一种玉米豆粕日粮用复合酶及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于酶制剂领域，具体是酶及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 名称为一种玉米豆柏型饲料复合酶添加剂及其应用发明专利，【申请号】 201110041719. 6发明提供了一种玉米豆柏型复合酶添加剂及其应用，复合酶添加剂由以 下组分组成：木聚糖酶10% -15% ;纤维素酶8% -15% ; 0 -甘露聚糖酶3% -8% ; a -半 乳糖苷酶5% -15%;酸性蛋白酶5% -10%;中温淀粉酶10% -20%;糖化酶5% -10%;载 体7% -54%。本发明所述复合酶添加剂可以分解玉米豆柏中的营养物质和畜禽难以消化 的粗纤维等大量抗营养因子等，从而充分发掘玉米豆柏中的能量，帮助畜禽提高对玉米豆 柏型饲料的消化能力，降低料肉比；提高营养物质消化率和表观代谢能，减少回肠微生物 数量；与类似添加剂相比具有高效性、专一性和添加量少等优点；使用所述复合酶添加剂 可促进动物生长、提高饲料转化效率。
[0003] 开发玉米豆柏类饲料用的复合酶制剂有利于提高玉米豆柏型饲料的消化吸收效 率，提尚养殖效益，有良好的市场如景。
【发明内容】
[0004] 本发明所解决的技术问题一种玉米豆柏日粮用复合酶，由以下重量份数的原料组 成：e -葡聚糖酶5-10,木聚糖酶8-10,纤维素酶8-15,中温a -淀粉酶3-5,半乳糖苷酶 1-2,酸性蛋白酶1-2,甘露聚糖酶0.5-1，植物乳杆菌胶囊1-2,植物制剂2-4份，生姜提取物 1-2份，甘草1-2份。
[0005] 所述木聚糖酶、e -葡聚糖酶、纤维素酶、中温a -淀粉酶等均为食品级酶制剂；
[0006] 所述植物制剂的制备方法如下：
[0007] 称取决明子10-18份；杜仲5-15份；茯苓10-15份；分别将上述中草药粉碎至粒 径为2毫米以下，然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水，添加上述混合物组分质量 1-2%的酸性纤维素酶，控制温度45-55°C，pH:3. 5-4,保持1-2h，随后添加混合物料2-3倍 重量乙醇和丙醇的混合物，控制温度至6(TC -78°C保持3-4h，过滤；滤液真空浓缩后冷冻干 燥获得植物制剂。
[0008] 所述乙醇和丙醇的质量比例为I:1-1. 5 ;乙醇浓度为95% ;丙醇浓度为100% ;
[0009] 所述生姜提取物的制备方法如下：
[0010] 将粉碎至粒径为2毫米以下生姜置于容器中，添加3-6倍重量的水，控制温 度50 °C -60 °C保持2-3h，添加混合物料2-3倍重量乙醇和甲醇的混合物，控制温度至 30°C -40°C保持3-8h，过滤；滤液真空浓缩后冷冻干燥获得生姜提取物。
[0011] 所述乙醇和甲醇的质量比例为1 :2,乙醇浓度85-95%。甲醇浓度100%。
[0012] 所述植物乳杆菌胶囊的制备方法如下：
[0013]植物乳杆菌胶囊产品由壁材、植物乳杆菌、冻干保护剂、水苏糖、羊肚菌酶解粉组 成。
[0014] 所述的壁材由酶解大豆分离蛋白、壳聚糖、黄原胶、卡拉胶、甘油和海藻糖组成；上 述各物质配成混合溶液时的浓度分别为：酶解大豆分离蛋白7-10%、壳聚糖1-2%、黄原胶 1-3 %、卡拉胶 0. 1-0. 5 %、甘油 0. 3-1 %，海藻糖 0. 5-2 %。
[0015] 酶解大豆分离蛋白的制备方法为：配制浓度为10-13%大豆分离蛋白溶液加热到 30-45°C，调整pH到3-5,加入大豆分离蛋白重量0. 1-1 %的酸性蛋白酶保温酶解0. 5-1. 5 小时，酶解后溶液喷雾干燥获得酶解大豆分离蛋白。
[0016] 羊肚菌酶解粉制备方法如下：
[0017] (1)羊肚菌子实体干燥粉碎；
[0018] (2)水溶均质：将粉碎的羊肚菌子实体加入不锈钢筒中，加入子实体3-6倍重量的 水，浸泡3-5小时，然后将此羊肚菌子实体液通过胶体磨，胶体磨操作条件为：调整胶体磨 定子与转子的间隙为〇. 5-1微米，胶体磨流量为0. 4-1吨/小时；
[0019] (3)升温酶解：将经过胶体磨处理的羊肚菌子实体液混合液转移到不锈钢酶解罐 中加热到50-60°C，调整pH到4. 5-6. 0,加入羊肚菌子实体重量0. 05-0. 1 %的纤维素酶、 0. 01-0. 1%的0-葡聚糖酶、0.01-0. 1%的蛋白酶，保温酶解0.5-1. 5小时，酶解过程中不 断搅拌。
[0020] (4)干燥：酶解后的醪液过滤后干燥获得羊肚菌酶解粉。
[0021] 所述干燥可以采用常规喷雾干燥、冷冻干燥等干燥形式。
[0022] 所述冻干保护剂由脱脂奶粉、海藻糖、麦芽糊精组成。
[0023] 本发明胶囊产品包含的植物乳杆菌优选CGMCC NO. 9405。
[0024] 上述植物乳杆菌胶囊产品制备方法如下：
[0025] 1)制备芯材：向经发酵罐发酵培养的植物乳杆菌发酵液中添加发酵液质量3-5% 的水苏糖和5-8%的羊肚菌酶解粉，然后与冻干保护剂溶液混合，-50°C下预冻0. 5h，然后 在真空冷冻干燥机中冻干l〇_18h，冻干后研磨粉碎制成芯材；
[0026] 所述发酵液与冻干保护剂溶液的比例为1:1.4-0.8 ;所述冻干保护剂溶液由脱 脂奶粉、海藻糖、麦芽糊精溶液组成；三种溶液的体积比为脱脂奶粉：海藻糖：麦芽糊精= 3:1:0? 5;
[0027] 所述脱脂奶粉、海藻糖、麦芽糊精溶液的浓度分别为：脱脂奶粉5%，海藻糖1%， 麦芽糊精2%。
[0028] 2)包被：将芯材悬浮在流化床中，壁材喷雾包被，从一个喷头中喷入壳聚糖、甘油 和海藻糖的混合液，从另一个喷头中喷入黄原胶、卡拉胶和酶解大豆分离蛋白的混合液， 喷雾速度控制相同，包被过程中流化床内温度在25-38 °C之间，30分钟后即形成胶囊。此干 燥方法采用专利201120503311. 1中设备处理。
[0029] 所述中温a _淀粉酶市场购买。
[0030] 本发明复合酶的制备方法如下：
[0031] 将所述甘草、植物制剂和生姜提取物分别超微粉碎，然后与木聚糖酶，纤维素酶， 0 _葡聚糖酶，淀粉酶，半乳糖苷酶，酸性蛋白酶，甘露聚糖酶，植物乳杆菌胶囊均匀混合后 密封包装即得成品复合酶。
[0032] 所述酶适用于饲料加工厂和养殖场自配饲料，使用时应与饲料中的其它原料混合 均匀，可事先将本发明与少量饲料混合均匀，再混合到大批饲料中，直接饲喂。建议每吨全 价料添加量为：100-150g。
[0033] 有益效果：
[0034] 本发明产品中采用植物制剂、生姜提取物、甘草科学复配，有效减缓了酶制剂的回 潮；同时可增强复合酶的耐冻、耐热性能，保持相同的酶活力，其耐热温度可提高l〇_15°C， 耐冷冻温度可降低5-10°C，有效防止了复合酶在运输、保存和使用过程中酶活力的损失，延 长了复合酶的保质期，达到同样的酶活力，同类产品保质期可延长3-5个月。
[0035] 本发明产品添加的植物制剂既可延长复合酶制剂的保质期，又可提高饲养畜禽的 免疫力，有效防止畜禽流行性疾病的发生。
[0036] 本发明提供的乳酸菌微胶囊，其壁材中添加了改性大豆分离蛋白，改性大豆分离 蛋白比大豆分离蛋白乳化能力提高25%、胶凝能力提高15-25%，改性大豆分离蛋白黄原 胶和卡拉胶及壳聚糖的配合使用，凝胶强度提高了 10%以上，增强了胶囊的耐胃酸性；本 发明胶囊采用改性大豆分离蛋白，具有很好的肠溶性，胶囊到达肠道后在1-1. 5小时内即 可完全崩解释放出植物乳杆菌，并迅速增殖成为优势菌群，从而达到抑制病原菌生长等作 用。
[0037] 本发明产品中保护剂与酶制剂、植物制剂、生姜提取物与酶制剂的共同协同作用， 使得复合酶的酶活力和效力最大限度的发挥，并相应的提高了饲料的利用率和动物的生长 率，增强了动物的食欲和抗病能力，延长了产品的保质期和保护了环境。有效降解饲料中的 纤维素、木聚糖、0 -葡聚糖等非淀粉多糖抗营养因子，降低食糜粘度，防腹泻。促进植物细 胞内营养物质释放，提高饲料中营养物质利用率。补充畜禽体内内源酶的分泌不足，促进营 养物质的消化吸收.提高饲料利用率。
[0038] 促进肠道有益菌的生长而抑制有害菌的繁殖，提高动物免疫力和饲养成功率。平 衡原料批次差异化，稳定饲料品质。
【具体实施方式】
[0039] 下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段 均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的 范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本 发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也 属于本发明的保护范围。
[0040] 实施例1
[0041] 本发明所用植物乳杆菌CGMCC No. 9405的选育过程如下：
[0042]原始出发菌种一试管活化一硫酸二乙酯（DES)诱变一亚硝基胍（NTG)诱变一等离 子体诱变一平板初筛一摇瓶复筛一传代稳定性试验。
[0043] 本发明所采用的出发菌株在MRS葡萄糖培养基中，其乳酸的生产速率为I. 5g/L/ d，当培养基pH为3. 5时几乎停止生长，对亚硝酸钠的分解速率为0. 34mg/h/kg白菜。出发 菌株由李政采集于宁夏盐池县育肥羊场的青储饲料，采集时间2013年9月15日。
[0044] 为了提高其乳酸生产速率、耐酸能力和亚硝酸盐的分解速率，依次采用DES和NTG 技术对该菌种进行诱变，诱变后菌株采用MRS碳酸钙平板进行初筛，然后采用500mL摇瓶发 酵，生物传感器分析仪对高产菌进行复筛，选育优良的植物乳杆菌菌株，然后做传代实验， 评价其遗传稳定性。
[0045] 植物乳杆菌tlj-2014遗传稳定性结果表明：经过连续传代十