筒定容至1000ml，趁热分装在三角瓶中，在121°C温度下l.lkg/cm2压力中保持20min灭菌。灭菌结束后冷却至50°C左右，在超净工作台上将10wt%茶汁的PDA琼脂固体培养基倒入事先已经灭菌并干燥的培养皿中，待冷却即为制得的1wt %茶汁PDA琼脂固体培养基平板；
[0048](2)黑茶散茶金花菌发酵液的制备:接种已经分离纯化的黑茶金花菌于TOA液体培养基中，28 °C培养至OD值为0.7，用0.2μΜ过滤膜进行过滤灭菌，即得发酵液；
[0049](3)黑茶散茶金花菌培养基的制备:按照常规方法配制PDA固体培养基，灭菌后冷却至50°C左右，按照培养基量和金花菌发酵液体积比10:1添加制备好的发酵液，趁热倒PDA琼脂固体培养基平板；
[0050](4)黑茶散茶金花菌的培养、纯化:取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀释的各
0.5ml涂布于改良PDA平板超净台上吹干，28°C培养2-3天，挑取金黄色优势菌落，画线接种至同样的改良的TOA平板上，同样条件继续培养直到纯化;判断方法:当黑茶散茶金花菌落呈现金黄色，菌落形态相同、大小一致，无其它杂菌生长即表示黑茶散茶金花菌已经纯化分离；
[0051 ] (5)黑茶散茶金花菌的保存:用改良PDA斜面管保存于4°C冰箱中或用改良PDA液体培养基制成孢子悬液加体积浓度为50 %灭菌甘油于-70 0C冰箱保存；
[0052](6)黑茶散茶金花菌干粉的制备，具体步骤为:
[0053]61)渥堆:将干燥的黑毛茶原料用喷雾器喷洒少量水，水分控制在15wt%，温度控制在24°C，空气相对湿度至少80%，渥堆14h;
[0054]62)蒸茶:用105Γ的蒸汽蒸4min;
[0055]63)喷洒黑茶散茶金花菌:将一定量保存好的黑茶散茶金花菌喷洒在经蒸汽处理后的茶叶上，添加量为0.25ml/100g ；
[0056]64)烘茶:将黑茶散茶金花菌喷洒过的黑毛茶用保鲜袋密封，再用112°C蒸汽进行蒸汽杀菌15min;
[0057]65)茶叶发花:蒸汽杀菌后的茶叶含水量控制在23wt%范围内，温度控制在33°C，空气相对湿度控制在81%;
[0058]66)高温盐水固定金花:将保鲜膜撕掉，向发花后茶叶均匀喷洒质量分数为1%的食盐水，放入灭菌器中150°C高压蒸汽1min;
[0059]67)干燥:干燥温度控制在41 °C，先低后高，干燥至含水率14wt %以内；
[0060]68)黑茶散茶金花菌干粉的制备:在超净工作间，将干燥好的含金花菌的黑毛茶脱落金花菌，机械粉碎，然后过200目筛，65 °C干燥，即得；
[0061 ] (7)黑茶散茶金花菌胶囊的制备，具体步骤为:
[0062]71)将药物充填于空心胶囊中，其中空心胶囊由市场购得，选可塑性强，透明度好，并含有改性淀粉25-75wt %、卡拉胶10-30wt %、增塑剂(山梨醇)10_25wt %、水40_50wt %、增稠剂(海藻胶和羟丙甲纤维素)2_12wt% ;
[0063]72)将10mg黑茶散茶金花菌干粉加辅料以17的％改性淀粉为稀释剂，以2.0wt%滑石粉为助流剂等制成均匀的粉末或颗粒；
[0064]73)取空心胶囊，单独填充。
[0065]上述黑茶散茶金花菌胶囊含黑茶散茶金花菌干粉的剂量为:每粒10mg和150mg两种规格。
[0066]本发明通过对黑茶散茶进行系统的处理，大量繁殖黑茶散茶金花菌有益菌，使其成为繁殖过程中的优势菌，得到干粉后，制成胶囊，该胶囊质量稳定，具有提高人体免疫力、降糖、降血脂和抗肿瘤等多方面人体排毒功效。
[0067]对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
[0068]此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
【主权项】
1.黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)黑茶散茶的处理； (2)黑茶散茶金花菌发酵液的制备； (3)黑茶散茶金花菌培养基的制备； (4)黑茶散茶金花菌的培养、纯化； (5)黑茶散茶金花菌的保存； (6)黑茶散茶金花菌干粉的制备； (7)黑茶散茶金花菌胶囊的制备。2.根据权利要求1所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，所述的黑茶散茶的处理，步骤为:用小型粉碎机粉碎黑茶散茶，过200目筛，65°C干燥，2h后称取2g黑茶散茶样品，定容20ml，分别用10倍、100倍、1000倍、10000倍、10000倍梯度稀释为20ml，取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀释的黑茶散茶样品改良PDA平板。3.根据权利要求2所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌发酵液的制备，步骤为:接种实验室已经分离纯化的黑茶金花菌于PDA液体培养基中，28°C培养至OD值为0.6-0.8，用0.2μΜ过滤膜进行过滤灭菌，即为制备好的黑茶散茶金花菌发酵液。4.根据权利要求3所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌培养基的制备，步骤为:该黑茶散茶金花菌培养基是改良的PDA固体培养基，其改良的方法为按照常规方法配制PDA固体培养基，灭菌后冷却至50 V左右，按照培养基量和黑茶散茶金花菌发酵液体积比10:1添加制备好的黑茶散茶金花菌发酵液，趁热倒平板。5.根据权利要求4所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌的培养、纯化，步骤为:取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀释的黑茶散茶样品各0.5ml涂布于黑茶散茶样品改良TOA平板超净台上吹干，28°C培养2-3天，挑取金黄色优势菌落，画线接种至同样的黑茶散茶样品改良的TOA平板上，同样条件继续培养直到纯化;纯化的判断方法为:当黑茶散茶金花菌落呈现金黄色，菌落形态相同、大小一致，无其它杂菌生长即表示黑茶散茶金花菌已经纯化分离。6.根据权利要求5所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌的保存，步骤为:用改良PDA斜面管保存于4°C冰箱中或用改良PDA液体培养基制成孢子悬液加体积浓度为50 %的灭菌甘油于-70 0C冰箱保存。7.根据权利要求6所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌干粉的制备，步骤为: 61)渥堆:用喷雾器在干燥的黑毛茶原料上喷洒少量水，水分控制在14-16wt%，温度控制在22-25°C，空气相对湿度至少80%，渥堆10-15h; 62)蒸茶:用100-106°C的蒸汽蒸4min; 63)喷洒黑茶散茶金花菌:将一定量保存好的黑茶散茶金花菌喷洒在经蒸汽处理后的茶叶上，添加量为0.25ml/100g; 64)烘茶:将黑茶散茶金花菌喷洒过的黑毛茶用保鲜袋密封，再用100-115°C的蒸汽进行蒸汽杀菌15min; 65)茶叶发花:蒸汽杀菌后的茶叶含水量控制在20-24wt%范围内，温度控制在30-35°C，空气相对湿度控制在70-85% ； 66)高温盐水固定金花:将保鲜膜撕掉，向发花后茶叶均匀喷洒质量分数为1%的食盐水，放入灭菌器中150 °C高压蒸汽1min; 67)干燥:干燥温度控制在38-42°C，先低后高，干燥至含水率14wt%以内； 68)黑茶散茶金花菌干粉的制备:在超净工作间，将干燥好的含金花菌的黑毛茶脱落金花菌，机械粉碎，然后过200目筛，65 °C干燥，即得。8.根据权利要求7所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备，步骤为: 71)备好空心胶囊； 72)将50-150mg的黑茶散茶金花菌干粉加辅料，制成均匀的粉末或颗粒； 73)取空心胶囊，单独填充。9.根据权利要求8所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，所述黑茶散茶金花菌胶囊含黑茶散茶金花菌干粉的剂量为:每粒10mg和150mg两种规格。10.根据权利要求8所述的黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，其特征在于，所述辅料包括改性淀粉和滑石粉。
【专利摘要】本发明公开了一种黑茶散茶金花菌胶囊的制备方法，包括以下步骤：(1)黑茶散茶的处理；(2)黑茶散茶金花菌发酵液的制备；(3)黑茶散茶金花菌培养基的制备；(4)黑茶散茶金花菌的培养、纯化；(5)黑茶散茶金花菌的保存；(6)黑茶散茶金花菌干粉的制备；(7)黑茶散茶金花菌胶囊的制备。本发明通过对黑茶散茶进行系统的处理，大量繁殖黑茶散茶金花菌有益菌，使其成为繁殖过程中的优势菌，得到干粉后，制成胶囊，该胶囊质量稳定，具有提高人体免疫力、降糖、降血脂和抗肿瘤等多方面人体排毒功效。
【IPC分类】A23L33/00, A23L5/00, A23L31/00
【公开号】CN105559054
【申请号】CN201510940359
【发明人】李定国, 杨小平, 刘石泉, 吴丽丽
【申请人】永嘉名顶农业开发有限公司
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2015年12月15日