一种鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片及其制备方法与流程

本发明涉及保健品技术领域，尤其涉及一种鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片及其制备方法。

背景技术：

鹿骨为梅花鹿或马鹿的骨骼，是中国传统中药。《本草纲目》记载鹿骨有补内虚、续绝伤、补骨强筋等功效。现代研究表明鹿骨中含有大量人体必需的氨基酸、蛋白质、脂肪酸、矿质元素等营养成分。但市面上鹿骨相关产品并不多见，其利用价值一直被人们所忽略，造成了资源浪费。

随着我国老龄化社会的到来，骨质疏松人群逐渐增多，目前市面上的补钙产品主要分为三类，第一类是离子钙，如葡萄糖酸钙及乳酸钙等，此类钙剂化学结构松散，容易和人体内的酸反应形成钙沉积；第二类为分子钙，主要以碳酸钙为代表，此类钙化学结构紧密，进入人体后不易分解，容易形成结石并对胃有一定刺激；第三类为螯合钙，通过将蛋白水解为多肽再与钙离子螯合，经人体服用后螯合钙可在细胞中主动分裂，释放出钙离子被细胞利用，提高了钙的吸收率和生物利用度。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片及其制备方法，制备的鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片片面完整光滑，符合药典要求。

为解决以上技术问题，本发明提供了一种鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片，按照重量份计，包括以下组分：

鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉：300～400份；

维生素d3:0.5～1份；

糖粉：50～100份；

麦芽糊精：15～30份；

羧甲基淀粉钠：20～40份；

交联聚维酮：10～20份；

pvp-k30：5～10份；

硬脂酸镁：2～3份。

本发明中，所述鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉的含量优选为300～400重量份，更优选为300重量份、320重量份、330重量份、335重量份、340重量份、350重量份、370重量份、400重量份，或以上任意两个数值的区间；进一步优选为300～350重量份；在本发明的一些具体实施例中，所述含量为335重量份。

所述维生素d3的含量优选为0.5～1重量份，更优选为0.5重量份、0.6重量份、0.7重量份、0.8重量份、1重量份，或以上任意两个数值的区间；进一步优选为0.5～0.8重量份；在本发明的一些具体实施例中，所述维生素d3的含量为0.5重量份。

所述糖粉的含量优选为50～100重量份，更优选为50重量份、60重量份、70重量份、80重量份、90重量份、100重量份，或以上任意两个数值的区间；进一步优选的，所述糖粉的含量为80～100重量份；在本发明的一些具体实施例中，所述糖粉的含量为90重量份。

本发明中，所述糖粉为冰糖粉。

所述麦芽糊精的含量优选为15～30重量份，更优选为15重量份、16重量份、17重量份、18重量份、19重量份、20重量份、25重量份、30重量份，或以上任意两个数值的区间；进一步优选的，所述麦芽糊精的含量为15～20重量份；在本发明的一些具体实施例中，所述麦芽糊精的含量为19重量份。

所述羧甲基淀粉钠的含量优选为20～40重量份，更优选为20重量份、22重量份、24重量份、25重量份、27重量份、29重量份、31重量份、33重量份、35重量份、37重量份、40重量份，或以上任意两个数值的区间；进一步优选的，所述羧甲基淀粉钠的含量为25～35重量份；在本发明的一些具体实施例中，所述羧甲基淀粉钠的含量为30重量份。

所述交联聚维酮的含量优选为10～20重量份，更优选为10重量份、12重量份、14重量份、16重量份、17重量份、19重量份、20重量份，或以上任意两个数值的区间；进一步优选的，所述交联聚维酮的含量为12～17重量份；在本发明的一些具体实施例中，所述交联聚维酮的含量为15重量份。

所述pvp-k30的含量优选为5～10重量份，更优选为5重量份、6重量份、7重量份、8重量份、9重量份、10重量份，或以上任意两个数值的区间；进一步优选的，所述pvp-k30的含量为6～9重量份；在本发明的一些具体实施例中，所述pvp-k30的含量为8重量份。

所述硬脂酸镁的含量优选为2～3重量份，更优选为2重量份、2.2重量份、2.4重量份、2.6重量份、2.8重量份、3重量份，或以上任意两个数值的区间；进一步优选的，所述硬脂酸镁的含量为2.2～2.8重量份；在本发明的一些具体实施例中，所述硬脂酸镁的含量为2.5重量份。

本发明优选的，所述鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片，按照重量份计，包括以下组分：

鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉：300～350份；

维生素d3:0.5～0.8份；

糖粉：80～100份；

麦芽糊精：15～20份；

羧甲基淀粉钠：25～35份；

交联聚维酮：12～17份；

pvp-k30：6～9份；

硬脂酸镁：2.2～2.8份。

在本发明的一些具体实施例中，所述鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片，按照重量份计，包括以下组分：

鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉：335份；

维生素d3:0.5份；

糖粉：90份；

麦芽糊精：19份；

羧甲基淀粉钠：30份；

交联聚维酮：15份；

pvp-k30：8份；

硬脂酸镁：2.5份。

本发明中，所述鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉按照以下方法制备：

s1)将鹿骨在蒸馏水中高压蒸煮，冷却至室温，以凯氏定氮法测定溶液蛋白含量；

s2)根据溶液中蛋白含量加入中性蛋白酶，调节ph至6.0，水浴中进行水解，得到胶原蛋白多肽酶解液；

s3)将s2)得到的胶原蛋白多肽酶解液通过凝胶层析的方法分离组分，得到组分1、组分2和组分3；所述组分1≥10k，所述组分2为5k～10k，所述组分3＜5k；

s4)选取组分3，与氯化钙混合，水浴中螯合，加入乙醇进行沉淀，取上清液，为鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙溶液；

s5)所述鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙溶液经真空冷冻干燥得到鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉。

优选的，所述步骤s2)中，水解的温度为30～70℃，水解的时间为6～10h。

优选的，所述步骤s3)中，分离组分的具体方法为：

将s2)得到的胶原蛋白多肽酶解液过sephadexg-25凝胶层析分离组分，0～1mol/lnacl溶液梯度洗脱。

本发明通过计算，分别得到组分1、组分2和组分3中，dpph清除率。

具体的，各组分dpph自由基清除率的测定如下：

配制1.3×10^-4的dpph乙醇溶液，取酶解液及分离的组分1，2，3各2ml与等量dpph乙醇溶液室温反应30min，于517nm处测吸光度(a0)，分别取酶解液及组分1，2，3各2ml与等量无水乙醇溶液室温反应30min，于517nm处测吸光度(a1)，分别取无水乙醇及dpph乙醇溶液各2ml，室温反应30min，于517nm处测吸光度(a2)，dpph自由基清除率计算公式：

经计算，组分3的dpph清除率最高。选取组分3进行后续试验。

优选的，所述步骤s4)具体为：

选取组分3，以双缩脲法测定多肽浓度，根据多肽含量向组分3中以多肽：氯化钙＝1:1的摩尔比加入氯化钙，调节ph至6.0，水浴中螯合，加入乙醇进行沉淀，取上清液，为鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙溶液。

优选的，所述步骤s4)中，水浴中螯合的温度为30～50℃，水浴中螯合的时间为0.5～2h。

本发明提供了上述鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片的制备方法，包括以下步骤：

a)将维生素d3和鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉混合，得到主料混合物；

b)将主料混合物与麦芽糊精、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、糖粉混合，得到总混合粉；

c)将总混合粉与pvp-k30混合，过筛，得到湿颗粒；

d)将湿颗粒干燥后，与硬脂酸镁混合，压片，得到鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片。

本发明以鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉为主要原料，通过添加维生素d3作为辅助原料，添加糖粉、麦芽糊精作为片剂稀释剂，添加pvp-k30作为粘合剂，添加羧甲基淀粉钠(cms-na)及交联聚维酮(pvpp)作为崩解剂，添加硬脂酸镁作为助流剂，制备的鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片片面完整光滑，片剂的外观、硬度、崩解时间均符合药典要求。

附图说明

图1为实施例1中，组分1、组分2、组分3的dpph清除率结果。

具体实施方式

为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片及其制备方法进行详细描述。

实施例1鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉的制备

1)取新鲜梅花鹿鹿骨5kg切成5cm小段，加入蒸馏水5l高压蒸煮3h，冷却至室温，以凯氏定氮法测定溶液蛋白含量；

2)根据溶液中蛋白含量加入60000u/g的中性蛋白酶，调节ph至6.0，50℃水浴中水解8h，得胶原蛋白多肽酶解液，以茚三酮比色法测定水解率；

3)取胶原蛋白多肽酶解液过sephadexg-25凝胶层析分离组分，0-1mol/lnacl溶液梯度洗脱分离出组分1(≥10k)，组分2(5k-10k)及组分3(＜5k)；

4)各组分dpph自由基清除率测定，配制1.3×10^-4的dpph乙醇溶液，取酶解液及分离的组分1，2，3各2ml与等量dpph乙醇溶液室温反应30min，于517nm处测吸光度(a0)，分别取酶解液及组分1，2，3各2ml与等量无水乙醇溶液室温反应30min，于517nm处测吸光度(a1)，分别取无水乙醇及dpph乙醇溶液各2ml，室温反应30min，于517nm处测吸光度(a2)，dpph自由基清除率计算公式：

酶解液及各组分dpph自由基清除率结果见图1。

5)选择dpph清除率最高的组分3以双缩脲法测定多肽浓度，根据多肽含量向多肽液中以多肽：氯化钙＝1:1的比例加入氯化钙，调节ph至6.0，40℃水浴中螯合1h，加入6倍体积的无水乙醇沉淀3h后5000r/min离心10min，取上清既得，以edta滴定法测定溶液中可溶性钙含量；

6)抗氧化肽螯合钙溶液经真空冷冻干燥既得抗氧化肽螯合钙粉。

实施例2组分确定

按照表1的组分及配比制备片剂。

表1辅料种类及用量筛选结果

由表1可以看出，编号1制备的片剂，崩解时限为34min>30min,不符合《2015版中国药典》第四部制剂通则项下片剂崩解时限要求。

编号2及编号4制备的片剂硬度不符合要求。

编号3制备的片剂为最佳配方及配比。

经筛选，辅料种类及用量如表2所示。

表2辅料种类及用量筛选确定制粒配方

实施例3硬脂酸镁用量筛选

将干燥的干颗粒进行整粒后，添加助流剂用于改善颗粒的流动性和保证颗粒压出来的片面光滑，减少或防止片剂在压片时产生粘冲的现象。因此以添加硬脂酸镁的用量为考察因素，以颗粒的休止角和外观性状为考察指标，确定最佳的润滑剂用量，实验结果见表3。

表3润滑剂用量筛选实验结果

根据表3的实验结果可知，添加0.5％的硬脂酸镁效果最佳。

实施例4制备片剂

根据表4的配方量计算，先将维生素d3和鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙粉采用等量递增的方法进行混合，混合结束后再根据配方量添加麦芽糊精、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、糖粉辅料进行混合，首先以混合物外观“呈现均匀色泽，没有花纹和色斑”为依据判断均匀性，必要时以混合物上、中、下层维生素d3含量rsd值小于2％判定，使其充分混匀，得总混合粉。

总混合粉加10％pvp-k30湿法制软材，使用量约为18.5ml/100g，挤压过20目筛，得湿颗粒。湿颗粒转移至平铺在适宜容器中(厚度≤2cm)，放入干燥设备中55℃下，干燥至水分5.0％-6.0％，整粒得干颗粒。干颗粒添加润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，得中间产品。

调整压片设备压力，将上述制备的中间产品根据产品规格(0.5g/片)进行压片，得最终产品。

最终产品配方如表4所示：

表4鹿骨多肽螯合钙片最终配方

最终制备的片剂成品收率稳定在95％左右；钙含量、维生素d3含量均一稳定，崩解时限小于30min，符合产品技术要求规定。

由上述实施例可知，本发明通过配方的调整，制备的鹿骨胶原抗氧化肽螯合钙片片面完整光滑，外观、硬度崩解时间等性能符合药典要求。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。