背景技术：
心脏科医生鼓励消费者每天吃鱼以具有高的ω3类dha(二十二碳六烯酸)和epa(二十碳五烯酸)摄取量。ω3脂肪酸，尤其dha和epa，支持心血管、脑和眼健康并且提供额外的健康益处。但是，每天食用鱼类还向消费者提供汞、其他重金属和pcb的不利健康结果。此外，世界的鱼类供应正在因过度捕捞而下降。因海洋鱼群减少而意图替代为鱼类养殖，但是对饵鱼的供应带来日益增长的压力。鱼民必须使用通过在海洋中网捕大量小鱼(即，饵鱼)获得的鱼粉。饵鱼在其脂肪组织中含有ω3脂肪酸，所述ω3脂肪酸在这些更小鱼类采食浮游动物时沉积。浮游动物采食藻类并且从藻类吸收ω3脂肪酸，这是因为藻类是ω3食物链的基础。鱼类养殖中需要鱼粉以向更大的养殖鱼类供应ω3类。
总之，为了水产养殖用鱼粉而网捕饵鱼不是长期可持续的。需要在人类膳食中得到更多ω3类的新方法。特别需要有成本效益的在天然食物中产生ω3类的新方式。
正常情况下海洋和淡水中出现的藻类是ω3类dha和epa的最终来源。大部分藻类在光合作用中利用阳光将co2和h2o转化成碳水化合物，而碳水化合物在藻类内部加工成脂质，后者进一步加工成多不饱和ω3脂肪酸，尤其是dha和epa。一些藻类还可以直接消耗糖，并且随后将糖加工成脂质和ω3类。许多企业已经开发了在陆地上开放式池塘中培育藻类或在围护系统中洁净条件下培育藻类的方式。一些企业已经开发了在封闭的槽中、通常在发酵过程中输送糖给藻类的方式。
大部分藻类饲用发明设计成饲喂非常少的量以提高牛的健康状况。备选地，ω3类从鱼粉引入，在鱼粉囊封化后，从而保护ω3类免于瘤胃(胃)中的生物氢化(加工成饱和脂肪)。smith的usp8,797,916公开了使用全微藻以相对大的量饲喂牛。smith的916专利公开了在含有大量玉米的肥育场(feedlot)饲粮(ration)中，向牛饲喂的最佳量是约0.8至1.2磅藻类/天，以在牛肉中获得最高dha量和epa量。牛每天将摄入的藻类(其脂肪高)的量限于含玉米的饲粮中的脂肪量和牛将采食的脂肪最大值之间的量。由于牛自我调节它们将消耗的脂肪量(以其饲料总饲粮的百分数计)至8％并且由于玉米含有几乎6％的脂肪，smith披露，用脂肪较低的其他谷物替换玉米将允许饲喂更多的藻类。小麦或大麦含有约36％的如玉米那样多的脂肪。因此，smith披露，用小麦或大麦替换全玉米将允许饲喂约2至3磅藻类/天，同时维持相同的牛总采食量。
smith的‘916专利使牛肉中的ω3脂肪酸含量水平最大化。现在已经发现，牛的饲喂饲粮中较低剂量的藻类可以在牛肉中产生非常明显量的ω3脂肪酸，并且成本有效。这些水平低于通过smith916专利中公开的方法产生的最大值，但是却更有效地进行。即，新的方法在牛肉中以更少的藻类输入量，即以更低的每毫克ω3脂肪酸成本，产生ω3类。
技术实现要素：
先前公开的向牛饲喂藻类的水平在牛肉中产生了量非常高的ω3类dha和epa。但是，这种饲喂的成本相对高。饲喂1磅藻类持续30至90天例如花费大约150美元至450美元，这增加带骨肉(以下简称为ω3牛肉)的生产成本大约0.37美元至1.12美元/磅。
现在已经发现，向牛饲喂更少的藻类饲粮作为其饲料的补充物可以按每单位ω3/磅牛肉的显著更低的成本来生产含有高水平ω3脂肪酸的牛肉。向牛饲喂约0.05至0.8磅藻类/天和更优选地约0.2至0.6磅藻类/天和最优选地约0.2至0.4磅藻类/天产生具有较高水平ω脂肪酸的ω3牛肉，并且显著降低每磅牛肉中ω3脂肪酸含量的成本。
以下饲喂试验说明本发明。这些试验是示例并且不限制本发明。
表1：牛肉中的替代性藻类剂量和替代性ω3水平
(以mg计的dha和epa/8盎司牛排)
表1的系列1显示通过按0.6磅藻类/天饲喂牛持续60天(屠宰前第90天至第31天)并且随后就在屠宰前最后30天饲喂1.2磅藻类/天，实现牛肉中的ω3类dha和epa最大化。这产生141mgdha+epa/8盎司份的牛排。但是90天范围内，仅产生1.9mgdha和epa/磅饲喂的藻类。牛排中，藻类成本是2.55美元/mgdha+epa。
研究方案-本发明的优选实施方案在表1的系列2上报告的实验中显示：表1的系列2显示，就在屠宰前仅最后30天饲喂0.4磅藻类产生58mgdha和epa/8盎司份的牛排。在30天范围内产生4.83mgdha和epa/磅饲喂的藻类。牛排中，藻类成本是1.03美元/mgdha和epa。
表1的系列4显示，饲喂0.4磅藻类/天持续60天，随后最后30天饲喂0.8磅/天，在8盎司份的牛排中产生125mgdha和epa。藻类成本是1.92美元/mgdha和epa。
本发明的另一个优选实施方案在表1的系列3报告的饲喂试验中公开：表1的系列3显示，饲喂0.2磅藻类持续60天，随后最后30天饲喂0.4磅藻类/天，产生81mgdha+epa。8盎司客(serving)的牛排中，藻类成本是1.48美元/mgdha和epa。
以上示例中产生的数据点可以用来科学地预测甚至更低剂量的效果。预期30至90天0.1磅/天的剂量在8盎司份的牛排中产生25mgepa加dha。预测30至90天0.05磅/天的剂量产生14mgepa加dha。
尽管我先前的专利(us8,747,916)披露了按0.8至1.2磅/天饲喂藻类，但本发明显示，低到如0.05磅/天的剂量非常有效地以更低成本并且相对于牛肉中产生的每毫克ω3类饲喂更少的藻类，在牛肉中产生高水平的ω3类。基于上述数据点，低到0.1磅/天的饲喂量将产生每牛排的dha+epa的可测量的增加，并且低到0.05磅/天的量仍将产生可测量的量。
本发明确立了，存在与使得牛肉中epa加dha的量最大化的方案相比成本更有效的藻类饲喂方案。按0.8至1.2磅/天持续90天(总计72磅藻类)饲喂藻类，在8盎司份的牛排中产生1mgdha+epa需要0.51磅藻类(上文系列1)。与之相反，饲喂约0.2至0.4磅藻类/天持续90天(上文系列3)(总计24磅藻类)，在8盎司份的牛排中产生1mgdha+epa需要0.296磅藻类。最后30天饲喂0.4磅，在8盎司份的牛排中产生1mgdha+epa仅需要0.20磅(上文系列2)。
各种新产品宣扬其高ω3含量。研究表示，常规肥育场产生的牛肉含有约7mgdha+epa/8盎司份的牛排。草饲牛肉产生约14mgdha+epa。在另一个极端情况下每3.5盎司份，比目鱼产生约295mgdha+epa，天然鲑鱼含有约500至800mgdha+epa。
饲以smith916专利和本发明中所用相同藻类的ω3蛋类含有约180mgdha+epa。富含ω3类的市售产品(horizon有机乳)含有约32mgdha/8盎司客。已经从smith916专利和本发明中所用相同的藻类物种提取混入乳中的dha油。在最低极端情况，一家高端连锁超市销售宣扬ω3dha含量为约12mg/份的巧克力棒，其中从本发明方法中所用相同类型的藻类提取的dha油已经混在糖果中。
用于本发明中的优选藻类为裂殖壶菌属(schizochytrium)，但是下述的任何其他藻类可以用于实施本发明：1.具有在瘤胃中相对不可消化的细胞壁；2.以重量计dha和/或epa的量高(例如，大于10％)；和3.按总脂肪重量计epa加dha的比例高(例如20-50％)。穿过肠的瘤胃幸存的藻类细胞壁的百分数将根据瘤胃内容物和每种动物的膳食而变动，然而通常，细胞壁相对不可消化的藻类的大部分ω-3物质穿过肠的瘤胃幸存。可以在实施本发明方法中使用的藻类例如包括：三角褐指藻(phaedactylumtricornatum)、螺旋藻属(spirulina)、小球藻属(chlorella)、微拟球藻属(nannochloropsis)、蒜头藻(monodussubterraneus)、寇氏隐甲藻(crypthecodiniumcohnii)、裂殖壶菌属(schizochytrium)、聚合破囊壶菌(thraustochytriumaggregatum)和吾肯氏壶菌属物种(ulkeniasp.)。藻类可以作为每日饲料饲粮(其可以例如是玉米、大豆、苜蓿、禾秆、作为乙醇工业副产物的谷物湿酒糟(wetgraindistiller)、大麦或小麦)的一部分施用。在许多情况下，优选小麦和/或大麦作为常规肥育场饲粮替代玉米。藻类可以在标准饲料饲粮中以干式或湿式出现或作为粒料成形并且施用。
表1第7列展示了按每种方案饲喂的藻量/磅带骨牛肉的额外成本。在这些计算中，为了简化，假定1400磅阉牛将提供约400磅带骨肉和牛肉馅。为了最大化ω3类的量，牛肉中141mg的dha+epa花费额外0.90美元/磅带骨牛肉。相比之下，与141mg的最高藻类饲粮相比，最有成本效益的方案仅花费额外的0.15美元/磅带骨牛肉，却供应81mgdha和epa。实际上，对于最高水平的ω3类，消费者将被要求支付6倍额外的成本以收获74％以上的ω3类。
可能一些消费者将偏好在其购买的牛肉中ω3类最大化，而其他消费者将寻找适度增加ω3类的最经济的供应手段。
上文提供的示例中的具体数值可以总体上用于描述小于和大于所披露具体数值的藻类饲喂方案。在0.05磅/天和0.8磅/天之间存在落于本发明范围内的近乎无限数目的藻类饲喂量。
以下工作例显示，裂殖壶菌属和微拟球藻属中的坚固细胞壁发挥作用以保护藻类内部的ω-3脂肪酸免于在会使其氢化而在小肠中变得无用的瘤胃中释放。
具体实施方式
实施例
三头肉牛饲以包含玉米、玉米麸、干草和矿物质的标准饲粮。对照动物仅饲以标准饲粮。除标准饲粮之外，第二头动物接受80％水和20％微拟球藻属藻类(nannochloropsisalgae)的浆液(等同于0.2磅藻类/天)，所述浆液通过插管直接施用至肠道的瘤胃部。第三头动物饲以标准饲粮并且还接受每天通过插管直接进入瘤胃的0.2磅干燥的裂殖壶菌属藻类(schizochytriumalgae)。将动物饲喂8天(从12月24至1月1日)。12月23日是饲喂开始之前的日期。在1月1日，利用插管，收集肠道固形物和流体的样品并且随后分析dha和epa合并含量(作为存在的ω-3酸的百分数)。瘤胃流体中的ω-3酸释放自破坏的藻细胞。瘤胃固形物中的ω-3酸是来自尚未受损的全藻细胞的酸。下文以表格形式显示分析结果：
结果显示，裂殖壶菌属和微拟球藻属在本发明的方法中发挥作用并且裂殖壶菌属具有比微拟球藻属更坚固的细胞壁，所述细胞壁或多或少地更好发挥作用以保护藻类中的ω-3酸免于在瘤胃中释放。