一种骆驼胎盘绒毛膜冻干粉的制备方法与所述冻干粉的用途
【专利摘要】本发明涉及一种骆驼胎盘绒毛膜冻干粉的制备方法。所述的方法包括骆驼胎盘预处理、骆驼胎盘绒毛膜制浆与冷冻干燥等步骤。试验结果表明，本发明骆驼胎盘绒毛膜冻干粉能提高腹腔巨噬细胞的吞噬能力、碳廓清能力及抗体水平，说明本发明骆驼胎盘绒毛膜冻干粉具有增强免疫力的作用。本发明胎盘绒毛膜冻干粉产品不仅保持了鲜骆驼胎盘的活性成分，提高其利用率，而且制备工艺简单、经济、无污染，易于长期保存，方便运输。
【专利说明】一种骆驼胎盘绒毛膜冻干粉的制备方法与所述冻干粉的用途
【【技术领域】】
[0001]本发明属于农副产品的深加工【技术领域】。更具体地，本发明涉及一种骆驼胎盘绒毛膜冻干粉的制备方法，还涉及所述骆驼胎盘绒毛膜冻干粉的用途。
【【背景技术】】
[0002]胎盘是胎儿赖以生存的器官，胎盘由丛密绒毛膜和基蜕膜紧密结合共同构成，是胎儿与母体之间进行物质交换的暂时性器官，对保证胎儿的营养、呼吸和排泄等功能有重要作用，同时还有保护和内分泌功能。胎儿通过胎盘从母体中吸收营养，并将胎儿的代谢产物通过胎盘从母体中排出。胎盘具有滋补养血、补气强肾的滋补功能，含有生命和发育所必须的一切营养成分和生物活性物质，含多种免疫球蛋白、17种氨基酸、23种微量元素、多种维生素、多种免疫因子、体液调节因子、生长因子、还有与免疫功能密切相关的干扰素和与肌体功能正常运转的多种活性多肽。因此，据报道人胎盘及其提纯物质胎盘素有抗氧化、抗疲劳、抗衰老、增强抵抗力、调节免疫功能的作用。除此之外，胎盘不仅是一种保健品，还对多种疾病具有治疗作用。
[0003]现代科学研究表明，胎盘可为胚胎发育输送养分、提供免疫功能物质及多种生长因子。民间常食用骆驼胎盘，以增加机体抵抗力，治疗体虚、糖尿病等多种病症。骆驼胎盘虽然富含营养，却因不能长时间保存，而不能为广大消费者所食用，导致大量的骆驼胎盘因无法应用而被丢弃。
[0004]可以采用农产品加工技术，有效地提高骆驼胎盘的利用率。通过研究发现，胎盘不同部位的提高免疫功能的作用有所差别，绒毛膜部分的作用显著高于其他部位。为此，本发明人在总结现有技术的基础上，经过大量实验研究终于完成了本发明。
【
【发明内容】
】
[0005][要解决的技术问题]
[0006]本发明的目的是提供一种骆驼胎盘绒毛膜冻干粉的制备方法。
[0007]本发明的另一个目的是提供所述骆驼胎盘绒毛膜冻干粉的用途。
[0008][技术方案]
[0009]本发明是通过下述技术方案实现的。
[0010]本发明涉及一种骆驼胎盘绒毛膜冻干粉的制备方法。
[0011]该制备方法的步骤如下:
[0012]A、骆驼胎盘预处理
[0013]新鲜骆驼胎盘使用纯净水进行清洗，并分拣去除杂物；然后除去骆驼胎盘筋膜与血管，接着从骆驼胎盘上分离绒毛膜部分与基蜕膜部分，得到骆驼胎盘的绒毛膜；
[0014]B、骆驼胎盘绒毛膜制浆
[0015]使用切块机将步骤A得到的骆驼胎盘绒毛膜切成块，接着使用组织匀浆机制浆，得到骆驼胎盘绒毛膜浆体；
[0016]C、冷冻干燥
[0017]使用冷冻干燥机将步骤B得到的浆体冷冻干燥，接着粉碎，再进行微波灭菌，得到无菌的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉。
[0018]根据本发明的一种优选实施方式，所述纯净水的温度是4~8°C。
[0019]根据本发明的另一种优选实施方式，骆驼胎盘绒毛膜切块与制浆是在温度4~8°C的条件下进行的。
[0020]根据本发明的另一种优选实施方式，所述的浆体在温度_40°C至_70°C的条件下冷冻干燥8~12小时。
[0021]根据本发明的另一种优选实施方式，冷冻干燥浆体的含水量是以重量计5~7%。
[0022]根据本发明的另一种优选实施方式，所述的骆驼胎盘绒毛膜粉碎至80目以下。
[0023]根据本发明的另一种优选实施方式，所述的微波灭菌是在温度75~80°C与微波功率20~30KW的条件下处理3~5min。
[0024]本发明还涉及所述方法所得到的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉在制备保健品中的用途。
[0025]下面将更详细地描述本发明。 [0026]本发明还涉及一种免疫增强剂组合物的制备方法。
[0027]该制备方法的步骤如下:
[0028]A、骆驼胎盘预处理
[0029]新鲜骆驼胎盘使用纯净水进行清洗，并分拣去除杂物；然后除去骆驼胎盘筋膜与血管，接着从骆驼胎盘上分离绒毛膜部分与基蜕膜部分，得到骆驼胎盘的绒毛膜。
[0030]在本发明中，新鲜骆驼胎盘应该理解是没有出现任何腐败、溃乱迹象的、颜色鲜亮的新产骆驼胎盘或冷冻骆驼胎盘。
[0031]清洗时使用温度为4~8°C的纯净水洗涤，除去附着在骆驼胎盘上的残留血液、各种杂质或灰尘，并分拣去除杂物。
[0032]接着，使用剪刀将清洗骆驼胎盘上的筋膜与血管清除干净；再仔细地以手工方式从骆驼胎盘上分离绒毛膜部分与基蜕膜部分，得到骆驼胎盘的绒毛膜。
[0033]B、骆驼胎盘绒毛膜制浆
[0034]使用切块机将步骤A得到的骆驼胎盘绒毛膜切成块，接着使用组织匀浆机制浆，得到骆驼胎盘绒毛膜浆体。
[0035]这个步骤的目的在于将清洗干净的骆驼胎盘绒毛膜制成具有一定固体含量的浆体。
[0036]本发明使用的切块机是目前在食品加工产品市场上销售的切块机产品，例如由山东省诸城市大洋食品机械有限公司以商品名食品切块机销售的产品。
[0037]本发明使用的组织匀浆机是目前在食品加工产品市场上销售的组织匀浆机产品，例如由保定市明发生物科技有限公司以商品名组织捣碎匀浆机销售的产品。
[0038]骆驼胎盘绒毛膜切块与制浆是在温度4~8°C的条件下进行的，以确保骆驼胎盘绒毛膜中的活性成分稳定不变。
[0039]C、冷冻干燥
[0040]使用冷冻干燥机将步骤B得到的浆体冷冻干燥，接着粉碎，再进行微波灭菌，得到无菌的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉。
[0041]步骤B得到的浆体在温度_40°C至_70°C的条件下冷冻干燥8~12小时，得到的冷冻干燥浆体的含水量达到以重量计5~7%。如果冷冻干燥浆体的含水量高于这个含水量范围，则会影响冷冻干燥过程。
[0042]本发明使用的冷冻干燥机是目前在食品加工产品市场上销售的冷冻干燥机产品，例如由南京顺流仪器有限公司以商品名冷冻干燥机销售的产品。
[0043]得到的冷冻干燥浆体接着使用粉碎机进行粉碎至80目以下。如果冷冻干燥浆体粉碎粒度在80目以上，则会影响骆驼胎盘绒毛膜有效成分的吸收速度和吸收程度。
[0044]本发明使用的粉碎机是目前在食品加工市场上销售的粉碎机产品，例如由青岛即墨超微粉碎机厂以商品名超微粉碎机销售的产品。
[0045]所述的微波灭菌是在温度75~80°C与微波功率20~30KW的条件下处理3~5min。
[0046]本发明使用的微波设备是目前在食品加工市场上销售的微波设备产品，例如由广州威雅斯微波设备有限公司以商品名微波食品杀菌机销售的产品。
[0047]经微波灭菌处理得到的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉需要采用无菌方法学和微生物方法学(文献“制剂无菌检查及微生物限度检查方法学验证及验证结果的技术评价”)检测确定它是无菌的。
[0048]采用本发明方法加工得到的胎盘绒毛膜冻干粉产品不仅保持鲜骆驼胎盘的活性成分、提高其利用率，而且制备工艺简单、经济、无污染，易于长期保存，方便运输。
[0049][有益效果]
[0050]本发明的有益效果是:本发明胎盘绒毛膜冻干粉产品不仅保持了鲜骆驼胎盘的活性成分，提高其利用率，而且制备工艺简单、经济、无污染，易于长期保存，方便运输。本发明胎盘绒毛膜冻干粉产品可进一步研究开发适用于预防与防治糖尿病、心脑血管疾病及免疫缺陷等疾病的优质保健品。
【【专利附图】
【附图说明】】
[0051]图1是小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的测定结果。
[0052]图2是小鼠碳廓清能力(廓清指数)的测定结果。
[0053]图3是小鼠碳廓清能力(矫正指数)的测定结果。
[0054]图4是小鼠血清溶血素的测定结果。
【【具体实施方式】】
[0055]通过下述实施例将能够更好地理解本发明。
[0056]实施例1:胎盘绒毛膜冻干粉产品的制备
[0057]该实施例的实施步骤如下:
[0058]A、骆驼胎盘预处理
[0059]新鲜骆驼胎盘使用温度为6°C的纯净水进行清洗，并分拣去除杂物；然后除去骆驼胎盘筋膜与血管，接着从骆驼胎盘上分离绒毛膜部分与基蜕膜部分，得到骆驼胎盘的绒毛膜；[0060]B、骆驼胎盘绒毛膜制浆
[0061]使用由山东省诸城市大洋食品机械有限公司以商品名食品切块机销售的切块机将步骤A得到的骆驼胎盘绒毛膜切成块，接着使用由保定市明发生物科技有限公司以商品名组织捣碎匀浆机销售的组织匀浆机制浆，得到骆驼胎盘绒毛膜浆体；骆驼胎盘绒毛膜切块与制浆是在温度6°C的条件下进行的。
[0062]C、冷冻干燥[0063]使用由南京顺流仪器有限公司以商品名冷冻干燥机销售的冷冻干燥机，将步骤B得到的在温度_50°C的条件下冷冻干燥10小时，接着使用由青岛即墨超微粉碎机厂以商品名超微粉碎机销售的粉碎机粉碎至80目以下，再在温度75°C与微波功率25KW的条件下进行微波灭菌3min，得到的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉采用无菌学和微生物学方法检测确定它是无菌的。
[0064]实施例2:胎盘绒毛膜冻干粉产品的制备
[0065]该实施例的实施步骤如下:
[0066]A、骆驼胎盘预处理
[0067]新鲜骆驼胎盘使用温度为4°C的纯净水进行清洗，并分拣去除杂物；然后除去骆驼胎盘筋膜与血管，接着从骆驼胎盘上分离绒毛膜部分与基蜕膜部分，得到骆驼胎盘的绒毛膜；
[0068]B、骆驼胎盘绒毛膜制浆
[0069]使用由山东省诸城市大洋食品机械有限公司以商品名食品切块机销售的切块机将步骤A得到的骆驼胎盘绒毛膜切成块，接着使用由保定市明发生物科技有限公司以商品名组织捣碎匀浆机.销售的组织匀浆机制浆，得到骆驼胎盘绒毛膜浆体；骆驼胎盘绒毛膜切块与制浆是在温度4°C的条件下进行的。
[0070]C、冷冻干燥
[0071]使用由南京顺流仪器有限公司以商品名冷冻干燥机销售的冷冻干燥机，将步骤B得到的在温度-60°C的条件下冷冻干燥9小时，接着使用由青岛即墨超微粉碎机厂以商品名超微粉碎机销售的粉碎机粉碎至80目以下，再在温度80°C与微波功率30KW的条件下进行微波灭菌5min，得到的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉采用无菌学和微生物学方法检测确定它是无菌的。
[0072]实施例3:胎盘绒毛膜冻干粉产品的制备
[0073]该实施例的实施步骤如下:
[0074]A、骆驼胎盘预处理
[0075]新鲜骆驼胎盘使用温度为6°C的纯净水进行清洗，并分拣去除杂物；然后除去骆驼胎盘筋膜与血管，接着从骆驼胎盘上分离绒毛膜部分与基蜕膜部分，得到骆驼胎盘的绒毛膜；
[0076]B、骆驼胎盘绒毛膜制浆
[0077]使用由山东省诸城市大洋食品机械有限公司以商品名食品切块机销售的切块机将步骤A得到的骆驼胎盘绒毛膜切成块，接着使用由保定市明发生物科技有限公司以商品名组织捣碎匀浆机销售的组织匀浆机制浆，得到骆驼胎盘绒毛膜浆体；骆驼胎盘绒毛膜切块与制浆是在温度6°C的条件下进行的。[0078]C、冷冻干燥
[0079]使用由南京顺流仪器有限公司以商品名冷冻干燥机销售的冷冻干燥机，将步骤B得到的在温度-70°C的条件下冷冻干燥8小时，接着使用由青岛即墨超微粉碎机厂以商品名超微粉碎机销售的粉碎机粉碎至80目以下，再在温度80°C与微波功率30KW的条件下进行微波灭菌5min，得到的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉采用无菌学和微生物学方法检测确定它是无菌的。
[0080]实施例4:胎盘绒毛膜冻干粉产品的制备
[0081]该实施例的实施步骤如下:
[0082]A、骆驼胎盘预处理
[0083]新鲜骆驼胎盘使用温度为8°C的纯净水进行清洗，并分拣去除杂物；然后除去骆驼胎盘筋膜与血管，接着从骆驼胎盘上分离绒毛膜部分与基蜕膜部分，得到骆驼胎盘的绒毛膜；
[0084]B、骆驼胎盘绒毛膜制浆
[0085]使用由山东省诸城市大洋食品机械有限公司以商品名食品切块机销售的切块机将步骤A得到的骆驼胎盘绒毛膜切成块，接着使用由保定市明发生物科技有限公司以商品名组织捣碎匀浆机销售的组织匀浆机制浆，得到骆驼胎盘绒毛膜浆体；骆驼胎盘绒毛膜切块与制浆是在温度8°C的条件下进行的。
[0086]C、冷冻干燥
[0087]使用由南京顺流仪器有限公司以商品名冷冻干燥机销售的冷冻干燥机，将步骤B得到的在温度_40°C的条件下冷冻干燥12小时，接着使用由青岛即墨超微粉碎机厂以商品名超微粉碎机销售的粉碎机粉碎至80目以下，再在温度80°C与微波功率30KW的条件下进行微波灭菌5min，得到的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉采用无菌学和微生物学方法检测确定它是无菌的。
[0088]试验实施例1:巨噬细胞吞噬能力试验
[0089]试验方法:
[0090]小鼠采取随机分组法，分生理盐水组、环磷酰胺组、云芝多糖组、胎盘绒毛膜组、胎盘基蜕膜组与羊膜组。
[0091]按照分组，每日每组分别灌喂0.2mL生理盐水、环磷酰胺(量8mg/mL ；由天津金世制药有限公司以商品名复方环磷酰胺片销售的产品)、云芝多糖(量25mg/mL;由上海神运生物科技有限公司以商品名云芝多糖胶囊销售的产品)、胎盘绒毛膜(量25mg/mL ;实施例1制备的)、胎盘基蜕膜(量25mg/mL ;实施例1制备的)与羊膜(量25mg/mL ;实施例1制备的)，连续灌喂7天。
[0092]每只小鼠腹腔注射lmL10%鸡血红细胞悬液。在30min后采用颈椎脱臼处死小白鼠，往腹腔注射ImL生理盐水，轻轻地按摩lmin，再吸出ImL腹腔洗液，滴于处理的载玻片上，放入垫有纱布的塑料盒内，在温度37°C的孵箱孵育30min。接着用生理盐水漂洗去未贴壁的细胞，晾干后置于1:1丙酮甲醇溶液内，固定lOmin。在1:6Giemsa原液-PBS染色液里染色15min。用双蒸水漂洗晾干，镜检计数并计算巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数。
[0093]试验结果:
[0094]试验结果列于附图1 中。对于小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率及吞噬指数，与对照组(分另Ij 为 0.562±0.070 % 和 1.522±0.268)相比，环磷酰胺(0.502±0.085 %和 1.383±0.229)、云芝多糖(0.619±0.126 % 和 1.851 ±0.468)、胎盘基蜕膜(0.638±0.043 % 和 1.655±0.209)和羊膜(0.602±0.053 % 和 1.634±0.412)组均有显著差异(P < 0.05)，而胎盘绒毛膜组(0.678±0.089%和1.983±0.590)差异极显著(P <0.01 )。同时，云芝多糖组(0.619±0.126%和1.851±0.468)和胎盘绒毛膜组(0.678±0.089%和1.983±0.590)之间达到了差异显著(P < 0.05)。这些结果说明，骆驼胎盘绒毛膜能够提高机体腹腔巨噬细胞的吞噬能力，而且其此效果比云芝多糖还明显。
[0095]试验实施例2:碳廓清能力试验
[0096]试验方法:按照与试验实施例1的同样方式进行小鼠分组与灌喂。末次灌胃之后30min，称体重，按照0.05mg/10g往小鼠静脉注射20重量％中华墨。待墨汁注入后计时，分别在Imin与5min，从眼眶处取20 μ L血液，立即将血液加到盛有2mL0.1重量％Na2C03溶液的比色皿中，并用ImL移液器混匀，以0.1重量％Na2C03溶液作空白对照，在722S分光光度计上在波长680nm处测定光密度值(OD)，将小白鼠处死，称取肝脏和脾脏的重量，并计算廓清指数和矫正指数。
[0097]试验结果:
[0098]试验结果列于附图2~3中。通过碳廓清能力试验测定了小鼠网状内皮系统的廓清指数及矫正指数。对于廓清指数，与对照组(分别为0.0126±0.0073和4.0058±0.7120)相比，环磷酰胺(0.0053±0.0006 和 3.3134±0.0124)、云芝多糖(0.0154±0.0052 和
4.5303±0.6175)和骆驼胎盘各组(0.0202±0.0074 和 5.3065±0.3118)之间均有差异显著(P < 0.05);对于矫正指数，与对照组(4.0058±0.7120)相比，环磷酰胺组(3.3134±0.0124)和云 芝多糖(4.5303±0.6175)二组有差异显著(P < 0.05)，而骆驼胎盘绒毛膜组(5.3065±0.3118)差异极显著(P < 0.01)。这些结果说明，骆驼胎盘，尤其绒毛膜部分能够增强小鼠肝、脾及血管内巨噬细胞廓清碳粒的能力，能够提高机体单核巨噬细胞系统吞噬异物的能力。
[0099]试验实施例3:小鼠血清溶血素试验
[0100]试验方法:
[0101]按照与试验实施例1的同样方式进行小鼠分组与灌喂。在第5天，每只小鼠腹腔注射0.2mL2重量％绵羊红细胞(SRBC)悬液进行免疫。第8天摘除眼球取血于离心管内，放置Ih,然后以转速2000r/min离心20min,收集血清。在96孔微量血凝试验板内用生理盐水将血清倍比稀释，每孔70 μ L，同时加入70 μ L10.5 % SRBC悬液，混匀，在温度37°C的温箱孵育3h，观察血球凝集程度，并计算抗体积数，以抗体积数来表示抗体水平。
[0102]试验结果:
[0103]试验结果列于附图4中。采用小鼠腹腔注射绵羊红细胞悬液法及血凝法测定了小鼠血清溶血素，即抗体水平。结果表明，与对照组(50.75± 1.868)相比，环磷酰胺(40.50±1.323)、云芝多糖(62.50±1.118)和骆驼胎盘(63.13±1.469)各组之间均有差异极显著(P < 0.01)。但是，云芝多糖组(62.50±1.118)与骆驼胎盘绒毛膜组(63.13± 1.469)两组差异不显著。这些试验结果说明，骆驼胎盘，尤其绒毛膜部分能够显著提高小鼠体液免疫功能。
【权利要求】
1.一种骆驼胎盘绒毛膜冻干粉的制备方法，其特征在于该制备方法的步骤如下: A、骆驼胎盘预处理 新鲜骆驼胎盘使用纯净水进行清洗，并分拣去除杂物；然后除去骆驼胎盘筋膜与血管，接着从骆驼胎盘上分离绒毛膜部分与基蜕膜部分，得到骆驼胎盘的绒毛膜； B、骆驼胎盘绒毛膜制浆 使用切块机将步骤A得到的骆驼胎盘绒毛膜切成块，接着使用组织匀浆机制浆，得到骆驼胎盘绒毛膜浆体； C、冷冻干燥 使用冷冻干燥机将步骤B得到的浆体冷冻干燥，接着粉碎，再进行微波灭菌，得到无菌的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述纯净水的温度是4~8°C。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于骆驼胎盘绒毛膜切块与制浆是在温度4~8°C的条件下进行的。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的浆体在温度_40°C至_70°C的条件下冷冻干燥8~12小时。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于冷冻干燥浆体的含水量是以重量计5 ~7%。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述的骆驼胎盘绒毛膜粉碎至80目以下。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述的微波灭菌是在温度75~80°C与微波功率20~30KW的条件下处理3~5min。
8.根据权利要求1-7中任一权利要求所述方法所得到的骆驼胎盘绒毛膜冻干粉在制备保健品中的用途的用途。
【文档编号】A23L1/312GK103829239SQ201410056563
【公开日】2014年6月4日 申请日期:2014年2月19日 优先权日:2014年2月19日
【发明者】玉斯日古楞, 吉日木图, 刘佳 申请人:吉日木图, 玉斯日古楞