本发明涉及水产品加工领域，尤其是一种海产品的酶解冻干粉的制备方法。
背景技术：
现有海产品精深加工中，产品酶解后形成含有多肽、多糖等复合产物，这些产物广泛应用于药品、食品原料等。但现有技术中尚存在诸多有待改进的地方：比如酶解工序所用酶的蛋白质水解度低，蛋白质水解度直接局限了小分子多肽的含量；同时生物酶解后的灭酶和干燥过程中，高温对生物活性物质大量破坏；另外海产品固有的腥臭味在终产品中无法根本去除，影响食品的口感；而且小分子多肽及活性物质在经过消化道时被大量破环，人体吸收率很低。上述这些问题的改进和克服对水产品的深度加工和利用有极其重要的意义，提高了水产品利用率和附加值。
技术实现要素：
针对现有技术存在的不足，本发明提供了一种酶解冻干粉的制备方法，该方法能有效解决现有问题的各方面不足，获得综合效果优异的冻干粉产品。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案是酶解冻干粉的制备方法，包括如下步骤：
清洗：将海产品清洗干净；
匀浆：将清洗后的海产品绞碎匀浆；
粉碎：用纯化水稀释，然后超声粉碎，得到粉碎浆；
酶解：先将中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.5-1.8:1的比例加入到粉碎浆中，酶解1-2h，离心，得上清液A和滤渣A；再在滤渣A中加入纯化水再次酶解，离心，得上清液B和滤渣B；
灭酶：将所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，对所述混合上清液进行超高压灭菌；
脱臭：将灭菌后的混合上清液用层析柱层析，收集洗脱液；
包裹木糖醇：在所述洗脱液中加入木糖醇，搅拌均匀后加入生物反应器中进行反应得到包裹液；
灭菌：将包裹液进行超高压灭菌；
冻干：将灭菌后的包裹液进行冷冻干燥。
于本发明一实施例中，粉碎步骤中纯化水的用量为海产品质量的3-6倍，粉碎时间为30-40min。
于本发明一实施例中，离心采用的是冷冻离心机，速度为3800-4800r/min，离心时间为10-15min。
于本发明一实施例中，酶解步骤中再次加入纯化水的量为滤渣A质量的2-5倍，再次酶解时间为1.5-2h。
于本发明一实施例中，灭酶时的压力为800-1000MPa，时间为20-40min，温度为15-20℃。
于本发明一实施例中，将灭菌后的混合上清液与层析柱按体积比为2.8-3.5:1的比例进行层析。
于本发明一实施例中，将灭菌后的混合上清液与层析柱按3:1的体积比、用恒流泵以2ml/min的流速泵入装有树脂D280的层析柱。
于本发明一实施例中，所述木糖醇的加入量为洗脱液质量的10％，在生物反应器中的反应压力为500-800MPa，温度为25℃，反应时间90min。
于本发明一实施例中，包裹液的灭菌参数为压力800-1000MPa，温度15-20℃，时间20-40min。
于本发明一实施例中，所述冷冻干燥的温度为-30～-25℃。
本发明具有以下有益效果：
通过设置相应的处理步骤及特定的工艺条件，采用清洗-匀浆-粉碎-酶解-灭酶-脱臭-包裹木糖醇-灭菌-冻干的制备方法，使得加工过程中生物活性物质最大程度的保留不被破坏，同时彻底除去海产品的异味，不影响产品口感，另外通过包裹糖衣处理使得在被食用阶段活性物质能最大程度地被消化道吸收，提高了冻干粉的利用率和有效性。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的描述。
实施例1
海参的酶解冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
1、清洗：将海参去除内脏，清洗干净；
2、匀浆：将清洗后的海参绞碎成海参浆；
3、粉碎：用海参浆质量3倍的纯化水或去离子水将海参浆稀释，然后用超声波粉碎机将海参浆在60w功率下粉碎30min。
4、酶解：先将中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.5:1的比例加入到粉碎后的海参浆中，加酶量8％，即中性蛋白酶和木瓜蛋白酶总的加入量为海参浆质量分数的8％，酶解1h，然后用冷冻离心机离心，转速4000-4200r/min，离心10min，得到上清液A和滤渣A。再在滤渣A中加入滤渣A质量的2倍的纯化水再次酶解，再次酶解时间为1.5-2h，然后用冷冻离心机离心，转速3800-4000r/min，离心15min，得上清液B和滤渣B。
5、灭酶：将所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，对所述混合上清液进行超高压灭菌，灭酶时的压力为1000MPa，时间为20min，温度为20℃。
6、脱臭：将灭菌后的混合上清液按3:1的比例、用恒流泵以2ml/min的流速泵入装有树脂D280层析柱，收集洗脱液。
7、包裹木糖醇：在所述洗脱液中加入木糖醇，木糖醇的加入量为洗脱液质量的10％，搅拌均匀后加入生物反应器中进行反应得到包裹液；所述反应压力为500-800MPa，温度为25℃，反应时间90min。
8、灭菌：将包裹液进行超高压灭菌；灭菌参数为压力800MPa，温度15℃，时间40min。
9、冻干：将灭菌后的包裹液进行冷冻干燥，温度为-30～-25℃。
实施例2
海参的酶解冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
1、清洗：将海参去除内脏，清洗干净；
2、匀浆：将清洗后的海参绞碎成海参浆；
3、粉碎：用海参浆质量6倍的纯化水或去离子水将海参浆稀释，然后用超声波粉碎机将海参浆在60w功率下粉碎40min。
4、酶解：先将中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.6:1的比例加入到粉碎后的海参浆中，加酶量9％，即中性蛋白酶和木瓜蛋白酶总的加入量为海参浆质量分数的9％，酶解1h，然后用冷冻离心机离心，转速4000-4200r/min，离心10min，得到上清液A和滤渣A。再在滤渣A中加入滤渣A质量的3倍的纯化水再次酶解，再次酶解时间为1.5-2h，然后用冷冻离心机离心，转速4000-4200r/min，离心10min，得上清液B和滤渣B。
5、灭酶：将所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，对所述混合上清液进行超高压灭菌，灭酶时的压力为1000MPa，时间为20min，温度为20℃。
6、脱臭：将灭菌后的混合上清液按2.8:1的比例、用恒流泵以2ml/min的流速泵入装有树脂D280层析柱，收集洗脱液。
7、包裹木糖醇：在所述洗脱液中加入木糖醇，木糖醇的加入量为洗脱液质量的10％，搅拌均匀后加入生物反应器中进行反应得到包裹液；所述反应压力为500-800MPa，温度为25℃，反应时间90min。
8、灭菌：将包裹液进行超高压灭菌；灭菌参数为压力800MPa，温度15℃，时间40min。
9、冻干：将灭菌后的包裹液进行冷冻干燥，温度为-30～-25℃。
实施例3
酶解冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
1、清洗：将牡蛎肉去除外壳，清洗干净；
2、匀浆：将清洗后的牡蛎肉绞碎成牡蛎肉浆；
3、粉碎：用牡蛎肉浆质量4倍的纯化水或去离子水将牡蛎肉浆稀释，然后用超声波粉碎机将牡蛎肉浆在60w功率下粉碎35min。
4、酶解：先将中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.6:1的比例加入到粉碎后的海参浆中，加酶量8％，即中性蛋白酶和木瓜蛋白酶总的加入量为牡蛎肉浆质量分数的8％，酶解1h，然后用冷冻离心机离心，转速4000-4200r/min，离心10min，得到上清液A和滤渣A。再在滤渣A中加入滤渣A质量的4倍的纯化水再次酶解，再次酶解时间为1.5-2h，然后用冷冻离心机离心，转速4600-4800r/min，离心15min，得上清液B和滤渣B。
5、灭酶：将所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，对所述混合上清液进行超高压灭菌，灭酶时的压力为1000MPa，时间为30min，温度为20℃。
6、脱臭：将灭菌后的混合上清液按3:1的比例，用恒流泵以2ml/min的流速泵入装有树脂D280层析柱，收集洗脱液。
7、包裹木糖醇：在所述洗脱液中加入木糖醇，木糖醇的加入量为洗脱液质量的10％，搅拌均匀后加入生物反应器中进行反应得到包裹液；所述反应压力为500-800MPa，温度为25℃，反应时间90min。
8、灭菌：将包裹液进行超高压灭菌；灭菌参数为压力800-1000MPa，温度15-20℃，时间20-40min。
9、冻干：将灭菌后的包裹液进行冷冻干燥，温度为-30～-25℃。
实施例4
酶解冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
1、清洗：将海虹去除外壳，清洗干净；
2、匀浆：将清洗后的海虹肉绞碎成海虹肉浆；
3、粉碎：用海虹肉浆质量5倍的纯化水或去离子水将海虹肉浆稀释，然后用超声波粉碎机将海虹肉浆在60w功率下粉碎40min。
4、酶解：先将中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1.8:1的比例加入到粉碎后的海参浆中，加酶量8％(即中性蛋白酶和木瓜蛋白酶总的加入量为海虹肉浆质量分数的8％)，酶解2h，然后用冷冻离心机离心，转速3800-4000r/min，离心10min，得到上清液A和滤渣A。再在滤渣A中加入滤渣A质量的3倍的纯化水再次酶解，再次酶解时间为1.5-2h，然后用冷冻离心机离心，转速4600-4800r/min，离心15min，得上清液B和滤渣B。
5、灭酶：将所述上清液A和上清液B合并一起得到混合上清液，对所述混合上清液进行超高压灭菌，灭酶时的压力为800-1000MPa，时间为20-40min，温度为5-20℃。
6、脱臭：将灭菌后的混合上清液按3.5:1的比例，用恒流泵以2ml/min的流速泵入装有树脂D280层析柱，收集洗脱液。
7、包裹木糖醇：在所述洗脱液中加入木糖醇，木糖醇的加入量为洗脱液质量的10％，搅拌均匀后加入生物反应器中进行反应得到包裹液；所述反应压力为500-800MPa，温度为25℃，反应时间90min。
8、灭菌：将包裹液进行超高压灭菌；灭菌参数为压力800-1000MPa，温度15-20℃，时间20-40min。
9、冻干：将灭菌后的包裹液进行冷冻干燥，温度为-30～-25℃。
上述实施例通过采用上述两种酶按一定比例复配后进行多次酶解，从而提高了蛋白质水解度；采用超高压灭菌或灭酶，最大程度的保持活性物质的生物活性；利用离子交换树脂脱去酶解液的腥臭味，提高终产品的口感；利用木糖醇不易被消化液破环的原理，用木糖醇包裹活性物质使其不被消化；用低温冷冻干燥法对酶解液进行干燥形成冻干粉。通过上述出处理步骤，得到小分子多肽含量高、生物活性不被破坏且无异味、能被充分吸收利用的海虹冻干粉。
上述具体实施例只是用来解释说明本发明，而非是对本发明进行限制，在本发明的宗旨和权利要求的保护范围内，对本发明做出的任何不付出创造性劳动的替换和改变，皆落入本发明专利的保护范围。