采用此种方法培养出的藻细胞浓度一般较低。此外，小球藻在不同培养条件下可以产生10% 30%细胞干重的脂类，可以用于 转化为脂肪酸甲脂即生产生物柴油。小球藻具备降解有机污染物，高效吸附重金属和吸收 氮磷等功能，在生物能源和环境保护领域具有重要的应用开发前景，是一种极其重要的微 藻资源。通常使用SE培养基(SE Medium)和Pr培养基(Pr Medium)，也可以使用BG-11培 养基(BG-11 Medium)培养。目前，小球藻自养培养的技术已经成熟，但存在的问题是在小 球藻细胞增加到一定浓度后阻挡光线进入培养物，因此限制了小球藻的光合作用，导致培 养的小球藻生物量低。
发明内容
针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种快速培养高油 脂小球藻培养液及其培养方法的技术方案，能准确稳定高效的培养出高油脂、高生物量、适 应性强的优良株系。所述的一种高油脂小球藻培养液，其特征在于由重量百分含量的以下物质组成 94-98%SE培养基、2-6%木醋液。所述的一种高油脂小球藻培养液，其特征在于所述SE培养基的含量为95-96%。所述的一种高油脂小球藻培养液，其特征在于所述木醋液的含量为3-5%。所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于包括以下步骤
1)将活化后的小球藻移接到装有94-98%SE培养基、2-6%木醋液组成的培养液的锥形 瓶中；
2)将锥形瓶置于转速150-180r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强 为4000-6000LX，光暗比为4-6 :8_12h进行间隔光照，培养温度控制在15_21°C，在PH值为 5-6. 6的条件下持续通CO2培养12-25天，即得高油脂小球藻。所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2)中摇床的转速为160-170 r/min。所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2)中光强为4500-5000Lx。所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2)中采用光照间隙法间隔 光照，光暗比为5 =IOh0所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2)中培养温度为 18-200C，在PH值为5. 5-6. 0的条件下持续通CO2培养15-20天。所述的SE培养基(SE Medium)，为微藻培养基的一种，可由市场上直接购得。所述 的木醋液是木材加工剩余物经高温热解而得到的副产物，可从市场上直接购得。上述小球 藻的活化工艺为公知技术，在此不再赘述。上述一种高油脂小球藻培养液及其培养方法，培养液中添加了能够促进藻类迅速 生长、合成油脂的木醋液；其培养方法操作简便，设备投资少，成本低廉，能准确稳定高效的 培养出高油脂、高生物量、适应性强的优良株系。本申请文件中涉及的百分含量除另有说明 夕卜，其它的均为纯物质的重量百分含量。
具体实施例方式现结合本发明的实施例和培养效果试验，进一步说明本发明的有益效果。实施例1
将活化后的小球藻移接到装有98%SE培养基、2%木醋液组成的培养液的锥形瓶中；将 锥形瓶置于转速180 r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强为6000Lx，光 暗比为5 :10h进行间隔光照；培养温度控制在21°C，pH=6.6的条件下持续通CO2培养21天， 即得高油脂小球藻。实施例2
将活化后的小球藻移接到装有97%SE培养基、3%木醋液组成的培养液的锥形瓶中；将 锥形瓶置于转速150 r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强为4000Lx，光 暗比为4 :8h进行间隔光照，培养温度控制在16°C，pH=5的条件下持续通CO2培养13天，即 得高油脂小球藻。实施例3
将活化后的小球藻移接到装有96%SE培养基、4%木醋液组成的培养液的锥形瓶中；将 锥形瓶置于转速160r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强为5000Lx，光暗 比为6 :12h进行间隔光照。培养温度控制在19°C，pH=5. 8的条件下持续通CO2培养18天， 即得高油脂小球藻。实施例4
将活化后的小球藻移接到装有95%SE培养基、5%木醋液组成的培养液的锥形瓶中；将 锥形瓶置于转速170r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强为4500Lx，光暗 比为5 :12h进行间隔光照，培养温度控制在18°C，pH=6. 0的条件下持续通CO2培养12天， 即得高油脂小球藻。实施例5
将活化后的小球藻移接到装有94%SE培养基、6%木醋液组成的培养液的锥形瓶中；将 锥形瓶 置于转速170r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强为5500Lx，光暗比为6 :8h进行间隔光照，培养温度控制在20°C，pH=6. 3的条件下持续通CO2培养18天，即 得高油脂小球藻。以下通过试验说明上述培养方法的有益效果。表1 实施例1-6对小球藻生物量(0D680nm)的影响__
权利要求
1.一种高油脂小球藻培养液，其特征在于由重量百分含量的以下物质组成94_98%SE 培养基、2-6%木醋液。
2.如权利要求1所述的一种高油脂小球藻培养液，其特征在于所述SE培养基的含量为 95-96%。
3.如权利要求1所述的一种高油脂小球藻培养液，其特征在于所述木醋液的含量为 3-5% ο
4.如权利要求1所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于包括以下步骤1)将活化后的小球藻移接到装有94-98%SE培养基、2-6%木醋液组成的培养液的锥形 瓶中；2)将锥形瓶置于转速150-180r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强 为4000-6000LX，光暗比为4-6 :8-1 进行间隔光照，培养温度控制在15_21°C，在PH值为 5-6. 6的条件下持续通(X)2培养12-25天，即得高油脂小球藻。
5.如权利4所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2)中摇床的转速为 160-170 r/min。
6.如权利4所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2)中光强为 4500-5000Lx。
7.如权利4所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2)中采用光照间隙 法间隔光照，光暗比为5 =IOh0
8.如权利4所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2)中培养温度为 18-200C，在PH值为5. 5-6. 0的条件下持续通CO2培养15-20天。
全文摘要
一种高油脂小球藻培养液及其培养方法，属于生物技术领域。包括以下步骤1)将活化后的小球藻移接到装有94-98%SE培养基、2-6%木醋液组成的培养液的锥形瓶中；2)将锥形瓶置于转速150-180r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强为4000-6000Lx,光暗比为4-6∶8-12h进行间隔光照，培养温度控制在15-21℃，在pH值为5-6.6的条件下持续通CO2培养12-25天，即得高油脂小球藻。该培养液中添加了能够促进藻类迅速生长、合成油脂的木醋液；其培养方法操作简便，设备投资少，成本低廉，能准确稳定高效的培养出高油脂、高生物量、适应性强的优良株系。
文档编号C12N1/12GK102093976SQ20101059326
公开日2011年6月15日 申请日期2010年12月17日 优先权日2010年12月17日
发明者夏国华, 张启香, 童森淼, 胡君艳, 郑炳松, 闫道良, 陈国娟, 黄坚钦, 黄有军 申请人:浙江农林大学