[0041] 配制培养基，注水（自来水即可)，灭菌温度为115°C，时间为20min，调节pH值至 6. 8 ； 2) 稳定理化指标： 发酵罐转速50rpm，通风1:0.1 vvm,罐压维持在0. 05MPa，液体理化指标稳定后，标定溶 解氧。
[0042] 3)接种发酵： 按照1%的比例接种，培养条件：温度20°c，转速50rpm，罐压为0. 01兆帕，通风量为 1:0. lvvm。该状态下，培养IOh下罐，下罐时活菌数为IX 109cfu/ml以上。
[0043] 4)后处理： 将发酵后的发酵液中，按照质量分数5%添加海盐，按照质量分数2. 5%添加黄原胶， 海水盐增加发酵液渗透压，抑制屎肠球菌代谢，从而防止其产生气体，但并不造成乳酸菌死 亡，有效解决了胀气的问题；黄原胶维持发酵液液相均一稳定，保证发酵液不分层。
[0044] 5)下罐灌装： 发酵后，将发酵液灌装、压盖、贴标和装箱，灌装即得。
[0045] 实施例7水产诱食剂的制备 1) 培养基灭菌： 培养基配方：l〇g/L果糖、50g/L牛肉膏、10g/L酵母膏、15g/L硫酸镁、15g/L NaCl、 15%CaC03〇
[0046] 配制培养基，注水（自来水即可)，灭菌温度为115°C，时间为20min，调节pH值至 6. 8 ； 2) 稳定理化指标： 发酵罐转速50rpm，通风1:0.1 vvm,罐压维持在0.0 lMPa,液体理化指标稳定后，标定溶 解氧。
[0047] 3)接种发酵： 按照10%的比例接种，培养条件：温度20°C，转速50rpm，罐压为0. 01兆帕，通风量为 1:0. lvvm。该状态下，培养IOh下罐，下罐时活菌数为IX 109cfu/ml以上。
[0048] 4)后处理： 发酵液经陶瓷膜过滤，去除菌体。
[0049] 5)下罐灌装： 将上清液灌装、压盖、贴标和装箱后即得。
[0050] 试验例1稳定性试验 试验分为两个处理：试验组(实施例6制备的发酵液+0. 25%黄原胶)、空白发酵液组(实 施例6制备的发酵液)，每个处理3个重复。试验时间：30天。
[0051] 结果如图5所7K，添加黄原胶的发酵液液相均一稳定，30天未分层。而空白发酵液 体系不稳定，发生分层。
[0052] 测定了保藏6个月之后产品的活菌数，结果如表2所示。结果表明本发明的诱食 剂产品活菌数高，产品在长时间保存期间，活菌数基本维持不变。
[0053] 表2本发明诱食剂架期乳酸菌活菌数测定结果
试验例2食丸诱捕试验 1)食丸制备 食丸主要采用谷元粉、面粉、色素、水及试验样品混合，由模具压制成直径〇. 15mm的饼 状食丸，大小均一。
[0054] 2)试验条件 选择50头体重为15g左右的健康南美白对好作为试验研究对象。
[0055] 3)排除视觉偏好 制备赤、橙、红、绿、青、蓝、紫等多色食丸，分别取每种颜色食丸15个，与无色食丸做对 t匕，统计南美白对虾对不同颜色食丸的捕获与采食数量，结果表明，南美白对虾对颜色没有 特别偏好。
[0056] 4)排除色素味觉干扰 制备无色素食丸与含色素食丸进行对比，统计南美白对虾对有、无色素食丸的捕获与 采食数量，结果表明，南美白对虾采食不受该种色素影响。
[0057] 5)试验 制备无色及有色食丸，有色素食丸添加一定量试验产品（实施例6制备的诱食剂、D MP T (二甲基-β-乙酸噻亭)，DMT (硫代甜菜碱)，同时投入水池同一位置，投入饵料 IOmin后，统计南美白对虾对不同颜色食丸的捕获与采食数量，依统计结果判断南美白对虾 对产品的好恶。
[0058] 结果表明（详见图6):南美白对虾对添加本发明诱食剂的食丸摄食最多，其次为 DMPT、DMT及无添加剂食丸，最终添加本发明诱食剂食丸剩余最少，本发明诱食剂的诱食效 果优于DMPT、DMT等化学诱食剂。
[0059] 本试验包含小试验，排除了对虾视觉上对某种颜色的偏好；同时，染色剂选择美 国原装进口惠尔通Wilton翻糖蛋糕色素，通过试验，排除染色剂携带气味对试验结果的影 响。
[0060] 试验例3小试拌料试验结果 1)饵料制备 称取2. Og大北农对虾配合饵料2份，空白组不添加任何添加剂，对照组按照重量比 2. 5%的使用量添加实施例6制备的诱食剂，均加入少量池水润湿备用。
[0061] 2)试验条件 选择50头体重为15g左右的健康南美白对好作为试验研究对象。
[0062] 3)试验 将空白饵料及添加本发明诱食剂的饵料同时投入水池两端位置，摄像、拍照记录试验 状况，依据影像资料，统计南美白对虾对两组饵料的捕获与采食数量，依统计结果判断南美 白对虾对本发明诱食剂的好恶。4 )试验结果 结果表明(详见图7):经过对图片及影像资料分析，在添加本发明诱食剂的饵料区域摄 食的南美白对虾数量占试验对虾总数量的70%，本发明诱食剂的诱食效果明显。
[0063] 试验例4肠道乳酸菌监测结果 将使用本发明诱食剂及对照虾池(未使用本发明诱食剂）的对虾进行解剖，取其肠道， 对肠道所含乳酸菌进行检测（图8)，结果发现使用本发明的诱食剂，使对虾肠道乳酸菌含量 大大增加，乳酸菌在对虾肠道能成功定植（图9)。本发明诱食剂拌喂后，对虾肠道乳酸菌数 目提升了 100倍（图10)。
[0064] 试验例5 本试验于2013年11月10日至30日选取广东省广州市金海水产养殖基地2 口南美白 对虾养殖池塘作为研究对象，通过设置饵料台，对养殖池塘对虾摄食状况的监测与统计来 研究判断本发明诱食剂的诱食效果。其中，试验塘(添加实施例6的诱食剂）与对照塘基本 状况见下表3 : 表3试验塘和对照塘的基本情况
结果表明：试验塘对虾平均摄食速度较快，对虾摄食量比对照组提高约10 % ;在阴雨 天中，保持了对虾正常摄食，增强了对虾的抗逆性，具体摄食状况详见图11。
[0065] 2014年1月8日至30日于福建漳浦县冬棚对虾高位池，统计结果表明：本发明诱 食剂诱食效果明显，高位池对虾摄食量从每餐40斤提升至45斤；对虾活力、状态明显提升。
[0066] 试验例6 本试验于2014年1月6日至20日选取辽宁省锦州市2 口海参苗室作为研究对象，通 过设置饵料网片，对海参苗室海参摄食状况的监测与统计来研究判断本发明诱食剂的诱食 效果。其中，试验塘(添加实施例6制备的诱食剂）与对照塘基本状况相同。
[0067] 试验结果表明：提高摄食率，同量饵料进食时间缩短3-4小时；网片附着率高，爱 上片，增进摄食量；海参状态好，抵抗力增加，消化吸收好；粪便整齐，无异味，产生有害气 体少，倒池时间延长2-4天，从而得到更多生长时间；网片摄食彻底，利于清洗、整理，降低 维护成本。
[0068] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰 也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种水产诱食剂，其特征在于，其活性成分为屎肠球菌〇5>?ter<9cocci/6· /aeciiM?) CGMCCNo. 9134的发酵液或发酵液的上清液。2. 如权利要求1所述的诱食剂，其特征在于，还含有质量分数5-10%的海盐和/或质量 分数0. 1-0. 5%的黄原胶。3. 如权利要求1或2所述的诱食剂，其特征在于，所述屎肠球菌CGMCCNo. 9134的发 酵液中的活菌数为lX109cfu/ml以上。4. 如权利要求1或2所述的诱食剂，其特征在于，发酵培养基包括10-50g/L果糖、 5-50g/L牛肉膏、10-20g/L酵母膏、l-15g/L硫酸镁、l-15g/LNaCl、l-15%CaC03。5. 如权利要求1或2所述的诱食剂，其特征在于，发酵条件如下：温度20-40°C，转速 50-200rpm，罐压为(λ01-0. 09兆帕，通风量为1:0. 1-1:0. 5vvm，培养10h-24h至活菌数为 lX109cfu/ml以上。
【专利摘要】本发明公开了一种水产诱食剂，其活性成分为屎肠球菌CGMCC？No.9134的发酵液或发酵液的上清液。本发明的屎肠球菌CGMCC？No.9134具有优异的耐热、耐胆盐性能，还具有优良的耐海盐性。本发明的诱食剂能有效促进水产动物的采食，促进肠道益生菌的定殖。CGMCC No913420140508
【IPC分类】A23K1/18, A23K1/16
【公开号】CN105325676
【申请号】CN201410386291
【发明人】马青山, 胡婷, 贠锦军, 王凡, 李晓清, 吴雅琨, 孙晓雯, 付维来, 陈慧鑫, 何增国
【申请人】北京大北农科技集团股份有限公司, 福建大北农水产科技有限公司, 天津昌农科技有限责任公司
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2014年8月7日