英德红茶在制备减肥和降血糖产品中的应用的制作方法

本发明涉及保健品、食品领域，具体涉及英德红茶在制备减肥和降血糖产品中的应用。
背景技术：
：肥胖是严重的全球公共卫生问题之一，是在遗传因素、环境因素、能量摄入和消耗失衡影响下，引起体内脂肪过多沉积，增加机体总胆固醇(tc)，甘油三酯(tg)和低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)以及降低高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)，导致脂肪堆积，体重升高，发生一系列生理病理变化的全身性营养代谢障碍性疾病。肥胖通常会伴随诱发糖尿病等并发症。糖尿病(diabetesmellitus,dm)是一种体内胰岛素分泌相对或绝对不足而引起的糖代谢紊乱为主要特征的代谢疾病，伴有脂肪、蛋白质等代谢障碍，还可诱发dm肾病、dm性心肌病、眼疾、病足等多种并发症，是威胁人类健康的主要疾病之一。目前用于预防或治疗肥胖的方法主要有包括节食疗法、运动疗法、药物疗法和外科疗法等。饮食疗法和运动疗法是减肥最基本干预方法，需要需要病人配合并长期坚持。临床药物干预肥胖的药物主要通过抑制食欲和抑制脂肪酶的活性，减少脂类物质的消化吸收来实现，会引起不消化道症状等不良反应。手术干预一般适用于重症肥胖患者，可降低心血管病、癌症的发病风险。目前除了改变外表的吸脂手术外，还有控制胃容量的一系列手术。如通过植入设备控制胃容量(胃束带、胃内水球)，或者物理缩小胃容量(缩胃手术)，或者是缩短小肠(胃旁路手术)。虽然手术治疗可降低了重症肥胖患者年死亡率，但手术仍存在一定风险，且术后恶心呕吐、感染甚至肠梗阻等不良影响也很常见。以上的预防干预疗法往往会引起营养失衡、代谢紊乱、一定的副作用和药物依赖，对机体造成不良影响。目前开发研制并使用的治疗糖尿病的药物包括胰岛素制剂和口服降血糖药，但易出现低血糖症和胃肠道不适等不良反应，膜岛素治疗也存在作用与胃排空时间不相符，易造成低血糖等副作用。因此仍需要寻找一种天然的减肥和降血糖的物质。作为“国家地理标志保护产品”的英德红茶是“中国红茶之乡”英德市的土特产之一，其堪与印度、斯里兰卡红茶相媲美，是“红茶后起之秀”，其品质具有外形色泽乌润细嫩，汤色红艳明亮，滋味醇厚甜润，具有祁红鲜甜回味，香气浓郁纯正，叶底鲜艳，以独特的“浓厚、强烈、鲜爽、香醇”风格闻名遐迩。英德红茶富含茶多酚、维生素等诸多成分，硒、锌、钙、铁、锰等上百种微量元素。目前英德红茶的研究主要侧重于完善茶叶加工技术和工艺；研制茶叶加工机械；培育新品种等，尚未有研究其是否具有减肥和降血糖的保健功效。技术实现要素：为了解决上述存在的问题，本发明对英德红茶的减肥和降血糖功效进行研究，增加了英德红茶产品的附加价值。根据英德红茶在保健价值方面近乎空白的现状，而肥胖和高血糖又是人类亚健康的常见疾病，本发明的目的在于提供英德红茶在制备减肥和降血糖产品中的应用。本发明发现英德红茶可抑制了体重的增长，并有效减轻模型动物机体血脂环境的恶化，下调了体内的甘油三脂、胆固醇、低密度脂蛋白含量，增加了高密度脂蛋白含量，同时改善了肝脏和脂肪组织中的细胞形态，从而达到了预防肥胖的效果，解决由饮食因素而引起的肥胖问题。此外，本发明还发现英德红茶可降低空腹血糖值，升高糖耐量，改善了多饮多食的糖尿病症状，达到较好的降血糖效果。本发明的目的在于提供英德红茶在制备减肥和降血糖产品中的应用。本发明所采取的技术方案是：英德红茶提取物在制备减肥产品中的应用。进一步的，所述减肥产品为以英德红茶提取物为活性成分制成的任一保健品或食品。英德红茶提取物在制备预防或减缓由饮食因素引起的体重增加的产品中的应用。英德红茶提取物在制备预防或减缓由饮食因素引起的总胆固醇、甘油三酯和/或低密度脂蛋白胆固醇含量增高的产品中的应用。英德红茶提取物在制备预防或减缓由饮食因素引起的高密度脂蛋白胆固醇的含量下降的产品中的应用。英德红茶提取物在制备预防或抑制脂肪细胞膨大或/和内脏脂肪累积的产品中的应用。英德红茶提取物在制备降血糖产品中的应用。进一步的，所述降血糖产品为以英德红茶提取物为活性成分制成的任一保健品或食品。英德红茶提取物在制备预防或减缓由四氧嘧啶引起的空腹血糖值升高的产品中的应用。英德红茶提取物在制备预防或减缓由四氧嘧啶引起的糖耐量、糖化血清蛋白和/或肝糖原含量增高的产品中的应用。英德红茶提取物在制备改善糖尿病多饮多食症状的产品中的应用。进一步的，所述英德红茶提取物为英德红茶水提取物。进一步的，所述英德红茶水提取物的制备方法为将英德红茶叶粉碎按照固液比0.8～1.2g：8～12ml在85～95℃水中浸提8～15min，过滤，所得滤液为英德红茶水提取物。本发明的有益效果是：(1)本发明能够有效抑制了体重的增长、减轻肥胖机体内血脂环境的恶化，减少肝脏和脂肪组织中的脂肪堆积，并下调了体内的甘油三脂、胆固醇、低密度脂蛋白含量，增加了高密度脂蛋白含量，同时还能够减少体重的增长，从而达到了预防肥胖的效果，解决由饮食因素而引起的肥胖问题。(2)本发明英德红茶提取物还能够降低空腹血糖值，改善糖耐量低下和糖尿病的症状，达到较好的降血糖效果。使用英德红茶提取物后可预防小鼠的肥胖和高血糖的诱发，提高小鼠的抗肥胖和降血糖的能力。本发明是发明人首次发现英德红茶水提物具有减肥和降血糖的功能，以英德红茶水提物为主要活性成分制备得到的产品具有较佳的减肥和降血糖功效，本发明可大大的扩展英德红茶水提物的使用范围。(3)本发明在将英德红茶以内服用产品的形式作用于小鼠时，不仅能治疗或缓解由高脂饲料或四氧嘧啶引起的生化指标变化，保持体内的生化指标与正常水平一致，在拓展英德红茶的使用方法的同时保证了产品的安全性。附图说明图1为光镜下实验小鼠腹脂肪细胞形态图(显微镜下×200倍)；其中，a组为空白对照组，b组模型对照组，c组为阳性对照组，d为英德红茶提取物组；图2为光镜下实验小鼠肝脏组织形态图(显微镜下×200倍)；其中，a组为空白对照组，b组模型对照组，c组为阳性对照组，d为英德红茶提取物组。具体实施方式英德红茶水提取物在制备减肥和降血糖产品中的应用。优选地，所述减肥和降血糖产品为以英德红茶水提取物为活性成分制成的任一保健品和食品上可接受的产品。优选地，所述减肥和降血糖产品为功能性保健产品；进一步优选地，所述保健产品为胶囊、冲剂、片剂。优选地，所述减肥和降血糖产品为功能性保健产品；进一步优选地，所述食品为饮品、茶包、固体饮料。优选地，英德红茶水提取物在制备治疗或缓解由饮食因素引起的甘油三脂、胆固醇、低密度脂蛋白含量升高的产品中的应用；发明人在进行英德红茶水提取物对小鼠进行实验后发现，英德红茶水提取物能够对由摄取过量高热量食物引起的小鼠体重增加具有明显的改善作用，从而能够预防肥胖的发生。优选地，英德红茶水提取物在制备治疗或缓解由饮食因素引起的高密度脂蛋白含量降低的产品中的应用；发明人在进行英德红茶水提取物对小鼠进行实验后发现，较模型组相比，灌服英德红茶水提取物的小鼠体内的高密度脂蛋白含量高于模型组中的含量。优选地，英德红茶水提取物在制备治疗或缓解由饮食因素引起的肥胖产品中的应用，进一步优选地，所述产品为能够抑制脂肪细胞膨大，减少脂肪的积累的产品，发明人经过小鼠实验发现，使用英德红茶水提取物组的小鼠脂肪细胞大小较模型组均有所减小，且形态规则、细胞界限较为清晰，明显优于模型组小鼠。本发明的另一目的在于提供英德红茶水提取物在制备降血糖产品中的应用。优选地，英德红茶水提取物在制备治疗或缓解由四氧嘧啶溶液引起的空腹血糖值升高的产品中的应用；发明人在进行英德红茶水提取物对小鼠进行实验后发现，英德红茶水提取物能够对由四氧嘧啶溶液引起的小鼠体内的空腹血糖值升高具有明显的改善作用，从而能够预防高血糖疾病的发生。优选地，英德红茶水提取物在制备治疗或缓解由饮食因素引起的糖耐量降低的产品中的应用；发明人在进行英德红茶水提取物对小鼠进行实验后发现，与模型组相比，灌服英德红茶水提取物组小鼠体内的糖耐量高于模型组。优选地，英德红茶水提取物在制备治疗或缓解由饮食因素引起的降血糖产品中的应用，发明人经过小鼠实验发现，与模型组相比，使用英德红茶水提取物组小鼠改善了多饮、多食的症状。下面结合具体实施例进一步说明本发明。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法：所使用原料、助剂等，如无特殊说明，均为可从常规市场购买等商业途径得到的原料和助剂。实施例1英德红茶水提取物的制备将英德红茶叶粉碎，过30目筛，按照固液比1:10(1g：10ml)在90℃蒸馏水中浸提10min，得到水提液，精密过滤，滤液备用。实施例2英德红茶对肥胖小鼠体重、食物利用率、lee’s指数、脂肪系数的影响方法：(1)55只健康小鼠自由采食和饮水，适应性喂养基础饲料1周后，按体质量随机分为2组：空白对照组(10只)和造模组(45只)。空白对照组饲喂基础饲料，造模组饲喂高脂饲料，每周称量2次体质量。造模组用于建立肥胖模型，根据公式①计算小鼠肥胖度，当肥胖度大于20％时即为肥胖模型建立成功，即处肥胖小鼠。采用高脂饮食建立小鼠肥胖模型后，随机分成正常对照组、高脂模型组、英德红茶提取物组和阳性对照组(喂食辛伐他汀药物)，每组各10只，英德红茶组给予1g/(kg·d)的英德红茶水提物，阳性对照组给予10mg/(kg·d)辛伐他汀药液，给药体积为0.1ml/10g，正常对照组和模型组给予蒸馏水，连续灌胃4周。(2)4周后，称量体重体长，计算肥胖指数(lee’s)、摄食量、食物利用率，考察英德红茶水提物对体态的影响。每组小鼠自由采食和饮水，灌胃期间每天记录小鼠的摄食量②，每周称量体质量，连续4周。计算肥胖指数(lee’s)③、食物利用率④：摄食量/g＝给食量/g-剩食量/g-撒食量/g②结果：(1)体重评价表1各组小鼠体重变化(g，n＝10)注：表中数据用平均值±标准差表示；*代表各组分别与模型组比较具有统计学差异，p<0.05。小鼠体重检测结果如表1所示，小鼠体重随灌胃时间增长总体上不断增加。正常对照组体重增长速率几乎不受灌胃影响。在灌胃期间，各组实验组的体重增长显著低于高脂模型组(p＜0.05)，说明英德红茶和阳性对照药物均可有效抑制肥胖小鼠模型体重的增长。(2)英德红茶提取物对肥胖小鼠食物利用率、lee’s指数、脂肪系数的影响表2各组小鼠食物利用率、lee's指数、脂肪系数变化(％，n＝10)组别食物利用率lee's指数空白对照组5.63±6.571.52±0.03*模型组6.44±11.272.63±0.05阳性组5.78±8.751.65±0.04*英德红茶提取物组5.72±11.011.71±0.04*注：表中数据用平均值±标准差表示；*代表各组分别与模型组比较具有统计学差异，p<0.05。如表2所示，各组小鼠食物利用率变化无显著性差异，由此可的，英德红茶提取物和阳性对照药物不影响小鼠的摄食量。lee’s指数主要反映动物机体的肥胖程度，各组lee's指数显著低于模型组，均有统计学差异(p＜0.05)，表明英德红茶提取物和阳性对照药物可降低肥胖小鼠lee's指数。实施例3英德红茶提取物对饮食导致的小鼠血清中td、tg、ldlc减少的影响方法：采用高脂饮食建立小鼠肥胖模型后，随机分成正常对照组、高脂模型组、英德红茶提取物组和阳性对照组(喂食辛伐他汀药物)，每组各10只，英德红茶组给予1g/(kg·d)的英德红茶水提物，阳性对照组给予10mg/(kg·d)辛伐他汀药液，给药体积为0.1ml/10g，正常对照组和模型组给予蒸馏水，连续灌胃4周。4周后，结束灌胃操作。将各组小鼠禁食不禁水12h，然后对小鼠进行摘眼球采血和取材。血液处理：3000rpm/min离心10min，吸取上清液(血清)，采用elisa试剂盒测定血清及肝脏的总胆固醇(td)、甘油三酯(tg)、低密度脂蛋白胆固醇(ldlc)、高密度脂蛋白胆固醇(hdlc)等生化指标。按照酶法试剂盒说明书进行td、tg、ldlc、hdlc水平测定。结果：检测结果如表3所示，肥胖与体内的血脂水平密切相关。与空白对照组相比，肥胖模型组小鼠的td、tg、ldlc含量普遍偏高，hdlc蛋白含量下降；与模型组比较，英德红茶提取物组和阳性对照组小鼠的td、tg、ldlc含量明显降低，hdlc蛋白含量升高，均具有统计学意义(p＜0.05)。由此可得，英德红茶提取物能够降低肥胖小鼠血清td、tg、ldlc含量，升高hdlc含量，改善血脂水平，起到减肥效果。表3各组小鼠td、tg、ldlc、hdlc变化(mmol/l，n＝10)组别tdtgldl-chdl-c空白对照组2.98±0.51*1.25±0.53*0.21±0.15*4.65±1.03*模型组4.51±0.672.77±0.620.67±0.182.27±0.93阳性组3.18±0.95*1.44±0.49*0.27±0.16*4.07±1.21*英德红茶提取物组3.27±1.09*1.58±0.69*0.32±0.20*3.92±1.74*注：表中数据用平均值±标准差表示；*代表各组分别与模型组比较具有统计学差异，p<0.05。实施例4英德红茶水提物对内脏脂肪累积的抑制效果。方法：采用高脂饮食建立小鼠肥胖模型后，随机分成正常对照组、高脂模型组、英德红茶提取物组和阳性对照组(喂食辛伐他汀药物)，每组各10只，英德红茶组给予1g/(kg·d)的英德红茶水提物，阳性对照组给予10mg/(kg·d)辛伐他汀药液，给药体积为0.1ml/10g，正常对照组和模型组给予蒸馏水，连续灌胃4周。将小鼠处死，称取腹腔内脏器周围脂肪的湿重，计算脂肪系数，考察英德红茶水提物对内脏脂肪累积的抑制效果。打开小鼠腹腔取出周围的脂肪，用电子天平称量其湿质量，按照公式⑤计算小鼠脂肪系数。结果：检测结果如表4所示，模型组的脂肪指数明显高于空白对照组(p＜0.05)，说明高脂模型建模成功。脂肪系数反映了小鼠内脏脂肪性肥胖的程度，与模型组相比，英德红茶提取物组和阳性对照组的脂肪系数有统计学意义(p＜0.05)。以上结果表明，英德红茶提取物在不影响食物利用率的条件下，能减少小鼠体内脂肪积累，起到抑制体重增长的作用。表4各组小鼠脂肪系数变化(mmol/l，n＝10)注：表中数据用平均值±标准差表示；*代表各组分别与模型组比较具有统计学差异，p<0.05。实施例5英德红茶水提物对脂肪细胞和肝脏病理学变化的影响方法：采用高脂饮食建立小鼠肥胖模型后，随机分成正常对照组、高脂模型组、英德红茶提取物组和阳性对照组(喂食辛伐他汀药物)，每组各10只，英德红茶组给予1g/(kg·d)的英德红茶水提物，阳性对照组给予10mg/(kg·d)辛伐他汀药液，给药体积为0.1ml/10g，正常对照组和模型组给予蒸馏水，连续灌胃4周。制备he染色组织病理切片，观察脂肪细胞和肝脏病理学变化。具体操作为：将小鼠处死后，取其腹腔内同一部位的脂肪组织，立即浸泡在10％甲醛固定液中固定48h，将固定好的组织按病理切片制备的标准步骤:：修材→自来水冲8h→梯度酒精脱水→包埋→切片(4μm)→烘片→脱蜡→复水→he染色→透明→封片。在高倍光学显微镜下观察拍照。取肝脏同一部位的组织，同样按上述步骤制作肝脏病理组织切片，在高倍光学显微镜下观察肝脏组织的病变情况。结果：检测结果如图1和图2所示。从图1可以看出，模型组脂肪细胞的大小明显偏大，阳性组和英德红茶提取物组的细胞大小较模型组均有所减小，且形态规则、细胞界限清晰，接近正常组织形态；说明英德红茶提取物能够抑制脂肪细胞膨大，减少脂肪的积累。从图2可以看出正常肝脏组织结构完整，肝小叶轮廓清晰，肝细胞围绕中央静脉呈放射状排列；模型组肝小叶结构紊乱，纤维组织增生明显；阳性组和英德红茶提取物组肝脏组织结构紊乱不明显，脂肪变性减少，说明英德红茶提取物组可以保护肝脏损伤。实施例6英德红茶提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖的影响方法：(1)55只健康小鼠自由采食和饮水，适应性喂养基础饲料1周后，按体质量随机分为2组：空白对照组(10只)和造模组(45只)。模型小鼠采用单次腹腔注射1％四氧嘧啶生理盐水溶液(200mg/kg)，注射后恢复正常饮食。3d后禁食8h，小鼠尾静脉微量取血测定血清血糖水平，血糖水平大于11.1mmol/l的小鼠视为高血糖模型造模成功，即为四氧嘧啶糖尿病小鼠。采用单次腹腔注射1％四氧嘧啶生理盐水溶液建立小鼠高血糖模型后，随机分成正常对照组、高血糖模型、英德红茶提取物组和阳性对照组(喂食二甲双胍药物)，每组各10只，英德红茶组给予1g/(kg·d)的英德红茶水提物，阳性对照组给予65mg/(kg·d)二甲双胍药液，给药体积为0.1ml/10g，正常对照组和模型组给予蒸馏水，连续灌胃4周。(2)测定空腹血糖(bg)浓度，评价英德红茶水提物对空腹血糖的影响。采用血糖仪测定。分别在0d，7d、14d和28d时将小鼠禁食12h，通过尾部取血的方法，滴在血糖试条的反应端，用血糖仪测定小鼠的空腹血糖值。结果：检测结果如表5所示，与正常对照组相比，注射四氧嘧啶溶液后，各组小鼠的血糖值显著升高。经给药7d后，与模型组相比较，阳性对照组和英德红茶提取物组的血糖值稍有下降，但无显著性差异(p＞0.05)；给药14d、28d后，与模型组相比较，阳性对照组和英德红茶提取物组的血糖值均显著下降(p＜0.05)。由此可得，英德红茶提取物能够降低糖尿病模型小鼠空腹血糖浓度，起到一定的降糖作用。表5各组小鼠空腹血糖浓度变化情况(mmol/l，n＝10)组别0d7d14d28d空白对照组2.87±0.45*3.25±0.63*3.96±0.55*4.65±1.03*模型组22.51±2.6722.74±3.3224.93±3.1826.67±2.93阳性组23.18±2.9522.44±2.4920.67±3.16*20.07±2.21*英德红茶提取物组22.79±2.0922.58±2.6921.02±3.07*20.82±2.74*注：表中数据用平均值±标准差表示；*代表各组分别与模型组比较具有统计学差异，p<0.05。实施例7英德红茶提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量的影响方法：采用单次腹腔注射1％四氧嘧啶生理盐水溶液建立小鼠高血糖模型后，随机分成正常对照组、高血糖模型、英德红茶提取物组和阳性对照组(喂食二甲双胍药物)，每组各10只，英德红茶组给予1g/(kg·d)的英德红茶水提物，阳性对照组给予65mg/(kg·d)二甲双胍药液，给药体积为0.1ml/10g，正常对照组和模型组给予蒸馏水，连续灌胃4周。测定葡萄糖负荷后0min、30min、60min、120min血糖水平，检测英德红茶水提物对糖耐量(ogtt)的影响，考察对血糖调节的能力和糖代谢功能的影响。实验的最后1天，测定其口服糖耐量。在小鼠禁食不禁水12h后，在给予药物或纯水后，于各组小鼠灌胃葡萄糖溶液(2g/kg)。分别测定给药前空腹血糖、给糖前(0min)、给糖后(30min、60min、120min)的血糖值根据测定结果计算其曲线下面积(auc)⑥，比较葡萄糖耐量水平。(其中a、b、c分别为给葡萄糖后30min、60min、120min的血糖值)实验结果：检测结果如表6所示，空白对照小鼠在口服给予葡萄糖接受糖负荷后，血糖值在30min达到最高水平，随后逐渐开始恢复，60min时，血糖值下降明显，120min时降至正常水平。模型组小鼠血糖在30min时达到最高水平，其后一直维持较高水平，表现出糖耐量降低的特征。阳性对照组和英德红茶提取物组的血糖值在30min时达到最高水平，但随后呈逐渐下降趋势，120min时几乎恢复至接受糖负荷前水平。与模型组相比较，阳性对照组和英德红茶提取物组的血糖值在60min、120min时显著下降(p＜0.05)，血糖曲线下面积下移显著(p＜0.05)。由此可得，英德红茶提取物对糖尿病模型小鼠的葡萄糖耐量具有明显的改善作用。表6英德红茶提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量变化情况(mmol/l，n＝10)注：表中数据用平均值±标准差表示；*代表各组分别与模型组比较具有统计学差异，p<0.05。实施例8英德红茶提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖尿病症状的影响方法：采用单次腹腔注射1％四氧嘧啶生理盐水溶液建立小鼠高血糖模型后，随机分成正常对照组、高血糖模型、英德红茶提取物组和阳性对照组(喂食二甲双胍药物)，每组各10只，英德红茶组给予1g/(kg·d)的英德红茶水提物，阳性对照组给予65mg/(kg·d)二甲双胍药液，给药体积为0.1ml/10g，正常对照组和模型组给予蒸馏水，连续灌胃4周。每组小鼠自由采食和饮水，灌胃期间每天记录小鼠的饮水量和摄食量，连续4周。结果：检测结果如表7所示，对四氧嘧啶糖尿病小鼠的饮水量和摄食量的进行动态监测，由实验数据变化发现，空白对照组小鼠的饮水量和摄食量都处于平稳状态，并没有发生显著性变化。其余各组小鼠的饮水量和摄食量变化趋势有所差异，模型组小鼠每周的平均饮水量和摄食量均发生明显的升高；阳性对照组和英德红茶提取物组小鼠的饮水量和摄食量于前3周都存在不同程度的增加，于第4周则开始降低。与模型组相比较，阳性对照组和英德红茶提取物组的饮水量和摄食量均显著减少(p＜0.05)。由此可得，英德红茶提取物可以改善糖尿病模型小鼠多饮多食的糖尿病症状。表7英德红茶提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖尿病症状的影响(n＝10)注：表中数据用平均值±标准差表示；*代表各组分别与模型组比较具有统计学差异，p<0.05。上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12