一种荚膜红细菌及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一株荚膜红细菌以及应用，本发明提供了荚膜红细菌BN-W-6，它的保藏编号为CGMCC?No.8311，属于光合细菌，经过扩大培养后加入能量源，使其发酵获得发酵产物，发酵产物中包含叶绿素a、类胡萝卜素、酮式-类胡萝卜素、氢化酶和接触酶等。该菌的发酵产物在池塘中，产生的生物酶类，可以使大型藻类逐渐分解，叶绿素a和类胡萝卜素等产物能够吸收大型藻类生长所必须的光照波段使大型藻类萎缩、聚团、直至死亡，并且大型藻类死亡后不影响底质，从而达到控制藻类泛滥生长且不影响海参正常生长的目的。本发明提供的荚膜红细菌发酵液可以抑制和去除大型藻类，从而提高养殖密度，改善了养殖环境，达到提高水生生物池塘养殖产量的目的。
【专利说明】一种荚膜红细菌及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一株荚膜红细菌及其应用。
【背景技术】
[0002]刺参养殖作为黄渤海海域经济的支柱产业，在当地经济发展、促进渔民就业和增加渔民收入等方面有着举足轻重的意义。池塘中大型藻类的泛滥一直是刺参养殖户的心病，刺参是黄渤海海域主要养殖的水产品之一，大型藻类的疯狂生长极大地阻碍了该养殖业的高效发展，甚至威胁到现有产业的生存。大型藻类的繁殖对刺参有极大的影响，大型藻类占据了刺参的生存空间，刺参活动空间减少，还有很多被大型藻类缠绕其中，有的因为不能活动而死亡，有的在人工捞草的过程中被扔掉，投苗量减少，对产量是一个极大的冲击。再则大型藻类在池底的死亡，将释放出大量的氨氮和亚硝酸盐，使刺参的养殖环境迅速恶化，可能会引起大批量的死亡。
[0003]水产领域中的对于预防(抑制)大型藻类研究相对薄弱。这主要是因为大型藻类的类型和生长与普通的养殖水产品存在一定不同，不可控因素较多，很难准确进行除去。现在生产中较为常见的大型藻类就有6，7种之多，每种的生长时间、繁殖方式、适宜条件都不尽相同，有很多藻类在一天时间就长满整个池塘，对刺参的生长极其不利。在人工除草的过程中，还会有一部分的刺参卷在藻类中一并扔掉。有的养殖户在无奈的情况下使用了化学药物，虽可以暂时的除去藻类，但是这样不仅影响了池塘中刺参饵料的生长，对刺参也有较高毒性，同时富集的化学药物也会影响最终的消费者。
[0004]大型藻类的重复打捞是养殖户在刺参养殖中的一笔不小的开支。捞草工人每人每天接近150元，100亩的刺参养殖池塘，10个工人需要10天左右才能把池塘的大型藻类全部捞净，而在一个月之后，大型藻类又开始影响刺参生存环境。这样算下来，每年的人工除草费用就接近6万。
`[0005]光合细菌(Photosynthetic Bacteria,缩写PSB)是水域微生物中的一种,是地球上最早出现的具有原始光能合成系统的原核生物，它广泛分布在各类水体的厌氧层中。现已知光合细菌存在着色杆菌科、外硫红螺菌科、紫色非硫细菌、绿色硫细菌、多细胞丝状绿细菌、螺旋杆菌科、含细菌叶绿素的专性好氧菌等7大群公约50个属。光合细菌作为自然界中重要的微生物类群，广泛存在于自然界的水田、湖泊、江河、海洋、活性污泥及土壤中，生命力极强、营养要求低、生长繁殖快、无毒害性等特点。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供一株荚膜红细菌及其应用。具体说，用于水生生物养殖池塘中去除大型藻类。采用本发明的方法养殖池塘水生生物，可使水生生物产量显著增加，其中尤为适宜的水生生物为刺参。
[0007]为了达到上述目的，本发明提供一株荚膜红细菌(Rhodobactor capsulatus)BN-W-6，保藏编号为 CGMCC N0.8311。[0008]本发明还保护了所述荚膜红细菌BN-W-6在生产抑制和去除藻类菌剂中的应用。其中，所述藻类为浒苔、刚毛藻、硬毛藻或者石莼等。
[0009]本发明荚膜红细菌(Rhodobactor capsulatus) BN-ff-6,可用于制备得到的发酵液。用于抑制和去除藻类的菌剂。
[0010]利用所述荚膜红细菌BN-W-6的发酵液的方法为，发酵所述荚膜红细菌BN-W-6，得到发酵液。
[0011]优选方式下，首先将菌浓度扩繁达到109-10ncfu/ml的荚膜红细菌BN-W-6菌液，加入营养盐后进行发酵。发酵条件优选为:温度控制在25-30°C，通气流速为2-4L/min，光照强度为1000-3000LUX，发酵24-36h。其中，所述营养盐是葡萄糖、蔗糖、红糖或混合构成的营养物；按照1000ml所述菌液加入0.03g营养盐的比例加入。
[0012]所述发酵液的使用方法为，将所述发酵液按照1.5-3L/亩米，投放入水生生物养殖池塘。其中，所述发酵液利用沉降剂均匀投放到水生生物养殖池塘中。
[0013]本发明还保护了上述发酵液在水生生物养殖池塘抑制和去除大型藻类中的应用。应用方法包括:将所述发酵液按照1.5-3L/亩米，投放入水生生物养殖池塘的步骤。
[0014]所述发酵液尤其适用于水生生物养殖池塘中应用，应用方式，将所述发酵液按照
1.5-3L/亩米，投放入水生生物养殖池塘的步骤。
[0015]本发明提供的荚膜红细菌BN-W-6，属于光合细菌，该细菌经过扩大培养后加入能量源(如葡萄糖、蔗糖或红糖等)，使其发酵获得发酵产物，发酵产物中包含叶绿素a、类胡萝卜素、酮式-类胡萝卜素、氢化酶和接触酶等。该细菌的发酵产物在池塘中，产生的生物酶
类，可以使大型藻类逐渐分解，叶绿素a和类胡萝卜素等产物能够吸收大型藻类生长所必须的光照波段使大型藻类萎缩、聚团、直至死亡，并且大型藻类死亡后不影响底质。
[0016]本发明提供的抑制和去除养殖池塘大型藻类的菌剂可以改善养殖池塘底质微生态环境，降低底质水层氨氮和亚硝酸盐，大型藻类生长所需要的固氮和固碳作用降低，达到抑制大型藻类生长的要求。
[0017]本发明提供的抑制和去除养殖池塘大型藻类的菌剂可以进一步提高池塘养殖水生生物的产量，提高养殖生物的成活率，大规模生产抑制和去除养殖池塘大型藻类的菌剂，可以挽救养殖户损失，增加 养殖户收入等方面有着举足轻重的意义。本发明尤其适用于黄渤海海域。
【具体实施方式】
[0018]以下实施例便于更好的理解本发明，但并不限定本发明，下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。
[0019]一、菌株BN-W-6的获得
[0020]利用富集和选择鉴别培养技术，从海参肠道分离耐受高浓度氨氮、亚硝酸盐、并能抑制大型藻类生长的光合细菌。得到一株菌株，命名为BN-W-6。
[0021]二、菌株BN-W-6的鉴定
[0022]1、形态特征
[0023]革兰氏阴性菌；[0024]菌体呈短杆或卵形，大小约为(0.5-1.2) umX (1.8-2.3)um ；[0025]菌落在光照条件下呈光滑、圆润、突起；
[0026]菌落在光照条件下为红色，在黑暗条件下为无色。
[0027]2、分子特征
[0028]16S rDNA的测序结果如序列表的序列I所示，与GENBANK ACCESSIONN0.FJ866782.1的荚膜红细菌的序列相似性为99%。
[0029]综合形态特征和分子特征，参照《伯杰氏系统细菌学手册》(第9版)和东秀珠等编著的《常见细菌系统鉴定手册》(第I版)，菌株BN-W-6属于荚膜红细菌属(Rhodobactorcapsulatus)。
[0030]三、菌株BN-W-6的鉴定保藏
[0031]荚膜红细菌(Rhodobactorcapsulatus) BN-W-6,简称荚膜红细菌 BN-W-6,已于2013年10月9日于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏(简称CGMCC ;地址:中国科学院微生物研究所；邮编100101)，保藏编号为CGMCC N0.8311。
[0032]四、荚膜红细菌BN-W-6的发酵成份及工艺条件的优化
[0033]通过单因素及正交试验，确定如下培养基组成参数:
[0034]葡萄糖为培养基中的最佳碳源，添加0.02-0.05%时可得到最高生物量和发酵产物。
[0035]蛋白胨为培养基中的氮源，添加量为0.5% ；
[0036]酵母浸粉为培养基中的辅助氮源，添加量为0.1%
[0037]磷酸高铁作用可以提高菌液的浓度。
[0038]采用250ml摇瓶，装液量80ml，培养温度25_30°C，Ph6_8，培养时间24_36h。
[0039]采用上述优化参数，荚膜红细菌BN-W-6的生物量达到8xlOn个/ml，菌体产酶量、
产类胡萝卜素量达到最高值。
[0040]五、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0041]将菌浓度扩繁达到109-10ncfu/ml的荚膜红细菌BN-W-6菌液，加入营养盐进行发酵。发酵产物即为抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂。
[0042]发酵可以选用适宜方式，优选方式下，发酵条件为:温度控制在25_30°C，空气通气流速为2-4L/min，光照强度为1000_3000Lux，发酵24_36h。
[0043]此外，营养盐可以是葡萄糖、蔗糖、红糖或其他类营养物。优选方式下，按照1000ml菌液加入0.03g葡萄糖的比例加入。
[0044]【具体实施方式】如下:
[0045]实施例1、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0046]步骤1:菌种液体培养基(pH7.0)的制备方法:5g蛋白胨、Ig酵母浸粉、0.01g磷酸高铁、0.04gNaHC03、0.02g MgSO4.7H20、0.02g K2HP04、0.1g NH4Cl，用陈海水定容至 1000ml ；实际应用中，发酵培养基采用6.5-7.5的pH均可。
[0047]步骤2:将菌种液体培养基在120°C下灭菌15~20min。
[0048]步骤3:采用200L发酵罐，并对发酵罐进行如下改造:(I)在发酵罐底部安装发红色的水下灯(灯光主要提供荚膜红细菌的生长必须的光源作为能源)；(2)在发酵罐下部安装电热恒温控制棒；(3)在发酵罐底部设置两个外接开口，一个作为供给发酵罐的通气口，另一个作为加入培养基、营养盐和菌种的开口。
[0049]在发酵罐中加入160L液体培养基，然后接种荚膜红细菌BN-W-6，菌种扩增条件:温度控制在28°C，空气通气流速为2L/min，光照强度为1500Lux (1000-3000Lux均可)；
[0050]步骤4:当发酵罐中的菌浓度达到109_1011cfu/ml时，加入营养盐进行发酵24-36h (营养盐按照1000ml菌液加入0.03g葡萄糖的比例加入)，温度控制在30°C，空气通气流速为2L/min，光照强度为1000-3000Lux，此次选用1500Lux。
[0051]步骤5:收集发酵产物，即为去除养殖池塘大型藻类产物，4°C保藏。
[0052]实施例2、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0053]步骤1:菌种液体培养基(pH7.0)的制备方法:5g蛋白胨、Ig酵母浸粉、0.01g磷酸高铁、0.04gNaHC03、0.02g MgSO4.7H20、0.02g K2HP04、0.1g NH4Cl，用陈海水定容至 1000ml ；实际应用中，发酵培养基采用6.5-7.5的pH均可。
[0054]步骤2:将菌种液体培养基在120°C下灭菌15_20min。
[0055]步骤3:采用200L发酵罐，并对发酵罐进行如下改造:(1)在发酵罐下部安装电热恒温控制棒；(2)在发酵罐底部设置两个外接开口，一个作为供给发酵罐的通气口，另一个作为加入培养基、营养盐和菌种的开口。
[0056]在发酵罐中加入160L液体培养基，然后接种荚膜红细菌BN-W-6，菌种扩增条件:温度控制在28°C，空气通气流速为2L/min，
[0057]步骤4:当发酵罐中的菌浓度达到109-10ncfu/ml时，加入营养盐后发酵24_36h(营养盐按照1000ml菌液加入0.03g葡萄糖)，温度控制在30°C，空气通气流速为2L/min ；
[0058]步骤5:收集发酵产物，即为去除养殖池塘大型藻类产物，4°C保藏。
[0059]实施例3、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0060]步骤1:菌种液体培养基(pH7.0)的制备方法:5g蛋白胨、Ig酵母浸粉、0.01g磷酸高铁、0.04gNaHC03、0.02g MgSO4.7H20、0.02g K2HP04、0.1g NH4Cl，用陈海水定容至 1000ml ；实际应用中，发酵培养基采用6.5-7.5的pH均可。
[0061]步骤2:将菌种液体培养基在120°C下灭菌15-20min。
[0062]步骤3:采用200L发酵罐，并对发酵罐进行如下改造:(I)在发酵罐底部安装发红色的水下灯(灯光主要提供荚膜红细菌的生长必须的光源作为能源)；(2)在发酵罐下部安装电热恒温控制棒；(3)在发酵罐底部设置两个外接开口，一个作为供给发酵罐的通气口，另一个作为加入培养基、营养盐和菌种的开口。
[0063]在发酵罐中加入160L液体培养基，然后接种荚膜红细菌BN-W-6，菌种扩增条件:温度控制在28°C，二氧化碳通气流速为4L/min，光照强度为1500Lux( 1000-3000Lux均可)；
[0064]步骤4:当发酵罐中的菌浓度达到109-10ncfu/ml时，加入营养盐后发酵24_36h(营养盐按照1000ml菌液加入0.03g葡萄糖)，温度控制在30°C，二氧化碳通气流速为4L/min，光照强度为 1500Lux (1000_3000Lux 均可)；
[0065]步骤5:收集发酵产物，即为去除养殖池塘大型藻类产物，4°C保藏。
[0066] 实施例4、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0067]步骤1:菌种液体培养基(pH7.0)的制备方法:5g蛋白胨、Ig酵母浸粉、0.01g磷酸高铁、0.04gNaHC03、0.02g MgSO4.7H20、0.02g K2HP04、0.1g NH4Cl，用陈海水定容至 1000ml ；实际应用中，发酵培养基采用6.5-7.5的pH均可。[0068]步骤2:将菌种液体培养基在120°C下灭菌15_20min。
[0069]步骤3:采用200L发酵罐，并对发酵罐进行如下改造:(1)在发酵罐下部安装电热恒温控制棒；(2)在发酵罐底部设置两个外接开口，一个作为供给发酵罐的通气口，另一个作为加入培养基、营养盐和菌种的开口。
[0070]在发酵罐中加入160L液体培养基，然后接种荚膜红细菌BN-W-6，菌种扩增条件:温度控制在28 °C，二氧化碳通气流速为4L/min。
[0071]步骤4:当发酵罐中的菌浓度达到109-10ncfu/ml时，加入营养盐后发酵24_36h(营养盐按照1000ml菌液加入0.03g葡萄糖)，温度控制在30°C，二氧化碳通气流速为4L/min。
[0072]步骤5:收集发酵产物，即为去除养殖池塘大型藻类产物，4°C保藏。
[0073]实施例5、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0074]步骤1:菌种液体培养基(pH7.0)的制备方法:10g蛋白胨、2g酵母浸粉、0.1g磷酸高铁、0.04gNaHC03、0.02g MgSO4.7H20、0.02g K2HP04、0.1g NH4Cl，用陈海水定容至 1000ml ；实际应用中，发酵培养基采用6.5-7.5的pH均可。
[0075]步骤2:将菌种液体培养基在120°C下灭菌15_20min。
[0076]步骤3:采用200L发酵罐，并对发酵罐进行如下改造:(I)在发酵罐底部安装发红色的水下灯(灯光主要提供荚膜红细菌的生长必须的光源作为能源)；(2)在发酵罐下部安装电热恒温控制棒；(3)在发酵罐底部设置两个外接开口，一个作为供给发酵罐的通气口，另一个作为加入培养基、营养盐和菌种的开口。
[0077]在发酵罐中加入160L液体培养基，然后接种荚膜红细菌BN-W-6，菌种扩增条件:温度控制在28°C，空气通气流速为2L/min，光照强度为1500Lux (1000-3000Lux均可)；
[0078]步骤4:当发酵罐中的菌浓度达到109-10ncfu/ml时，加入营养盐后发酵24_36h(按照1000ml菌液加入0.02g蔗糖、0.02g MgSO4 ? IW2Q和0.02g K2HPO4计算)，温度控制在30°C，空气通气流速为2L/min，光照强度为1500Lux (1000-3000Lux均可)；
[0079]步骤5:收集发酵产物，即为去除养殖池塘大型藻类产物，4°C保藏。
[0080]实施例6、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0081]步骤1:菌种液体培养基(pH7.0)的制备方法:5g蛋白胨、Ig酵母浸粉、0.01g磷酸高铁、用陈海水定容至1000ml ;实际应用中，发酵培养基采用6.5-7.5的pH均可。
[0082]步骤2: 将菌种液体培养基在120°C下灭菌15_20min。
[0083]步骤3:采用200L发酵罐，并对发酵罐进行如下改造:(I)在发酵罐下部安装电热恒温控制棒；(2)在发酵罐底部设置两个外接开口，一个作为供给发酵罐的通气口，另一个作为加入培养基、营养盐和菌种的开口。
[0084]在发酵罐中加入160L液体培养基，然后接种荚膜红细菌BN-W-6，菌种扩增条件:温度控制在28°C，空气通气流速为2L/min，
[0085]步骤4:当发酵罐中的菌浓度达到109-10ncfu/ml时，加入营养盐后发酵24_36h(按照1000ml菌液加入0.03g蔗糖)，温度控制在30°C，空气通气流速为2L/min ；
[0086]步骤5:收集发酵产物，即为去除养殖池塘大型藻类产物，4°C保藏。
[0087]实施例7、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0088]步骤1:菌种液体培养基(pH7.0)的制备方法:10g蛋白胨、2g酵母浸粉、0.1g磷酸高铁、0.(MgNaHCO3用陈海水定容至1000ml ;实际应用中，发酵培养基采用6.5-7.5的pH均可。
[0089]步骤2:将菌种液体培养基在120°C下灭菌15_20min。
[0090]步骤3:采用200L发酵罐，并对发酵罐进行如下改造:(I)在发酵罐底部安装发红色的水下灯(灯光主要提供荚膜红细菌的生长必须的光源作为能源)；(2)在发酵罐下部安装电热恒温控制棒；(3)在发酵罐底部设置两个外接开口，一个作为供给发酵罐的通气口，另一个作为加入培养基、营养盐和菌种的开口。
[0091]在发酵罐中加入160L液体培养基，然后接种荚膜红细菌BN-W-6，菌种扩增条件:温度控制在28°C，二氧化碳通气流速为4L/min，光照强度为1500Lux( 1000-3000Lux均可)；
[0092]步骤4:当发酵罐中的菌浓度达到109-10ncfu/ml时，加入营养盐后发酵24_36h(按照1000ml菌液加入0.03g蔗糖计算)，温度控制在30°C，二氧化碳通气流速为4L/min，光照强度为 1500Lux (1000-3000Lux 均可)；
[0093]步骤5:收集发酵产物，即为去除养殖池塘大型藻类产物，4°C保藏。
[0094]实施例8、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0095]步骤1:菌种液体培养基(PH7.0)的制备方法:10g蛋白胨、2g酵母浸粉、0.01g磷酸高铁、0.02g K2HPO4^0.01g NH4Cl,用水定容至1000ml ;实际应用中，发酵培养基采用
6.5-7.5 的 pH 均可。
[0096]步骤2:将菌种液体培养基在120°C下灭菌15_20min。
[0097]步骤3:采用200L发酵罐，并对发酵罐进行如下改造:(1)在发酵罐下部安装电热恒温控制棒；(2)在发酵罐底部设置两个外接开口，一个作为供给发酵罐的通气口，另一个作为加入培养基、营养盐和菌种的开口。
[0098]在发酵罐中加入160L液体培养基，然后接种荚膜红细菌BN-W-6，菌种扩增条件:温度控制在28 °C，二氧化碳通气流速为4L/min。
[0099]步骤4:当发酵罐中的菌浓度达到109-10ncfu/ml时，加入营养盐后发酵24_36h(按照1000ml菌液加入0.03g葡萄糖和0.03g蔗糖计算)，温度控制在30°C，二氧化碳通气流速为4L/min。
[0100]步骤5:收集发酵产物，即为去除养殖池塘大型藻类产物，4°C保藏。
[0101]实施例9、抑制和去除养殖池塘大型藻类菌剂的制备
[0102]步骤1:发酵培养基(pH7.0)的制备方法:取0.03g葡萄糖、5g蛋白胨、Ig酵母浸粉、0.04gNaHC03、0.02g MgSO4.7H20、0.02g K2HP04、0.1g NH4Cl 和 IOml 微量元素溶液，用陈海水定容至1000ml ;所述微量元素溶液的制备方法如下:取0.5g H3BO3>400mg MnS04、60mgZnSO4 ? 7H20、180mg NaMoO4 ? 2H20 和 Ca (NO3) 2 ? 2H20，用水溶解并定容至 250ml。实际应用中，发酵培养基采用6.5-7.5的pH均可。
[0103]步骤2:将发酵培养基在120°C下灭菌15-20min。
[0104]步骤3:采用200L发酵罐，并对发酵罐进行如下改造:(I)在发酵罐底部安装发红色的水下灯(灯光主要提供光合细菌的生长必须的光源作为能源)；(2)在发酵罐下部安装电热恒温控制棒；(3)在发酵罐底部设置两个外接开口，一个作为供给发酵罐二氧化碳的通气口，另一个作为加入发酵培养基和菌种的开口。
[0105]在发酵罐中加入160L发酵培养基，然后接种荚膜红细菌BN-W-6，发酵条件:温度控制在30°C，二氧化碳通气流速为4L/min，光照强度为1500Lux (1000_3000Lux均可)；发酵培养24-36h，收集产物，即为去除养殖池塘大型藻类菌剂，4°C保藏。
[0106]六、菌剂的投放，用于抑制和去除养殖池塘大型藻类以及水生生物养殖的应用。
[0107]将上述任一实施例发酵的菌剂按照每亩米投放发酵产物1.5-3L的比例，利用沉降剂均匀投放到水生生物养殖池塘中。优选实施例中水生生物为刺参。
[0108]注意投放7-12天内不能进行池塘换水，防止发酵产物浓度降低，失去抑制大型藻类效果。
[0109]具体实施例如下:发现大型藻类生长时，首先制备上述菌剂及获取沉降剂(可购买取得)。计算池塘总面积，按照每亩米投放发酵产物1.5-3L计算。沉降剂可选用海泥或蛎壳粉。
[0110]计算池塘总面积，按照每亩米投放发酵产物1.5-3L计算。具体方法如下池塘面积按照50亩，池塘水深I米，发酵产物使用量为2L/亩米。
[0111]依次进行以下操作:
[0112](I)将发酵产物100L，倒入大水槽中，并添加入200L-400L的海水。
[0113](2)将20kg_40kg海泥放入已经装好发酵产物的水槽中
[0114](3)将发酵产物 和海泥搅拌均匀，如搅拌时太粘稠，可以适量再加入200L-400L海水。
[0115](4)连续搅动 10-15min
[0116](5)稀释后均匀泼洒到有大型藻类的所在池塘水面，让其自然沉底。
[0117](6)泼洒后7-12天内不能进行池塘换水，防止发酵产物浓度降低，失去抑制大型藻类效果。
[0118]水温大于8°C时使用，风速小于三级时使用，在傍晚16点到19点投放效果最佳。
[0119]投放第4天后，能够发现大型藻类有变黄，萎缩的情况发生，藻类可以由原来的10-20cm,萎缩至7_15cm左右，大一些的可以从50-70cm,萎缩到40_50cm。
[0120]投放第7-10天后，能够发现大型藻类变黄，萎缩的情况加剧，藻类尖端发黑，效果明显，藻类可以由原来的10 - 20cm,萎缩至2 - 3 cm左右,大一些的可以从50 - 70cm,萎缩到
10-20cm。藻类可以由上述实施过程尤其适用于黄渤海海域气候条件下的池塘养殖。通过上述过程，实践中，本发明基于生物技术控制海参池塘大型藻类的方法，能够抑制大型藻类在池塘中的繁殖。
[0121]本发明公开了一株荚膜红细菌以及应用，本发明提供了荚膜红细菌BN-W-6，它的保藏编号为CGMCC N0.8311，属于光合细菌，该细菌经过扩大培养后加入能量源(如葡萄糖、蔗糖或红糖等)，使其发酵获得发酵产物，发酵产物中包含叶绿素a、类胡萝卜素、酮式-类胡萝卜素、氢化酶和接触酶等。该细菌的发酵产物在池塘中，产生的生物酶类，可以使大型藻类逐渐分解，叶绿素a和类胡萝卜素等产物能够吸收大型藻类生长所必须的光照波段使大型藻类萎缩、聚团、直至死亡，并且大型藻类死亡后不影响底质，从而达到控制藻类泛滥生长且不影响海参正常生长的目的。本发明提供的荚膜红细菌可以抑制和去除大型藻类，从而提高了养殖密度，改善了养殖环境，达到提高水生生物池塘养殖的产量
[0122]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.荚膜红细菌(Rhodobactorcapsulatus) BN-W-6，其特征在于，保藏编号为CGMCCN0.8311。
2.权利要求1所述荚膜红细菌BN-W-6在生产抑制和去除藻类菌剂中的应用。
3.权利要求2所述基于生物技术控制池塘大型藻类的方法，其特征在于，所述藻类为浒苔、刚毛藻、硬毛藻或者石莼。
4.制备权利要求1所述荚膜红细菌BN-W-6的发酵液的方法，其特征在于，发酵权利要求I所述荚膜红细菌BN-W-6，得到发酵液。
5.根据权利要求4所述制备荚膜红细菌BN-W-6的发酵液的方法，其特征在于，首先将菌浓度扩繁达到109-10ncfu/ml的荚膜红细菌BN-W-6菌液，加入营养盐后进行发酵。
6.根据权利要求5所述制备荚膜红细菌BN-W-6的发酵液的方法，其特征在于，发酵条件为:温度控制在25-30°C，通气流速为2-4L/min，光照强度为1000-3000Lux，发酵24-36h ； 所述营养盐是葡萄糖、鹿糖、红糖或混合构成的营养物；按照1000ml所述菌液加入0.03g营养盐的比例加入。
7.权利要求4-6任一所述方法制备得到的发酵液。
8.权利要求7所述发酵液的使用方法，其特征在于，该方法是将所述发酵液按照1.5-3L/亩米，投放入水生生物养殖池塘。
9.根据权利要求8所述发酵液的使用方法，其特征在于，所述发酵液利用沉降剂均匀投放到水生生物养殖池塘中。
10.权利要求4-6任一所述发酵液在水生生物养殖池塘抑制和去除大型藻类中的应用。
11.根据权利要求10所述发酵液在水生生物养殖池塘抑制和去除大型藻类中的应用，其特征在于，该方法包括:将权利要求4-6任一所述发酵液按照1.5-3L/亩米，投放入水生生物养殖池塘的步骤。
12.权利要求4-6任一所述发酵液在水生生物养殖池塘中的应用。
13.根据权利要求12所述发酵液在水生生物养殖池塘中的应用，其特征在于，将权利要求4-6任一所述发酵液按照1.5-3L/亩米，投放入水生生物养殖池塘的步骤。
【文档编号】C12N1/20GK103667109SQ201310501364
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年10月23日 优先权日:2013年10月23日
【发明者】陈文博, 王伟, 李勃, 刘彤, 宋晓阳, 郝佳, 王骏 申请人:大连市水产技术推广总站, 大连海洋大学